特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京6mL亲和层析柱促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京6mL亲和层析柱促销
品Pai:百奥莱博
编号:BTN110809
产地:国产|进口
英文名:Affinity Chromatography Colum(6mL)
本产品适用范围广泛,可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子;还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。
亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原-抗体、酶-底物或YZ剂、激素-受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法,其示意图如下:
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
常用亲和标签及纯化方案:
北京6mL亲和层析柱促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·PCR法DNA探针生物素标记试剂盒
编号:BTN90604B
英文名称:PCR DNA Labeling Kit(Biotin)
规格:5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR,ZH得到的PCR产物将带有标记,可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下:
产品特点:
1.一站式,本试剂盒提供经过优化的试剂,不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针,足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针,也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP,90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记),有效降低了空间阻碍,检测效果ZJ。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
2×标记专用PCR Mix | 500μl |
dNTP,2mM each | 50μl |
含Biotin-11-dUTP的dNTP | 25μL(仅B有) |
含DIG-11-dUTP的dNTP | 25μL(仅C有) |
超纯水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
注:标记专用PCR Mix不含dNTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:一:准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物,使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少,探针杂交信号强度减弱;过长则非特异杂交增加,背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵,所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记,而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率,即先制备非标记PCR产物,再以之为模板制备标记的PCR产物。
二:非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系:
成份 | 用量 |
2×标记专用PCR Mix | 25μl |
dNTP,2mM each | 5μl |
自备的探针引物一(10pmol/μL) | 1μL(10μM) |
自备的探针引物二(10pmol/μL) | 1μL(10μM) |
自备的模板DNA | 1μg基因组DNA或1ng质粒DNA |
超纯水 | 补到50μL |
5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物,并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意:采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三:标记PCR反应(做一个不加标记的对照用于定量)
说明:在设置下面反应时,如果加一种引物,就得到单链标记的PCR产物;如果加两种引物,则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用,但杂交时变性的双链彼此还会复性,这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争,降低杂交效率,因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。
成份 | 样品 | 对照 |
2×标记专用PCR Mix | 25μl | 25μl |
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP | 5μl | 不加 |
dNTP,2mM | 不加 | 5μl |
双链标记:探针引物一和引物二 单链标记:探针引物一或引物二 | 每种50 pmol 一种50 pmol | 每种50 pmol 一种50 pmol |
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng) | 10 ng | 10 ng |
超纯水 | 补到50μL | 补到50μL |
注意:本试剂盒提供的dNTP混合物中,标记底物与非标记底物的比例已经进过优化,如果自备标记dUTP,其与dTTP的ZJ比例需要优化,标记不同,比例不同。对DIG-11-dUTP,ZJ比例1:3;对BrdUTP,ZJ比例为1:1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR,但需要进行下列修改:一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物,探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构,效果反而更好),所以可以增加循环数;二是延伸时间增加15秒,因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢;三是降低复性温度5-7℃,因为标记核苷酸参入到DNA后,新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量:取标记反应和对照反应的产物1-5μl,在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳,并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素,地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
注意:如果扩增的是单链DNA探针,其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的,而单链DNA没有碱基对,只有一些局部区域折叠形成的有限双链区,因此能结合的EB很少),因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度,可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化,直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化,请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。
北京6mL亲和层析柱促销关键词:6mL亲和层析柱,Affinity Chromatography Colum(6mL),BTN110809
·非冻型尿液DNA保存液
编号:BTN90315
英文名称:DNAhold Urine RNA non-freezing preservation
规格:100mL
本品在室温条件下长期保存用于DNA提取的尿液样品保存液。它能够GX、长期保证DNA分子的完整性。
产品特点:1. 保存时间长,可室温保存尿液DNA长达六个月,尤其适合于野外尿液样品采集。
2. DNA完整性好,纯化后长度在20-50 Kb之间。
3. DNA无化学修饰,提得的DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
4. 能防止尿液在4℃结晶。
5. 安全可靠,本产品无毒无害。
6. 使用简单,直接把新鲜的尿液样品与本产品混合即可。
储存条件:室温运输及保存,有效期两年。
使用方法:(以DNA提取为例)
1. 迅速将尿液与本产品按10:1的比例混合。
2. 常温闭光保存直到使用。
3. 使用常规液体DNA提取方法提取DNA即可。推荐使用柱式尿液DNA提取试剂盒(BTN90314),使用柱式尿液DNA提取试剂盒提取本产品保存的尿样,兼容性好,提取效率更高。
4. 提取得到DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
北京6mL亲和层析柱促销关键词:6mL亲和层析柱,Affinity Chromatography Colum(6mL),BTN110809
PY02-163 XLD琼脂 250克
茶碱 L-(+)-2-Chlorophenylglycine 58-55-9
2′-脱氧鸟苷-5′-单磷酸二*盐 DMTMM 33430-61-4
ARB12647 大鼠窖蛋白CAveolIn1(CAv-1)ELISA检测服务 Rat caveolin-1,cav-1 ELISA KIT
ARB11506 人脂蛋白脂酶(LPL)定量分析 Human lipoprotein lipase,lpl ELISA KIT
BTN80911 蛋白酶K溶液 Proteinase K Solution
细菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法) 50T|100 T
ARB11834 人醛固酮(ALD)酶联免疫定量检测 Human aldosterone,ald ELISA KIT
ARB13513 鱼类甲状腺素(T4)免费代测 Fish thyroxine,t4 ELISA KIT
F030837 BIOTIN标记山羊抗人IgG FC抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*BIOTIN
ARB12322 大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪*酸激酶2(TIe-2)elisa测定使用说明书 Rat tyrosine kinase with immunoglobulin-like and egf-like domains 2,tie-2 ELISA KIT
ARB11021 人尿游离皮质醇(UFC)ELISA检测服务 Human urinary free cortisol,ufc ELISA KIT
BL1066 MH(B)培养基
5-肌苷三磷酸三*盐 DSC 35908-31-7
F030433 胶体金标记山羊抗人IgG(H+L)抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*GOLD
ARB13431 鸡分泌型免疫球蛋白A(SIgA)定量分析 Chicken secretory immunoglobulin a,siga ELISA KIT
PY08-078 绿浓菌素测定用培养基平板 9CM 10皿/盒,用于绿脓杆菌绿浓菌素的测定试验。
ARB13337 牛免疫球蛋白G(IgG)elisa检测操作说明书
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京6mL亲和层析柱促销。
温馨提示:不可用于临床ZL。