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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货即用型腔肠素h优惠价,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货即用型腔肠素h优惠价
编号:SY0236
品Pai:百奥莱博
英文名:Ready To Use Coelenterazine h
产地:国产|进口
规格:10 vials
本品是即用的腔肠素h,特别设计用于体内成像研究。通过最小化产品成分的变化,最小化冻融次数和严格控制不同批次的产品,确保客户得到高重复性的结果。产品的优点在于:1)溶于丙二醇和柠檬酸的腔肠素h,稳定性高,即开即用,不用考虑粉末配置成液体的稳定性问题。2)预制配方,不同批次间严格控制,特别设计用于体内研究;3)即用型产品通过最小化预成像准备步骤,减少时间和精力;4)经IVIS成像系统验证,控制体内成像质量;
本包装含有10瓶无菌腔肠素h即用型溶液,每瓶含1.2ml浓度为150 μg/mL的Coelenterazine h。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点:
1)能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;
2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光*离子指示剂;虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。
3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的*离子监测。
图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
腔肠素h(Coelenterazineh)是海肾荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的作用底物,其发光强度比天然腔肠素高10倍以上,适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子,可用于检测活细胞中*离子浓度。
运输和保存方法:冰袋运输。≤-20℃避光保存,放到-70℃长期避光保存。
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·AARE-GFP报告基因质粒
编号:SY0186
英文名称:AARE GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
AARE-GFP报告基因是用于检测ATF4/3/2转录活性水平为目的的报告基因。随着*基酸的消耗,GCN2被激活并且使elF2a磷酸化,这将使ATF的翻译增加,激活的ATF4将结合AARE调控目的基因的表达。
AARE-GFP报告基因主要检测细胞中Amino Acid Deprivation信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMAARE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个AARE结合位点,可以GX地检测ATF4/3/2的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得AARE-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGM AARE-GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMAARE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
北京现货即用型腔肠素h优惠价关键词:Ready To Use Coelenterazine h,即用型腔肠素h,SY0236
ARB14004 鹿内皮型一氧化*(代"氮")合成酶(eNOS)ELISA代测服务 Deer endothelial nitric oxide synthase,enos ELISA KIT
E0612 抗凝裂解马血(无菌)
ARB10338 人水通道蛋白4抗体(AQP-4-AB)含量测试
97-05-2 磺基水杨酸 5-Sulfosalicylic acid dihydrate
β-半乳糖苷酶染色试剂盒 100T
PY02-359-1 沙氏琼脂培养基(SDA) 250克
ARB13518 鱼类促性腺激素释放激素(GnRH)Elisa分析 Fish gnrh ELISA KIT
F040308 小鼠IgG2a抗原 Mouse IgG2a
ARB14137 猪淀粉酶(AMS)酶联免疫定量检测
BL0893 FITC标记羊抗人IgG抗体
HEPES溶液(Free Acid) 1mol/L 100ml
**尼考 Papain 73231-34-2
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·细胞增殖与示踪检测试剂盒
编号:SY0509
英文名称:CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit
规格:500T
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE对细胞进行示踪及增殖检测的试剂盒,由CFDA,SE粉末、溶剂及相关细胞染色缓冲液组成,该试剂盒主要工作原理为:CFDA, SE具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE),后者可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的*基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。
CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。CFSA,SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。
CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
本品为CFDA,SE细胞增殖与示踪检测试剂盒,包含配制CFDA,SE储存液所需的溶剂和细胞标记用的染色缓冲液,简化了实验前期准备工作。另,CFDA,SE标记细胞一般15min即可完成,对于不同细胞,需要自行摸索ZJ标记时间。按照每个样本的标记体积为2ml计算。
注意事项
1)CFDA,SE易被水解,在水溶液中会很快变质。因此保存过程中粉末或者储存液都需干燥保存;而且使用过程中避免接触水。但在标记细胞的过程中和水接触是在许可范围内的。
2)CFDA,SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,于20-25℃水浴温育片刻至全部融解后方可使用。
3)不同的细胞其细胞内酯酶活性不同,因此染色效果具有差异性。
4)虽然本试剂盒已对CFDA,SE染色体系做了优化处理,但建议使用者根据自身的细胞类型,培养条件以及应用的不同来梯度摸索ZJ的工作浓度,以ZD浓度得到适宜的标记效率为准。
5)荧光染料均存在淬灭问题,染色过程需尽量避光。
6)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃,有效期1年
我公司生产供应销*(代"售")的报告基因检测正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购北京现货即用型腔肠素h优惠价。
温馨提示:不可用于临床ZL。