英文名:One-Stop AT Cloning Kit
编号:BTN90801
规格:20次(A)/20次(B)
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
提示:本品仅用于科研实验,不能用作YL及临床诊断。
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AT克隆就是利用T载体两个3'端各带有一个T突出,而PCR扩增产物两个3'端各带有一个A突出的特点,在DNA连接酶的作用下,将PCR产物克隆到T载体中的过程,它是克隆PCR扩增产物的主要手段。
本产品提供了完成AT克隆的所有成份,具有下列特点:
1.一站式,用户只需要准备PCR产物即可进行AT克隆。
2.T载体由Xcm I酶切方法制备,两个5'端含T突出,自连率几乎为零。
3.克隆效率高,一次AT克隆实验一般能得到上百个重组子。
4.阳性率高,一般能到90%以上,大大缩短了筛选工作。
5.提供供两次实验用的对照插入片段,方便分析实验数据。
6.插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如Bst ZI、Eco RI、Not I),便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7.克隆位点两侧分别有T7和SP6 RNA聚合酶启动子,便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9.T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
10.含有丝状噬菌体f1 复制起始子,可以制备单链DNA。
使用及效果:
将1 μ L载体、1.5 μ L对照插入片段、2 μ L溶液A、1 μ L溶液B混合,加水到10μL,16℃保温30分钟到过了夜,65℃5分钟灭活连接酶。取5 μL转化100 μ L感受态细胞即可。涂盘得到的菌落用于提取质粒DNA,用Eco RI酶切质粒,有1.5K插入片段的就是重组子。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。感受态细胞需要干冰运输, -70℃保存,有效期6个月。
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·非同位素探针杂交试剂盒
编号:BTN121114
英文名称:Nonradioactive Probe Hybridization Kit
规格:5次(A)/5次(B)
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本产品是专门用于生物素和DIG标记的非同位素探针印迹膜杂交的试剂盒。其原理如下:
本产品具有下列特点:
1.即开即用,提供杂交和洗膜所需的溶液,用户不需要单独准备。A型适用于常规的DNA和RNA探针,B型适用于Oligo探针。
2.使用手册为生物素探针杂交专门优化,免去用户自己摸索条件。
3.足够5次大小为13×20cm的Southern或Northern印迹膜杂交。
4.可用于DIG和生物素标记的DNA、RNA和Oligo探针兼容。
5.采用精心优化的低温杂交液,使DNA-RNA或RNA-RNA等一般较高温度的杂交实验能在较低温度进行(降低RNA的降解)。
6.即可用于硝酸纤维素膜,也可用于中性尼龙膜,尤其适用于非同位素标记的探针的Southern和Northern杂交。
7.杂交的印迹膜可以用ECL检测、显色检测和放射自显影检测。
运输及保存:
杂交液低温运输,-20℃保存,其他成分常温,有效期为1年。
·非酶RNA清除剂1.0
编号:BTN51203
英文名称:Gel Based TAL Kit
规格:1.5mL
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本产品为非酶法质粒RNA和蛋白质污染的去除试剂,专用于从碱变性法纯化的质粒初粗提液中去除RNA污染和大部分蛋白质污染,在大规模制备质粒DNA时可以节约成本。
1.GX,能去除质粒粗提物中80%左右的RNA污染和60%的蛋白污染。而常用的RNase或LiCl处理只能去除RNA,不能去除蛋白质污染。
2.快速,整个过程只需要十余分钟,不需要37℃保温。
3.价格不到RNase A的1/2,在质粒的大规模制备时成本优势更加明显。
4.制备临床用(如基因ZL)的质粒DNA时,可以减少后期在临床报批、生产、质检和使用中的很多麻烦(使用生物来源的RNase A和蛋白酶时,容易带入对人体有害的内毒素、LPS等污染物)。
使用及效果:
将本产品与质粒溶液或碱变性法提取的澄清液(加溶液Ⅲ离心后所得溶液)按1:5的比例混合后室温离心10分钟即可去除RNA污染。
运输及保存:
常温,有效期一年。
·动物DNAOUT
编号:BTN3670
英文名称:Animal DNAOUT
规格:100mL/250mL
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本产品用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。
1.DNA纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.9左右,可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应,DNA产率为0.5-2 mg/g。
2.操作简单,整个过程室温操作约15分钟,适合大规模样品处理,不需要离心柱,不会发生该类产品经常发生的离心柱堵塞现象。
3.安全,本试剂盒对人体,无腐蚀性和刺激性气味。
4.性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
使用及效果:
将20-200 mg克剪碎的动物组织直接浸到1 mL动物DNAOUT溶液中匀浆(或液氮研磨后加入到1 mL动物DNAOUT溶液中),加入10 μ L RNase A,65℃保温5分钟后15000 g离心2分钟,上清用0.2 mL氯仿抽提两次,上清(约0.7 mL)加入等体积异丙醇后振荡混匀,15000 g离心5分钟,沉淀用1 mL 75%乙醇清洗2次后溶于缓冲液中待用。
运输及保存:
常温,有效期一年。
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