Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)折扣价，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)折扣价
品Pai：百奥莱博
编号：BTN120654D
产地：国产|进口
英文名：Southern DNA Marker DL2000(Labeled by DIG)

我公司的Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)折扣价，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·利福平溶液
编号：BTN120700
英文名称：Rifampicin Solution
规格：10mL
本产品为浓度为100mg/mL的利福平溶液(溶剂为DMSO)。利福平(甲哌利福霉素；3-(4-甲基-1-哌*(代"嗪")基亚胺甲基)利福霉素SV；Rifampin；Rifamycin AMP)，分子式：C43H58N4O12，分子量：822.94，CAS号：13292-46-1。利福平是从利福霉素B得到的一种半合成抗生素，能YZ细菌DNA转录合成RNA，可YZ成熟病毒粒子DNA和蛋白质的合成，是细菌核糖核酸聚合酶的特殊YZ剂，可用于ZL结核病、肠球菌感染等。除作为抗生素应用外，在分子生物学中可用做从细菌中去除质粒的试剂利福平。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期6个月。

·Therminator DNA聚合酶
编号：BTN130614
英文名称：Therminator DNA Polymerase
规格：200U
Therminator DNA聚合酶是9°Nm DNA聚合酶中的一种，但有较强的掺入修饰底物的能力，如ddNTP、rNTP和acyNTP。

产品特点：
1．提高了修饰核苷酸的掺入能力；
2．部分核糖核酸置换法测定DNA序列；
3．ddNTP或acyNTP的链终止法测序；
4．ddNTP或acyNTP链终止法用于SNP分析。

产品组成：

 

成份	规格
Therminator DNA聚合酶(2000U/mL)	100μL
10×Buffer	3.0mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指75℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。


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·柱式病毒DNA提取试剂盒
编号：BTN70701
英文名称：Virus DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在一管式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA的产品。

试剂盒特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到的ZZ灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与PCR和荧光PCR 兼容。
6. 价廉物美，性价比远高于国外同类产品。
7.适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液3.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 对于液体病毒样品：在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体在4℃ 24,000 g 冷冻离心60分钟，移弃1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步处理。对于拭子样品：将一个拭子放入离心管中，加入1mL自备的生理盐水，振荡器上充分振荡半分钟，然后转移0.2mL 到1.5mL塑料离心管中，用于第2 步处理。
2. 加入0.6mL溶液A到DY步得到的0.2mL样品中，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将500μl溶液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
4. 12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3的离心吸附柱中，室温放置2分钟。
6. 12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000 rmp室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室温离心1分钟(干甩)，弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl DNA 洗脱液3.0，然后室温放置2分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟，离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。
11. DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。

疑难解答：
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子，每种RNA 有很多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的JD量往往比一个细胞中核酸的JD量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸JD量很少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR 检测，而PCR或RT-PCR的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。


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·酵母化学感受态细胞制备试剂盒(A型)
编号：BTN81109A
英文名称：Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
规格：20次
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，GX快速制备酿酒酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。

产品特点：
1.一次制备，-80℃保存，多次使用，免去每次转化都要制备酿酒酵母感受态细胞。
2. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要30分钟
3. 主要用于酿酒酵母S. cerevisiae，也适用于其他多种实验用酵母菌株，包括S. pombe、C. albicans、Pichia pastoris等。
4. 受体酵母可以不含质粒，也可用于携带有选择性质粒的酵母。
5. 对酿酒酵母，ZG转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。对其他酵母，效率稍低，范围在100-2000个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变(Site－Directed Mutagenesis)、基因破坏(Gene Disruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。
8. 本产品可以制备20 只酵母感受态细胞(需要200mL 酵母培养液)，其中A型只用于制备感受态细胞，B型还带GX转化液。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

产品组成：

成分	20T(A)	20T(B)
制备液A	120ml	120ml
制备液B	6ml	6ml
制备液C	10ml	10ml
转化液A	无	30ml
转化液B	无	30ml
说明书	1份	1份

自备试剂：YPD培养基

使用方法：

一：酵母化学感受态细胞的制备
说明：按本方法制备1 管酵母化学感受态细胞就需要OD600达到0.6-1.0的新鲜酵母培养液10mL，用户需根据所需酵母感受态细胞的数量决定培养细胞的体积。如果超过10mL，则制备液的使用量需要按比例增加。
1. 挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以)，接种到装在50mL离心管中的10mL的自备的YPD培养基中。
2. 30℃摇晃培养，摇床速度250rpm/分钟，直到OD600达到0.6-1.0(相当于0.6-1×10⁷细胞/mL)。
3.室温3000rpm离心5 min，弃上清得酵母细胞沉淀。
4. 新鲜制备适量的酵母感受态制备工作液。对10mL 酵母需要5.25mL的工作液，其配制方法是：将4.75mL 制备液A、0.25mL 制备液B和0.25mL 制备液C 加入到一个无菌的离心管中后充分震荡混匀即可。酵母感受态制备工作液可放室温待用。
5. 用0.5倍体积的新鲜配制的酵母感受态制备工作液洗涤酵母细胞沉淀一次(对10mL 酵母则需要5mL 酵母感受态制备工作液)。即混合后振荡1分钟，室温3000rpm离心3分钟，去上清得洗涤后的酵母细胞沉淀。
6. 再用0.02倍体积的酵母感受态制备工作液充分重悬菌体(对10mL酵母，则需要0.2mL 酵母感受态制备工作液)。
7. 按每管0.2mL 分装到冷冻管中，放入保温冰盒中冷却半小时后再放入-80℃冰箱待用。0.2mL的感受态细胞足够1次转化使用。注意：放入保温冰盒的目的是使温度缓慢下降，急冻将使转化效率降低，这点跟大肠杆菌感受态制备过程不同。

二：化学转化酵母感受态细胞(只有B型提供相关试剂)
1. 将总体积不超过20μl的0.1-5μg质粒DNA 加到刚从-80℃冰箱取出的、还处于凝固状态的0.2mL 酵母感受态细胞上。注意：同时做一个不加质粒DNA的阴性对照组。
2.室温充分振荡直到凝固的感受态细胞完全融化。注意：此步非常关键，如果能在恒温振荡器上37℃振荡5分钟，则效果更好。
3. 加入1.4mL转化液A，轻柔颠倒混匀一分钟。
4. 30℃培养1小时。
5.室温3000g离心5秒，弃上清。
6.在酵母细胞沉淀中加1.0mL转化液B，振荡一分钟。
7.室温3000g离心5秒，弃上清。
8.在酵母沉淀细胞中加入适量(如100μl)的转化液B，混匀后在在选择培养基上全部涂盘。
9. 30℃培养3-5 天后即得酵母转化菌落。

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