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百奥莱博专业生产供应改良型天狼猩红染色试剂盒 细胞组织染色,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:改良型天狼猩红染色试剂盒 细胞组织染色
英文名:Enhanced Sirius Red Straining Kit
规格:100mL
品Pai:百奥莱博
天狼猩红是一种很强的酸性染料,易与胶原纤维中的碱性基团反应,使胶原纤维产生明显的双折光现象,在偏振光显微镜下显示特异性地呈现红色。本产品就是在此原理的基础上改良后开发的产品。
产品特点:
➤ 即开即用,用户不需要单独配制各种溶液。
➤染色过程只需几分钟,比传统的苦味*(代"酸")-天狼猩红染色方法更加快捷。
➤ 增强型,染色结果更加清晰,能根据颜色不同区分Ⅰ型和Ⅲ型胶原。而MASSON染色法却不能显示胶原类型。
➤可用于在普通显微镜下可以观察胶原纤维的分布,也可用于在偏振光显微镜下区分I型和III型胶原。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 100ml |
溶液B | 100ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
使用方法:一:按常规方法脱蜡至水(本试剂盒不提供所需试剂)。
1.取1×1×0.2cm经过10%固定或4%多聚甲醛固定的组织材料。
2.用Leica ASP200S或类似的脱水机按病理常规的流程对组织块进行脱水、透明、浸蜡处理。
3.用Leica EG1150H+C或类似的包埋机将上步处理过的组织块包埋成蜡块。
4.用Leica RM2245或类似的轮转式切片机将包埋组织切成4-6μm 厚的石蜡切片。
5.二甲*脱蜡至水洗。
二:天狼星红染色
6.将切片放入溶液A中一分钟。
7.将切片转移到溶液B中后放置一分钟。
三:染色后处理(本试剂盒不提供所需试剂)
8.用蒸馏水洗涤切片两次。
9.用自备的95%乙醇和无水乙醇脱水各1分钟。
10.二甲*透明处理。
11.中性树胶封片。
12.在普通显微镜下观察,胶原纤维呈现红色,细胞呈现黄色。在偏振光显微镜下,I型纤维呈现强的双折光,颜色为明亮的橙红色或明黄色;III纤维呈现弱的双折光,颜色为绿色。
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改良型天狼猩红染色试剂盒 细胞组织染色关键词:Enhanced Sirius Red Straining Kit,改良型天狼猩红染色试剂盒,BTN121104
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·96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法)
编号:BTN80922
英文名称:Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Centrifugal method)
规格:1次|5次
·葡激酶
编号:BTN130875
英文名称:Staphylokinase
规格:100μL
葡激酶,又称金葡菌激酶或SAK,是从金黄色葡萄球菌中分离出来的一种能够特异性溶解血栓的酶类物质。葡激酶与血栓中的纤维蛋白有较高的亲和力,它能在血栓的部位与纤溶酶原结合,此结合物能够激活纤溶酶原转变为纤溶酶,从而溶解血栓。免疫原性较streptokinase强。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·柱式真菌DNA提取试剂盒
编号:BTN70901
英文名称:Fungus DNA Column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是真菌DNA提取试剂盒的柱式升级产品,能够破裂各种真菌坚硬的外壳,同时使用硅胶膜DNA 纯化技术,得到的DNA适用于各种后续实验。
试剂盒特点:1. DNA 纯净,OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右,可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 操作简单,整个过程约15分钟,比大多数同类产品短。
3. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
4.液体培养物处理量在0.1-3mL之间,真菌菌丝、孢子、子实体的处理量在0.1-0.5g之间。
5. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 50ml |
溶液C | 50ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
DNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:1. 称取0.1-0.5g 湿的真菌菌丝、孢子、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀,转移到塑料研钵中,液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
注意:避免使用含二氧化硅的玻璃研钵,因为DNA 会吸附在表面,影响得率。如果菌丝或子实体等已经十分干燥,则使用量比上面推荐的使用量低5-10倍;如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA,则需要先去除红细胞等成份,具体方法请参考相关文献和相关产品的使用说明书,如红细胞裂解液)。
2.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
3. 65℃保温5-30分钟,其间吹打混匀2-3次。
4. 12000~15000g室温离心3分钟。
5. 将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色混浊状。
7. 将其置于冰浴中放置5-10分钟。
8. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
9. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。
10. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物,小心转移上清到新1.5-5mL塑料离心管中。注意:由于下一步要加1.5倍体积的溶液C,所以新的离心管的体积要足够大。
11. 加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀,然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。
12. 每次转移0.7-0.8mL 混合液后,室温放置5-10分钟。
13. 12000~15000g室温1分钟,弃穿透液。
14. 对需要多次上柱的样品,可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中,重复第12-14 步的操作。
15. 将0.7mL 通用洗柱液加入离心柱,室温离心1分钟,弃穿透液。
16.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤)。
17. 空甩1分钟去除残留液体。
18. 将离心柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加入30-100μL通用洗脱液。
19.室温放置5分钟后离心1分钟,管底即为真菌DNA溶液,可立即使用,也可长期保存在-20℃。
20.可以重复上步一次,以洗脱更多的DNA。
改良型天狼猩红染色试剂盒 细胞组织染色关键词:Enhanced Sirius Red Straining Kit,改良型天狼猩红染色试剂盒,BTN121104
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·β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒
编号:BTN130599
英文名称:β-galactosidase Assay Kit
规格:24样
本产品是分光光度法测定β-GAL活力的,测定原理为β-GAL分解对-硝基*(代"*")-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基*(代"*")酚,后者在400nm有ZD吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。
β-半乳糖苷酶广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β半乳糖苷化合物中的β半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
酶提取液 | 50ml |
溶液A | 粉剂1瓶 |
溶液B | 15ml |
溶液C | 50ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃保存,其中试剂A需-20℃保存,有效期半年。
使用方法:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
一、酶液提取
1.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):酶提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL酶提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200 W,超声3秒,间隔10秒,重复30次);15000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
2.组织:按照组织质量(g):酶提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1 g组织,加入1mL酶提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
二、 测定操作步骤
1.分光光度计预热30分钟以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2.取出试剂A,临用前向试剂瓶中加入5mL蒸馏水,充分溶解备用,制备成溶液A工作液(用不完的溶液A仍需-20℃保存)。
3.样本测定(在EP管中依次加入下列试剂):
试剂名称 | 对照管(μl) | 测定管(μl) |
样本 | 50 | 50 |
蒸馏水 | 200 | 0 |
溶液A工作液 | 0 | 200 |
溶液B | 250 | 250 |
迅速混匀,放入37℃准确水浴30分钟 |
溶液C | 1000 | 1000 |
充分混匀,400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。 |
三、酶活性计算公式
标准条件下测定的回归方程为y=0.00543x -0.0027;x为标准品浓度(nmol/mL),y为吸光值。
注:V反总:反应总体积,0.5mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入酶提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万;T:反应时间,30分钟。
1.按照样本蛋白浓度计算:
酶
活性定义:每mg 组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷Cpr
如果需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
2.按照样本鲜重计算:
酶
活性定义:每g组织每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/g鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷W
3.按细菌或细胞密度计算:
酶
活性定义:每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol 对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/104cell)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样总)÷T=0.123×(ΔA +0.0027)
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温馨提示:不可用于临床ZL。