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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)折扣价在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)折扣价
英文名:Large Plasmid Extraction Kit(for cell transfection)
品Pai:百奥莱博
规格:20次
产地:国产|进口
本试剂盒适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒制备。常规的离心柱型质粒抽提试剂盒并不适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒DNA的抽提。这主要是因为大型质粒DNA分子量很大,常常会超过100kb而且一般拷贝数低产量低,使用常规的离心柱吸附膜吸附效率和产量很低而且过膜会打断这些大分子量的质粒DNA。本试剂盒采用改进碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚*仿抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。此外溶液型的试剂可以按照比例放大缩小进行小提/中提/大提,ZH可选择任意小体积溶解质粒,浓度可高达3μg/μl。
试剂盒组份(20次):
RNaseA(10mg/ml)-————————1.3ml
溶液P1—————————————130ml
溶液P2—————————————100ml
溶液PⅢ-————————————110ml
杂质清除剂A-——————————3ml
杂质清除剂B-——————————30ml
内毒素清除剂——————————10ml
试剂盒特点:
1.不需要使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从150-200 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.4-1mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高,超螺旋比例高,纯度好,可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低(<0.1 EU/μg DNA),可直接应用于细胞转染。
注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大质粒时操作动作要轻柔,应该使用剪大了开口的吸头,防止机械剪切对DNA 的损坏。
3. DNA 沉淀液沉淀离心后,可能看不到明显沉淀。如未见沉淀,担心DNA 丢失,可保留上清液,待完成全部操作后电泳鉴定,以确定是否获得终产物(数百微克DNA 离心沉淀在管的侧壁上,可能无法看到明显团块)。
4. 得到的质粒DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1 相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2 条或者多条DNA 条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过95%。
5. 质粒DNA 确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA 分子量Marker 才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道确切大小。
储存条件:室温,有效期18个月。
本品别名:大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)|大型质粒提取试剂盒|大型质粒大量制备试剂盒|无内毒素大型质粒提取试剂盒|转染级质粒大量提取试剂盒|细胞转染用大型质粒制备试剂盒|BAC大型质粒提取试剂盒|PAC大型质粒提取试剂盒|P1大型质粒提取试剂盒|Cosmid大型质粒提取试剂盒
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·细胞组织总RNA提取试剂
编号:ALH001
英文名称:Total RNA extraction reagent From Tissue or Cell
规格:50ml|100ml
本试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入*仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。本试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。本试剂抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
本试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用*化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
储存条件:室温,有效期12个月。
注意事项:
1. 当本试剂用量少于2ml时建议使用清洁的一次性的聚丙材质试管。
2. 当本试剂用量较大时,可以使用玻璃试管(Corex)或聚丙材质试管,事先检验以确保该试管可以耐受加入本试剂和*仿后12,000×g的离心力。不可使用有裂缝或者破损的试管。
3. 离心前小心平衡试管。
4. 离心前玻璃管口必须盖上铝箔并用石蜡膜封口,聚丙*(代"烯")管必须盖紧。
5. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA 样品:往组织或细胞中加入800μl 本试剂。待样品裂解后,加入*仿并进行步骤2 中的抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA 之前,加入5~10μg 无RNA 酶的glycogen 作为水样层的载体。为降低其黏度在加入*仿前用26 号注射器抽吸两次以切断基因组DNA。Glycogen 会留在水样层中并和RNA 共析出。在浓缩到4mg/ml 之前它不会YZ逆转录反应DY链的合成也不会YZPCR。
6. 在匀化后和加入*仿之前,样品可以在–60~–70℃ 保存至少一个月。RNA 沉淀(步骤4,RNA 漂洗)溶于75%的乙醇在2~8℃ 至少可以保存一周,在–5~–20℃ 下至少可保存一年。
7. 台式离心机ZD能达到2,600×g 的离心力,如果将离心时间延长到30~60 分钟可以满足步骤2 和步骤3 中的操作。
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·琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
编号:ALH096
英文名称:Agarose gel DNA Recovery Kit
规格:50次|100次|200次
本试剂盒适用于琼脂糖凝胶DNA的纯化回收。在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,ZH低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(100次):
平衡液——————————10ml
溶胶液DD—————————50ml×2
漂洗液WB—————————25ml
洗脱缓冲液EB———————15ml
吸附柱和收集管(2ml)-———100套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化*和高*酸盐,不YZ回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.溶胶液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到ZJ结合效果,大大提高回收效率。
4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在ZJ结合范围内。
5.快速、方便,不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶胶液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 回收纯化的DNA片段一般在100bp到40kb之间,过长、过短片段的回收效率迅速降低。
4. 回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA片断大小有关。一般1-15μg,100bp-5kb的DNA片段,回收率可高达85%。
5. 切胶回收时,紫外灯观察对DNA片段有损坏作用,应该尽可能使用能量低的长波紫外线,并且尽可能的缩短紫外线下处理的时间。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,DNA片段应该保存在-20℃。DNA片段如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京现货大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)折扣价关键词:无内毒素大型质粒提取试剂盒,大型质粒大量制备试剂盒,大型质粒大量提取试剂盒(>10kb质粒)
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蔗糖咪唑溶液 0.4mol/L|1.1mol/L|1.65mol/L|2.25mol/L 100ml
BL0940 生物素化人IgG抗体
ARB12789 小鼠α葡萄糖苷酶(A-Glu)elisa检测 Mouse α-glucosidase,a-glu ELISA KIT
BL0829 HRP标记兔抗生物素抗体
SJ0756 乙酸*
二*砜 Alcian Blue 8GX 127-63-9
BTN130613 9°Nm DNA聚合酶 9°Nm DNA Polymerase
PY01-147 熊去氧胆酸 10克
9003-99-0 Peroxidase(POD) 辣根过氧化物酶
ARB11780 人新型隐球菌抗原(CN)Elisa方法检测
ARB10249 人乙酰胆碱(ACH)ELISA代测服务 Human acetylcholine,ach ELISA KIT
41468-25-1 Pyridoxal 5-磷酸吡哆醛
ε-聚赖*酸 D-Galactosamine HC1 28211-04-3
*化铈 CBZ-L-Arg 18618-55-8
DN0101 小量全血基因组DNA快速提取试剂盒(溶液型)
ARB13032 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA检测服务 Mouse keRatinocyte autocrine factor/amphiregulin,kaf/ar ELISA KIT
BTN100825 自诱导培养基(lac启动子) Auto-induction Medium
胆碱氧化酶 SSodium phosphate dibasic heptahydrate 9028-67-5
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/%E8%AF%95%E5%89%82%E7%9B%92%20(2).jpg)
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温馨提示:不可用于临床ZL。