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北京百奥莱博供应的酵母蛋白抽提试剂盒现货价格用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多酵母蛋白抽提试剂盒等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:酵母蛋白抽提试剂盒现货价格
规格:25次|100次
英文名:Yeast Proein Extraction Kit
编号:WE0263
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
本试剂盒用于从酵母细胞中快速,GX而温和地抽提可溶性蛋白。采用试剂处理,可以避免激烈的机械处理造成的氧化和热度升高对目的蛋白的破坏作用。使用方便,避免了重复性差的研磨法,超声波法或压榨法对酵母细胞的破坏。本抽提试剂可用于提取啤酒酵母、裂殖酵母、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌及革兰氏阳性菌的蛋白抽提。与传统方法相比,处理得到的提取液中可溶蛋白产量大,活性高,提取快速;提取液可以直接用于Ni-NTA、GST等亲和纯化。酵母蛋白抽提试剂盒中带有蛋白酶YZ剂混合物,可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
试剂盒组成:
组份 | 25次 | 100次 |
Yeast Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、提取液中含有去污剂,不宜使用受去污剂干扰的蛋白定量方法。
2、为了获得实验ZJ效果,请根据实验调整ZJ使用量。
使用方法:
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Yeast Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、将酵母培养液3000×g,4℃,离心5分钟,收集菌体。
3、取适量Yeast Protein Extraction Reagent,抽提蛋白前2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail,即1×工作液。
4、每50 mg酵母加入500μl 1×工作液,涡旋振荡或上下吸打使酵母充分重悬。
5、将细胞悬液置于冰上,孵育20分钟(每间隔5分钟轻微摇晃一下)。
6、~13400×g离心10分钟。
7、转移上清至新管中,进行下一步的蛋白含量测定、纯化及分析。
储存条件:-20℃
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我公司的
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酵母蛋白抽提试剂盒现货价格关键词:Yeast Proein Extraction Kit,酵母蛋白抽提试剂盒,WE0263
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·RIPA裂解液(强)
编号:WE0258
英文名称:RIPA Lysis Buffer(Strong)
规格:100ml
RIPA裂解液是一种传统的组织以及细胞快速裂解液,主要用于从动物组织和哺乳动物细胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解贴壁细胞和悬浮细胞。按照其裂解液的强度可以分为强、中、弱三类,具体特点和差异请参考附表2,可根据实验需求选择相应产品。RIPA裂解液(强)可以有效提取细胞核、细胞膜和胞浆蛋白,提取的蛋白可应用于蛋白定量、Western Blot、IP等检测分析。
RIPA裂解液(强)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1%Triton X-100,1% sodiu*(代"m") deoxycholate,0.1% SDS以及sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等。
注意事项:
1、为防止蛋白降解,所有的操作尽量在冰上进行。
2、使用RIPA裂解液得到的蛋白样品,可采用BCA法进行蛋白定量,以测定蛋白浓度。产品可单独向本公司订购,如:WE0276 BCA蛋白定量试剂盒。本品含有高浓度的去垢剂,不能用Bradford法进行蛋白定量。
3、建议在使用RIPA裂解液前,向溶液中加入蛋白酶YZ剂或磷酸酶YZ剂,以防止蛋白降解,或保持蛋白的磷酸化状态。产品可单独向本公司订购,如:WE0259 蛋白酶YZ剂混合物,WE0256 磷酸酶YZ剂混合物。
4、若需获得更高浓度的蛋白,应减少哺乳动物蛋白抽提试剂的使用量。
5、对于培养瓶中的贴壁细胞,推荐先使用常规方法消化细胞,再参考悬浮细胞蛋白提取步骤操作。
6、对于离心获得的细胞,若不确定细胞体积,可根据细胞数量计算RIPA裂解液的使用量。如5×106个Hela细胞约需加入500μl RIPA裂解液,以此类推。
使用方法:
一、细胞样品贴壁细胞蛋白抽提1、小心倾去贴壁细胞的培养液。
2、可选步骤:若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质,请先使用预冷的PBS漂洗细胞。
3.加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂),试剂使用量请参考附表1,在冰上用枪头吹打贴壁细胞。
表1 贴壁细胞RIPA 裂解液使用量推荐表
细胞培养板类型或培养面积 | RIPA 裂解液使用量 |
100 mm | 500-1000μl |
60 mm | 250-500μl |
6孔培养板 | 200-400μl /孔 |
24孔培养板 | 100-200μl /孔 |
96孔培养板 | 50-100μl /孔 |
4、将裂解液转移至新的离心管中,冰上孵育20分钟,使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中,进行下一步分析。
悬浮细胞蛋白提取1、悬浮细胞,2,500×g离心5分钟,弃去上清。
2、可选步骤:若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质,请使用PBS漂洗细胞。漂洗后的细胞悬浮液2,500×g离心5分钟,弃去上清。
3、加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂),每5×106细胞加入约200-500μl RIPA Lysis Buffer(Strong),吹打均匀。
4、冰上放置20分钟,使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中,进行下一步分析。
二、组织样品1、取适当的RIPA Lysis Buffer(Strong),在使用前2-3分钟内加入蛋白酶YZ剂。
2、称量实验组织的重量,按照1:10(g/ml)的比例加入RIPA Lysis Buffer(Strong)后将组织剪成细小碎片,用电动匀浆器匀浆处理。若需要浓缩的蛋白提取物,可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
3、冰上孵育20分钟,使细胞充分裂解。
4、14000×g 离心10分钟。转移上清液至新管中,进行下一步分析。
注:RIPA裂解液的裂解产物中可能会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为基因组。
表2 蛋白裂解液性能、参数比较 目录号 | WE0258 | WE0257 | | |
名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) | SDS裂解液 |
裂解强度 | 强 | 中 | 温和 | 强 |
有效裂解成分 | 1%Triton X-100, 1%脱氧胆酸*, 0.1% SDS | 1% NP-40, 0.5%脱氧胆酸* , 0.1% SDS | 1% NP-40, 0.25%脱氧胆酸* | 1%SDS |
膜蛋白提取 | 很好 | 较好 | 一般 | 很好 |
胞浆蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
核蛋白提取 | 很好 | 较好 | 较好 | 很好 |
主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,CO-IP | WB,CHIP |
储存条件:2~8℃
酵母蛋白抽提试剂盒现货价格关键词:Yeast Proein Extraction Kit,酵母蛋白抽提试剂盒,WE0263
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购酵母蛋白抽提试剂盒现货价格。
温馨提示:不可用于临床ZL。