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名称:Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法) 细胞凋亡与增殖
编号:KFS336
规格:20T
英文名:Ki67 cell proliferation Detection Kit
产地:国产|进口
Ki67 蛋白是细胞周期相关的一种核蛋白,主要表达于细胞增殖分裂的各个时期(G1、S、G2 和M 期),但是在静息的细胞(G0 期)中不表达。Ki67 常用于检测肿瘤细胞的生长指数(免疫组化法利用计算细胞总数中的Ki67 阳性细胞数所占比例得到Ki67 指数)。
Ki67 通常通过标记抗Ki67 的抗体(FITC 绿色荧光)和DNA 染料碘化丙啶(PI,红色)而利用流式细胞仪检测来实现对细胞周期的检测。
操作方法
1. 在最适的环境下培养细胞。
2. 除去培养液,用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶处理和收集细胞,离心,(注意1)保证每管细胞数在106 个。
4. 用0.3 ml PBS 轻轻的重悬细胞, 然后慢慢加入0.7 ml 预冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混匀。在4°C 至少1h。(注意2)
5. 沉淀细胞,完全吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗细胞2 次。
7. 用100μl 抗体孵育液(0.5% Tween-20/1%BSA/PBS)重悬细胞,加入1ul Ki67 抗体(1μg/106 cells),室温孵育1 小时。
8. 离心收集细胞,用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 离心收集细胞,用50μl 抗体孵育液重悬,加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC,室温孵育30 分钟。离心收集细胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有终浓度为10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS(pH7.4)重悬细胞。
11. 避光使细胞在室温下孵育20min 后,离心收集细胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后,转移至流式检测管中重悬。
12. FACS 检测或者储存于4℃。
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Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法) 细胞凋亡与增殖关键词:KFS336,Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法),Ki67 cell proliferation Detection Kit
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·PCNA细胞增殖检测试剂盒(IHC法)
编号:KFS333
英文名称:PCNA cell proliferation Detection Kit(IHC)
规格:50T
PCNA 是细胞DNA 多聚酶的“δ”辅助蛋白,是真核细胞DNA 合成时所必需的一种酸性核蛋白。
PCNA 在细胞核内合成,并储存在核内,细胞处于静止状态时,其含量很低,当细胞进入增殖周期中,其表达明显增加,故PCNA 的表达高低可反映细胞增殖的活跃程度。在活检或手术切除的组织切片或细胞涂片上,用免疫技术检测到PCNA 表达ZG有助于肿瘤组织的诊断。
·细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM,PI法,适用于FACS、FM)
编号:KFS337
英文名称:Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells 说
规格:1000T
本试剂盒为动物细胞死活检测提供了双色荧光染色方法。本试剂盒采用两种广泛常用的荧光探针,通过检测细胞内酯酶活性和质膜完整性两个方面反映细胞活力。本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光多孔板、扫描仪、流式细胞仪以及其他荧光检测系统。本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞,包括贴壁细胞核某些组织,但不适用与细菌、酵母。该方法更快捷安全且灵敏度更高。
原理:在*黄素AM 存在活细胞内时,其特点就是由于胞内无所不在的酯酶活性作用,由几乎无荧光、具有细胞膜透性的*黄素AM生成具有强烈荧光信号的绿色荧光物质(Ex/Em:495nm/520nm)。而对于受损的细胞膜来说,碘化丙啶(PI)可以传过进入细胞,与核酸结合,荧光信号从而放大40 倍,产生一个明亮的红色荧光信号的死细胞(Ex/Em:530nm/620nm)。
Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法) 细胞凋亡与增殖关键词:KFS336,Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法),Ki67 cell proliferation Detection Kit
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·collagen I免疫组化试剂盒(IHC)
编号:KFS022
规格:50T
本试剂盒可用于免疫组织化学方法以显示人、大、小鼠来源的组织样本Collagen I抗原分布。
本试剂盒适用于常规固定石蜡包埋切片、冰冻切片、培养固定的细胞涂片等。我司即用型一步法免疫组化检测试剂盒与常规免疫组化染色试剂盒相比,具有高灵敏性、高特异性及操作简便的优点。多个HRP聚合物直接与二抗相连,大大放大了抗原抗体结合的信号,减少了孵育步骤,孵育时间缩短为10分钟。试剂盒不含有生物素,完全避免了内源性生物素造成的背景影响。试剂盒提供的DAB显色试剂为增强型显色试剂,且自带稀释液,避免了由于水质的不同对DAB显色造成的影响;与一般DAB试剂相比,增强型的稳定性显著提高,显色更醒目,敏感性更高。
注意事项
1. 检测标本时需同时做阴性对照和阳性对照。
2. 增强剂中含有0.1% ProClin 300 防腐剂,使用时请注意自我防护。
3. DAB 显色液需现用现配,避光放置,且在2 小时内染色。
4. 在超过有效期的试剂盒中一种或多种试剂的活性可能降低,因此不得使用过期的试剂盒,不同批号间试剂盒也不能交叉混用。
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温馨提示:不可用于临床ZL。