5M甜菜碱溶液(PCR级)厂家价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")5M甜菜碱溶液(PCR级)厂家价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：5M甜菜碱溶液(PCR级)厂家价格
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：5×1ml
英文名：5M Betaine Solution(PCR Grade)
甜菜碱，DMSO和甲酰胺有助于减少富含GC模板的二级结构和对这些模板扩增，甜菜碱的浓度通常是0.1M～3.5M，DMSO的浓度在2%～8%之间，而且10%的DMSO会使 Taq polymerase的活性降低达50%，甲酰胺通常使用浓度为1%～5%，根据我们经验，甜菜碱和DMSO联合使用的效果优于甲酰胺。

使用方法：
1、-20℃保存的甜菜碱溶液常温融化，混匀。
2、根据根据PCR反应体系，加入适量体积的5M甜菜碱溶液。

 

	20μl 体系	反应体系终浓度
10×PCR Buffer	2μl	1×
5M Betaine*	4μl	1 M
模板	0.05-0.5μg	as you wish
上游引物 10μM	0.5μl	0.2μM
下游引物 10μM	0.5μl	0.2μM
dNTP10mM	0.5μl	200μM
Taq	0.5-1μl	2.5-5 U
灭菌水	up to 20μl

注：不同模板，不同片段的扩增可能需要不同浓度的甜菜碱，可以适当调节加入体积，找到适合自己反应的甜菜碱浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

关于5M甜菜碱溶液(PCR级)厂家价格的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
编号：RFT076
英文名称：SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
规格：50次
本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。

试剂盒组成：

组份	规格	保存条件
40%PAA(29:1)	100 ml	4℃
4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8	100 ml	4℃
4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8	50 ml	4℃
APS(干粉)	0.5 g	RT
TEMED	0.5ml	4℃，避光
4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂)	1 ml	-20℃
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(干粉)	1 L	RT

使用方法：
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一)，再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。

表一：不同浓度的SDS-PAGE分离胶的ZJ分离范围：

SDS-PAGE分离胶浓度	ZJ分离范围
6%	50-150kD
8%	30-90kD
10%	20-80kD
12%	12-60kD
15%	10-40kD

配制分离胶前，根据以下配方准备10% APS：
10% APS配制-5 ml：将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中，彻底溶解后分装，1 ml/支，-20℃备存，每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间，以防失效。10%APS在4℃有效期为一周，-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20度保存的10%APS。

制备分离胶步骤：
1、参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
2、按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合；加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
3、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可)，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，说明凝胶已聚合

表二：SDS-PAGE分离胶配方表

组份	不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)
	5ml	10ml	15ml	20ml
8％胶
H2O	2.7	5.4	8.1	10.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1	2	3	4
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
10％胶
H2O	2.45	4.9	7.35	9.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.25	2.5	3.75	5
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
12％胶
H2O	2.2	4.4	6.6	8.8
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.5	3	4.5	6
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2
15％胶
H2O	1.825	3.65	5.475	7.3
4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8	1.25	2.5	3.75	5
40％ PAA(29:1)	1.875	3.75	5.625	7.5
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10％ APS	0.05	0.1	0.15	0.2

二、浓缩胶制备：
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合；加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
5、静置30-60分钟，等待浓缩胶聚合。

表三：SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表

组份	不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)
	2 ml	4 ml	5 ml	10 ml
H2O	1.17	2.34	2.925	5.85
4×Tris/SDS浓缩胶buffer pH6.8	0.63	1.26	1.575	3.15
40％ PAA(29:1)	0.2	0.4	0.5	1
TEMED	0.002	0.004	0.005	0.01
10％ APS	0.02	0.04	0.05	0.1

三、电泳：

凝胶凝固好后，根据以下配方准备电泳缓冲液。
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液的配制-1 L：将一包5×Tris-甘*酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中，加入约900 ml水彻底溶解，用水定容至1 L，即配成5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘*酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔)，轻轻的拨出梳子，随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。上样，电泳，一般是浓缩胶80V，分离胶120V恒压，等指示前沿*酚兰电泳到分离胶下缘后，结束电泳，染色或者进行下一步实验。


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·PCR产物纯化试剂盒
编号：RFT031
英文名称：PCR product purification kit
规格：100次|200次
本试剂盒采用离心吸附柱结合独特的缓冲液系统，从酶切、PCR等反应溶液中纯化DNA片段，同时除去蛋白质、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp–10kb的DNA片段，回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30－50%)。每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为10μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

试剂盒特点：
1、结合液PB为亮黄色，便于观察体系的pH是否合适。
2、操作快捷，单个样品操作少于10分钟。

操作步骤：
如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、在PCR反应液中直接加入5倍体积的PB液，颠倒混匀后，全部加入到吸附柱CA2中，10000g离心30-60秒，到掉收集管中的废液，将吸附柱CA2重新放入收集管中。
注意：
a.如果PCR反应体系使用了石蜡油，无需去除，但要使用10倍体积的PB液。
b.如果反应体系小于50μl，用水补至50μl体系，再加入PB液。
c.如果体系体积大于700μl，请分次上柱，保证全部溶液均加入到吸附柱中。
2、向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，10000g离心30-60秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。
3、向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW，10000g离心30-60秒，倒掉废液。
4、将离心吸附柱CA2放回收集管中，10000g离心2分钟，尽量除去漂洗液。
注意：此步必不可少！如果漂洗液有残留，将会影响回收效率和DNA质量，进而影响下游实验；离心后将吸附柱盖子打开，室温放置2分钟，这样将有助于彻底挥发残余乙醇。
5、将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟。10000g离心2分钟收集DNA溶液。
注意：
a.可将洗脱缓冲液EB预热到60-70℃后再加到吸附膜上，这样可以提高洗脱效率。
b.CA2柱的洗脱体积不应少于20μl，体积过小将会降低回收效率。
c.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率
6、DNA产物-20℃保存。

储存条件：室温，有效期12个月。


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