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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括细胞microRNA纯化试剂盒 分子生物学试剂在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:细胞microRNA纯化试剂盒 分子生物学试剂
编号:ALH072
品Pai:百奥莱博
英文名:Tissue Cell microRNA Extraction Kit
规格:50次
产地:国产|进口
本试剂盒采用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, ZH低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15~30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。
产品组分:
Lysis/Binding buffer————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套
产品特点:
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。 克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3. 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4. 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1. DY次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,*仿,一次性注射器,研钵。
4. Lysis/Binding buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5kb和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中ZDrRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
储存条件:室温,有效期6个月。(Lysis/Binding buffer需4℃避光保存)
本品别名:组织细胞miRNA提取试剂盒|细胞miRNA纯化试剂盒|细胞miRNA分离试剂盒|细胞microRNA提取试剂盒|细胞microRNA分离试剂盒|细胞microRNA纯化试剂盒|组织miRNA纯化试剂盒|组织miRNA分离试剂盒|组织microRNA提取试剂盒|组织microRNA分离试剂盒|组织microRNA纯化试剂盒
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·Gateway entry clone构建试剂盒
编号:ALH328
英文名称:Gateway entry Clone Construction Kit
规格:20次
本试剂盒采用了世界ZX进的定向拓扑异构酶克隆技术可以在5分钟内将待表达目的基因(高保真酶扩增的平末端片段)一步法定向克隆到Gateway入门载体,得到的入门克隆可以和各种Gateway目的载体通过LR重组反应,生成表达克隆。方便目的基因在原核/哺乳动物细胞/酵母/昆虫表达系统切换表达。
试剂盒组份:
Gateway入门载体(30ng/μl)—————20μl
10×Enhancer-———————————20μl
产品特点:
1. 简单快速,加入待表达基因片段室温仅需5分钟便可完成入门克隆构建。
2. 定向克隆技术,超过90%插入为正确方向插入,减少克隆筛选耗费的时间。
3. 构建的入门克隆不含原核表达Shine-Dalgarno(SD)序列,因此构建原核表达克隆时应选择带SD序列的目的载体进行Gateway LR重组。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
·植物基因组DNA快速提取试剂盒(CTAB法)
编号:ALH144
英文名称:Plant genomic DNA Extraction Kit(CTAB)
规格:50次|100次|200次
本试剂盒采用改进的经典CTAB植物DNA抽提液(添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份)迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,*仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质(根据需要,上清中还加入异丙醇离心沉淀基因组DNA,进一步去除其它各种杂质),然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖、多酚和细胞代谢物、蛋白等杂质去除,ZH低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(100次):
裂解液PL————————80 ml
结合液PQ————————30ml
YZ物去除液IR—————50ml
漂洗液WB————————25ml
洗脱缓冲液EB——————15ml
吸附柱AC————————100个
收集管(2ml)—————100个
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。
4.数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30 kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
3. 需要自备*仿/异戊醇(体积比24:1混合)、无水乙醇和β-巯基乙醇。
4. 结合液PQ 和YZ物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 不同来源的植物组织材料中提取DNA 的量会有差异,一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
7. 本试剂盒是按照标准提取过程配置各溶液体积,如果样品DNA含量低或者产量低,需要扩大提取量,还需要另外购买溶液。
储存条件:室温,有效期12个月。
细胞microRNA纯化试剂盒 分子生物学试剂关键词:细胞miRNA纯化试剂盒,组织细胞miRNA提取试剂盒,细胞microRNA提取试剂盒,细胞miRNA分离试剂盒
·大量植物样本DNA提取试剂盒
编号:ALH151
英文名称:Plant Massive DNA Rapid Extraction Kit
规格:10次
本试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统,适合于从含酚类、多糖类和酶YZ物的植物样品中快速大量地提取基因组DNA。可在1小时左右完成一个或多个1g
新鲜或200mg干燥的植物样品DNA的纯化工作。提取过程不需要用到有毒的酚*仿等有机物抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀,并能快速GX地去除多
糖类、酚类和酶YZ物等杂质,纯化的DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。
新鲜或干燥的植物组织(细胞)磨碎后经裂解液裂解;蛋白质、多糖、细胞残片被沉淀去除;然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,
再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖,多酚和细胞代谢物,蛋白等杂质去除, ZH低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份:
RNaseA———————500μl
缓冲液AP1——————50 ml
缓冲液AP2——————20 ml
缓冲液AP3/E—————40ml
漂洗液WB——————25ml×2
洗脱缓冲液EB————20ml
吸附柱AC——————10个
收集管(50ml)—————10个
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。
4.数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
2. 缓冲液AP3/E 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 不同来源的植物组织材料中提取DNA 的量会有差异,一般1g新鲜组织典型产量可达30-260μg。
4. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存
在-20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
细胞microRNA纯化试剂盒 分子生物学试剂关键词:细胞miRNA纯化试剂盒,组织细胞miRNA提取试剂盒,细胞microRNA提取试剂盒,细胞miRNA分离试剂盒
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温馨提示:不可用于临床ZL。