WE0120型血液直接PCR扩增试剂盒说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应WE0120型血液直接PCR扩增试剂盒说明书，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：WE0120型血液直接PCR扩增试剂盒说明书
规格：50μl×40次|50μl×200次
编号：WE0120
英文名：Blood Direct PCR Kit
产地：国产|进口
  本试剂盒是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系，本产品使用简便，无需事先提纯可直接用血液为模板扩增目的基因，可有效扩ZGGC含量的模板和引物。

试剂盒组成：

 

组份	50μl×40次	50μl×200次
2×Blood Direct PCR Mix	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意事项：建议使用时添加≤10%的全血为模板，加上血液后用涡旋器将管中各组分轻轻混匀。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	20μl反应体系
2×Blood Direct PCR Mix	25μl	10μl
Forward Primer，10μM	1μl	0.4μl
Reverse Primer，10μM	1μl	0.4μl
Template Blood	0.5-5μl	0.25-2μl
ddH2O	up to 50μl	up to 20μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	35-40个循环
退火	55-60℃	30 s
延伸	72℃	30-60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所含热启动酶的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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环偶氮脒类引发剂V601 DAM 2589-57-3
NF-205 羊抗人PA血清
PY02-264  pH7.0*化*-蛋白胨缓冲液  250克  
F030430 胶体金标记兔抗人IgG抗体 Rabbit Anti-Human IgG*GOLD
BTN130832 通用型MLPA试剂盒 Universal MLPA Kit
BL1420 5%BSA封闭液
BL1434 1M Tris-HCl(PH=7.0)
ARB12441 大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)检测服务 Rat bone-specific alkphase b,alp-b ELISA KIT
ARB12233 大鼠肌酸激酶(CK)含量分析 
69-57-8 Penicillin G Sodium salt 青霉素G*盐
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP比色法)   50T
DP210 大量琼脂糖凝胶回收试剂盒
ARB12437 大鼠骨*素/骨谷*酸蛋白(OT/BGP)Elisa方法检测 Rat osteocalcin/bone gla protein,ot/bgp ELISA KIT
PY08-044A  营养肉汤 225ml  20瓶/箱，用于一般营养不苛求细菌的培养
乙酸* AHMT 127-08-2
ARB12734 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)Elisa分析 Mouse 8-hydroxy-desoxyguanosine,8-ohdg ELISA KIT
BTN121001 液体样品DNAOUT Liquid Sample DNAOUT
ARB11294 人*腔蛋白(CALU)ELISA检测服务 Human calumenin,calu ELISA KIT
WE0120型血液直接PCR扩增试剂盒说明书关键词：Blood Direct PCR Kit,血液直接PCR扩增试剂盒,WE0120


·细菌RNA提取试剂盒(含DNase I)
编号：WE0199
英文名称：RNAtiqu Bacteria RNA Extraction Kit
规格：50次
  本试剂盒采用GX、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统，可从细菌或培养的动物细胞中快速提取总RNA。30-40分钟内即可完成反应，提取的总RNA纯度极高，没有蛋白质和其他污染，适用于RT-PCR、Real-Time RT-PCR、芯片分析、体外翻译等实验。

试剂盒组成：

组份	50次
DNase I	1000 U
10×Reaction Buffer	1000μl
Buffer RL	35ml
Buffer RW1	40ml
Buffer RW2(浓缩液)	11ml
RNase-Free Water	10ml
过滤柱FL及收集管	50套
吸附柱RM及收集管	50套
RNase-Free离心管(1.5ml)	100个

保存条件：DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存，其它组分室温(15～30℃)。

自备试剂：Lysozyme(WE0214S)、β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)配制溶液应使用无RNase的水。
3)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇至终浓度为1%，如1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL 4℃可保存1个月，如出现沉淀，请加热溶解后使用。
3、DY次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
4、如未特殊说明，所有离心步骤均在室温下进行，且所有操作步骤动作要迅速。

操作步骤：
1、4℃ 12000rpm(~～13400×g)离心2分钟收集菌体(菌体量ZD不超过1×109)，小心去除所有上清。
注意：上清如果有残留，会影响后续的消化过程。
2、用含有Lysozyme的100μl TE缓冲液彻底重悬菌体，室温孵育。具体配方和孵育时间如下：

	TE缓冲液中Lysozyme的终浓度	孵育时间
G-细菌	400μg/ml	3-5分钟
G+细菌	3 mg/ml	5-10分钟

3、加入350μl裂解液RL(使用前请检查是否加入β-巯基乙醇)，涡旋震荡混匀(此步骤可能出现不溶性沉淀)，将溶液与沉淀全部加入到已装入收集管的过滤柱中，12000rpm离心2分钟。
4、向上步得到的滤液中加入250μl无水乙醇，混匀(此时可能会出现沉淀)。将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱中，12000rpm离心1分钟，弃掉废液，将吸附柱重新放回收集管中。
5、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、配制DNase I 混合液：取52μl RNase-Free Water，向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl)，混匀， 配制成终体积为80μl的反应液。
7、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液，20-30℃孵育15分钟。
8、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟,弃废液。
10、重复步骤9。
11、将吸附柱放回收集管中，12000rpm离心2分钟。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱装入新的RNase-Free的收集管中，向吸附膜的中间加入30-50μl RNase-Free Water，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，-70℃保存RNA，防止降解。
注意：
1)RNase-Free Water体积不应小于30μl，体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量，可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤12。
3)如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，重复步骤12。

储存条件：室温(15～30℃)。


WE0120型血液直接PCR扩增试剂盒说明书关键词：Blood Direct PCR Kit,血液直接PCR扩增试剂盒,WE0120

F040310 小鼠IgG3抗原 Mouse IgG3
BL0878 兔抗人IgM免疫血清 0.5ml
ARB10156 人S100蛋白(S-100)elisa检测操作说明书 Human soluble protein-100,s-100 ELISA KIT
维生素K3 K-Lyte 58-27-5
ARB13985 猪基质金属蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)定量分析 Porcine tissue inhibitors of metalloproteinase 1,timp-1 ELISA KIT
9000-70-8 Gelatin   明胶
Acr-Bis(40%,29:1)   500ml
ARB12087 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)血清中含量检测 Rat aquaporin 3,aqp-3 ELISA KIT
*基肽酶染色液(同时偶联法)   3×20ml
PY02-128A  普通琼脂斜面培养基(pH8.0-8.2)  250克  
香柏油 Polyphenol oxidase 8000-27-9
62669-70-9 Rhodamine 123  罗丹明123
乳酸脱*酶(LDH)检测试剂盒(LD-P微板法)   100T
ARB11000 人泛素激活酶(E1/UBAE)elisa检测操作说明书 Human e1/ubiquitin-activating enzyme,e1/ubae ELISA KIT
ARB11193 人组织因子(TF)含量测试 Human tissue factor,if ELISA KIT
ARB12545 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)代做ELISA实验 Rat insulin-like growth factor binding protein 3,igfbp-3 ELISA KIT
BL0961 封闭用马血清(原液) 10ml
ARB12719 大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)血清中含量检测 Rat triggering receptor expresses on myeloid cells-1,trem-1 ELISA KIT
巴比*(代"妥")*缓冲液(pH7.4)   100ml

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