北京5%BSA封闭液现货供应

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名称：北京5%BSA封闭液现货供应
产地：国产|进口
规格：12ml
编号：ZN1956
产品用途：组化实验中的封闭
使用方法：本品为即用型工作液，可直接使用，滴加覆盖标本即可

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玻片硅化试剂盒(APES法)   3×100ml|3×500ml
ARB10921 人抗髓磷脂抗体IgA(AMA IgA)酶免分析 Human anti-myelin antibody iga,ama iga ELISA KIT
PY08-071  李氏增菌肉汤1(LB1) 225ml  20瓶/箱，用于李斯特氏菌的选择性增菌培养
磷钨酸负染色液  2%|3%|5% 100ml
ARB12779 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶标法分析 Mouse α1-acid glycoprotein,α1-agp ELISA KIT
ARB10490 人白介素3(IL-3)含量测试 Human interleukin 3,IL-3 ELISA KIT
EA36染色液   100ml|500ml
F020101 兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA
ARB12869 小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)elisa检测 Mouse soluble cluster of differentiation 86,scd86 ELISA KIT
ARB10920 人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)含量检测 Human anti-myelin associated glycoprotein antibody,mag ab ELISA KIT
牛磺胆酸* Benzimidazole 145-42-6或345909-26-4
1320-06-5 Oil Red O  油红O
北京5%BSA封闭液现货供应关键词：5%BSA封闭液,ZN1956,百奥莱博


·PAX4 mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN1096
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：rat
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.PAX4 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到ZJ的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
PAX4的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


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BTN131075 糖蛋白染色试剂盒 Staining Kit for Glycoprotein
Taq Plantinum PCR MasterMix 
9003-39-8 聚乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮40000 PVP40000
二甲*(代"酚")橙四* D-Tartaric acid 3618-43-7
ARB11535 人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa检测操作说明书 Human high mobility group protein b1,hmgb-1 ELISA KIT
CD111 超纯dTTP(100mM)
ELISA稀释液   100ml
1-(3-二甲基胺丙基)-3-乙基碳二亚胺 CDI 1892-57-5
BL0821 HRP标记兔抗鸡IgG抗体
ARB10966 人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)elisa测定使用说明书 Human receptor Ⅱ for the fc region of immunoglobulin e,fcεrⅡ ELISA KIT
PY01-114  次黄嘌呤  1克  
ARB10588 人血小板生成素(TPO)酶联免疫定量检测 Human thrombopoietin,tpo ELISA KIT
次甲基绿 CNP-Afu 224967-52-6
ARB13231 小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)Elisa分析 Mouse mucin-5 subtype b,muc5b ELISA KIT
二乙*(代"胺")盐*(代"酸")盐 NAA-K 660-68-4
ARB10887 人抗流行性脑膜炎病毒(PV-Ab)ELISA检测服务 Human anti-encephalitis virus  pv,ep-ab ELISA KIT
15086-94-9 伊红Y(醇溶) Eosin Y
ARB12653 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白(EotAxIn 1/CCL11)酶免分析 Rat eotaxin 1 ELISA KIT
ARB10911 人抗凝血素抗体IgG(APT2)Elisa方法检测 Human anti-prothrombins antibodiesigg,apt1ELISA KIT
ARB11836 人凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA代测服务 Human coagulation factor Ⅱ,fⅡ ELISA KIT

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