北京细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒厂家在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒厂家
英文名：Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
编号：YT041
本试剂盒提供了一种比较简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提细胞核蛋白与细胞浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的细胞核蛋白与细胞浆蛋白的分离。抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

在研究细胞时经常要研究细胞的不同组份，而研究得最多的两个细胞组份就是细胞核和细胞浆。分离细胞核蛋白和细胞浆蛋白，不仅可以用于研究蛋白在细胞内的定位，而且很多时候分离出来的核蛋白可以用于转录调控方面的研究，例如EMSA(也称gel shift)，footprinting等。

本试剂盒是通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B，在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。ZH通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50个样品，如果每个样品的数量为约二百万细胞或约30-50毫克组织。

产品组份：
细胞浆蛋白抽提试剂A————10ml
细胞浆蛋白抽提试剂B————0.5ml
细胞核蛋白抽提试剂 ————2.5ml

注意事项
1. 需自备PMSF。PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。PMSF(YT615)可以向百奥莱博订购。
2. 抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3. 本试剂盒对于组织样品，仅适合于新鲜组织，对冻存过的组织抽提效果很差。可以抽提的组织样品数通常不足50个。
4. 使用本试剂盒抽提到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白均可直接用百奥莱博的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036、YT037)测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

欲咨询购买北京细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒厂家，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·胰酶细胞消化液(含酚红)
编号：YT900
英文名称：Trypsin-EDTA Solution with phenol red
规格：100ml
本品含0.25%胰酶、0.02%EDTA和酚红。该消化液经过过滤CJ，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点，通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。

注意事项：
1. 在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2. 胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。

储存条件：4℃，有效期12个月。

·小鼠抗PRMT5抗体
编号：YT753
英文名称：PRMT5 Mouse Monoclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于小鼠的抗PRMT5的单克隆抗体。
宿主：小鼠
克隆性：单克隆抗体
用途：WB,IHC
交叉反应性：人，小鼠，大鼠
分子量：72KDa
推荐稀释比例：WB(1:1000),IHC(1:100-200)

About this Antibody
Name	PRMT5 Mouse Monoclonal Antibody
Category	Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody
Isotype	IgG2a
Purification	ProA affinity purified
About the Immunogen
Immunogen	This antibody is produced by immunizing mice with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to a region of PRMT5.
Gene ID	10419
SwissProt	O14744
Synonyms	HRMT1L5; IBP72; JBP1; SKB1; SKB1Hs; PRMT5; Skb1Hs Methyltransferase
Category	Chromatin Regulation / Nuclear Function
Background	The formation of the spliceosome includes the assembly of Sm proteins inan ordered manner onto snRNAs. This process is mediated by the survivalof a motor neuron (SMN) protein, and is enhanced by modification of specificArginine residues in the Sm proteins to symmetrical dimethylarginines(sDMAs). sDMA modification of Sm proteins is catalyzed by the methylosome,a complex comprised of the type II methyltransferase PRMT5 (alsodesignated JAK-binding protein 1, JBP1), pICln and two novel factors. PRMT5binds the Sm proteins via their Arginine- and Glycine-rich (RG) domains, whilepICln binds the Sm domains. PRMT5 is a distinct member of the protein-Arginine methyltransferase (PRMT) family, and predominantly localizes tothe cytoplasm in a wide variety of tissues. PRMT5 also associates specificallywith the transcription start site region of the cyclin E1 promoter and, therefore,is involved in the control of transcription and proliferation.The geneencoding human PRMT5 maps to chromosome 14q11.2.

注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得ZJ的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·CENP-A抗体
编号：YT660
英文名称：anti-CENP-A antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的人CENP-A*基端(N-terminal)的一段多肽(4-17位*基酸)进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。

本CENP-A抗体识别总CENP-A(total CENP-A)，可检测内源性的CENP-A，未发现和其它histone蛋白有交叉反应。

染色质结构调控在真核细胞转录和复制的调节中起着重要作用。核小体是染色质的主要构架，由四种核心组蛋白(histones)组成，包括H2A、H2B、H3和H4。除了众多的翻译后组蛋白修饰包括磷酸化、乙酰化和甲基化等机制，细胞中组蛋白和类组蛋白
(variant histone or histone like protein)的互换，也可以直接或间接地影响染色质结构。着丝粒蛋白CENP(centromere proteins)包括CENP-A、CENP-B和CENP-C，是着丝点(kinetochore)的组成蛋白。CENP-A，也称CSE4(capping-enzyme suppressor 4-p)，是重要的类组蛋白，和histone H3的*基端有62%的同源性，它可以取代着丝粒异染色质上的histone H3，和DNA直接结合。CENP-A和histone H3的*基端47个*基酸残基没有相似性，CENP-A的*基末端可以结合核小体之间的linker DNA，协助着丝粒异染色质的正确组装和折叠。CENP-A的多种功能受磷酸化调节。CENP-A的Ser7在有丝分裂早期的初始阶段(early prophase)，在histone H3被磷酸化后，可以被Aurora-A和Aurora-B蛋白激酶所磷酸化。CENP-A的磷酸化对于着丝点(kinetochore)正确结合到微管和有丝分裂中染色体的正确排列都是必需的。CENP-A在有丝分裂后期的初始阶段(early anaphase)，在histone H3去磷酸化之前，会被去磷酸化。CENP-A和histone H3磷酸化的时间差异，提示两者尽管有非常相似的磷酸化位点，但它们的生物学功能是有所不同的。CENP-A敲除小鼠会出现严重的有丝分裂缺陷，导致胚胎致死，通常不超过胚胎发育的第6.5天。

组份：
CENP-A抗体————40μl
Western一抗稀释液————20ml

免疫原种属：人
免疫原：人工合成的人CENP-A*基端(N-terminal)的一段多肽(4-17位*基酸)
宿主：兔
用途：WB,IF
交叉反应性：人
抗体识别位点：CENP-A N-terminal
CENP-A分子量：～17kD
推荐稀释比例：WB(1:500),IF(1:100)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·生物素标记STAT5凝胶迁移探针(0.2μM)
编号：YT260
英文名称：Biotin-labeled STAT5 Probe For EMSA
规格：200μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的并经生物素(Biotin)标记的STAT5 consensus oligonucleotide。这个生物素标记的双链寡核苷酸含有公认的STAT5结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的生物素标记探针可以进行约200-400个样品的EMSA检测。

STAT5 consensus oligo的序列如下：
5"-AGA TTT CTA GGA ATT CAA TCC-3"
3"-TCT AAA GAT CCT TAA GTT AGG-5"

本生物素标记EMSA探针已经过纯化，可以直接用于EMSA结合反应。本生物素标记EMSA探针可以和百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)配套使用。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于基于生物素标记的EMSA检测的详细操作可以参考百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·磷酸化CENP-A(Ser7位点)抗体
编号：YT661
英文名称：anti-Phospho-CENP-A(Ser7) antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的含磷酸化Ser7的一段人CENP-A多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。

本Phospho-CENP-A(Ser7)抗体识别Ser7被磷酸化的CENP-A，可以检测内源性的Phospho-CENP-A(Ser7)蛋白水平，不识别其它组蛋白，包括histone H3。

染色质结构调控在真核细胞转录和复制的调节中起着重要作用。核小体是染色质的主要构架，由四种核心组蛋白(histones)组成，包括H2A、H2B、H3和H4。除了众多的翻译后组蛋白修饰包括磷酸化、乙酰化和甲基化等机制，细胞中组蛋白和类组蛋白(variant histone or histone like protein)的互换，也可以直接或间接地影响染色质结构。着丝粒蛋白CENP(centromere
proteins)包括CENP-A、CENP-B和CENP-C，是着丝点(kinetochore)的组成蛋白。CENP-A，也称CSE4(capping-enzyme suppressor 4-p)，是重要的类组蛋白，和histone H3的*基端有62%的同源性，它可以取代着丝粒异染色质上的histone H3，和DNA直接结合。CENP-A和histone H3的*基端47个*基酸残基没有相似性，CENP-A的*基末端可以结合核小体之间的
linker DNA，协助着丝粒异染色质的正确组装和折叠。CENP-A的多种功能受磷酸化调节。CENP-A的Ser7在有丝分裂早期的初始阶段(early prophase)，在histone H3被磷酸化后，可以被Aurora-A和Aurora-B蛋白激酶所磷酸化。CENP-A的磷酸化对于着丝点(kinetochore)正确结合到微管和有丝分裂中染色体的正确排列都是必需的。CENP-A在有丝分裂后期的初始阶段(early anaphase)，在histone H3去磷酸化之前，会被去磷酸化。CENP-A和histone H3磷酸化的时间差异，提示两者尽管有非常相似的磷酸化位点，但它们的生物学功能是有所不同的。CENP-A敲除小鼠会出现严重的有丝分裂缺陷，导致胚胎致死，通常不超过胚胎发育的第6.5天。

组份：
Phospho-CENP-A(Ser7)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

免疫原种属：人
免疫原：人工合成的含磷酸化Ser7的一段人CENP-A多肽
宿主：兔
用途：WB,IP,IF
交叉反应性：人，猴
CENP-A分子量：～17kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:25),IF(1:100)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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