特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京5kb plus DNA ladder(100~5000bp)价格厂家的品Pai:百奥莱博,是优质的核酸电泳和回收产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多5kb plus DNA ladder(100~5000bp)等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京5kb plus DNA ladder(100~5000bp)价格厂家
规格:100T(2×250μl)
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
本产品是由9条带状双链DNA条带组成的DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。8条带大小包括100,250,500,750,1000,1500,2000,3000,5000bp。其中750bp条带为100ng/5μl,显示加亮带,其余条带浓度为50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注:根据梳子的厚度和宽度进行上样。
每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl;
窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;
宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl;
如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0-2.0%,凝胶长度5-7cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间25-30分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
北京5kb plus DNA ladder(100~5000bp)价格厂家正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·彩色预染宽分子量蛋白Marker(10~260kD)
编号:RFT150
英文名称:Rainbow pre dyeing broad molecular weight protein Marker
规格:20T(100μl)
本蛋白包含10种纯化的预染蛋白质组成,分子量范围为10kD-260kD,含有四种不同颜色,可以用于SDS-PAGE和Western Blot转膜时确定未知蛋白的分子量。
使用方法:
1、DY次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用。
2、-20℃取一管样品,彻底融化,上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
3、电泳结束后,可以直接在胶上观察结果。
4、预染蛋白Marker在不同的凝胶系统中迁移率会有不同,因此只能用来粗略估计目的蛋白的大小。如要精确确定蛋白的大小,请在同一凝胶系统中用非预染蛋白Marker来标定预染蛋白Marker的分子量。
储存条件:-20℃。
·Western半干转转膜液
编号:RFT079
英文名称:Western semi dry membrane fluid
规格:10×1L
本Western半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液,没有使用剧毒的甲醇,也没有使用其它的有毒试剂。配制Western 半干法转膜液的方法非常便捷,不需要调节pH值。本Western转膜液共1瓶,可以配制1升1×Western半干转膜液,用于Western时半干法电转膜。
使用方法:
1、取一瓶可以配制1升Western转膜液的粉剂,倒入到一洁净的烧杯中,加入蒸馏水到约700毫升,溶解。
2、再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇,混匀。
3、然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用,无需调节pH值。没有用完的转膜液可室温或4℃保存,通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时,应该丢弃。
注意事项:
1、配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存。配制好的半干法转膜液长期存放后,如果颜色变成浅棕色或黄褐色,应丢弃。
2、需使用分析纯级别的乙醇或纯度更高的乙醇。
储存条件:室温,有效期2年。
北京5kb plus DNA ladder(100~5000bp)价格厂家关键词:百奥莱博,5kb plus DNA ladder(100~5000bp),RFT016
L-*基酸氧化酶 SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins 9000-89-9
ARB12053 大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10)含量检测 Rat interferon-inducible protein 10,ip-10 ELISA KIT
BTN130629 RecJf核酸外切酶 RecJf Exonulease
Lillie二价铁染色液 2×50ml
HC0154 进口离心管板
BL0900 FITC标记羊抗大鼠IgG抗体
9035-81-8 Trypsin inhibitor 胰蛋白酶YZ剂
DNA Ladder(100bp~1500bp)
3-*基丁酸 D-Glucosamine HC1 2835-82-7或541-48-0
次碳酸铋 1,2-IND 5892-10-4
ARB11017 人层连蛋白/板层素(LN)酶联免疫定量检测 Human laminin,ln ELISA KIT
精*酸酶(牛肝) Sebacic acid 9000-96-8
硫*(代"酸")铬* PNPG 7788-99-0
ARB13991 猪蓝耳病毒定量分析 anti-prrsv ELISA KIT
邻硝基*(代"*")-α-D-吡喃葡萄糖苷 TTHA
P:C(25:24,pH﹥7.8) 100ml
四盐*(代"酸")精胺 DL3000 DNA Marker 306-67-2
岩藻多糖 TAPSO sodiu*(代"m") salt 9072-19-9
台氏液粉剂 Tyrode"s Solution 1L
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·土壤基因组DNA提取试剂盒
编号:RFT036
英文名称:Soil genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本公司的土壤DNA提取试剂盒采用独特的腐殖酸去除液(缓冲液R2)能够有效去除腐殖酸;吸附柱CG能能有效去除金属等YZ因子,提纯得到的基因组DNA可直接用于PCR 反应,酶切或定量实验。
试剂盒组份:
试剂盒组成 | 50次 | 贮存方式 |
缓冲液R1 | 40 ml | 常温 |
缓冲液R2 | 6 ml | 常温 |
缓冲液R3 | 6 ml | 常温 |
缓冲液R4 | 10 ml | 常温 |
缓冲液 R5 | 20 ml | 常温 |
漂洗缓冲液WB1 | 30 ml | 常温 |
漂洗缓冲液WB2 (浓缩液) | 13 ml | 室温 |
洗脱缓冲液EB | 15 ml | 室温 |
Glass beads | 20 g | 常温 |
吸附柱CG | 50个 | 室温 |
收集管(2 ml) | 50个 | 室温 |
说明书 | 1份 | |
准备工作:
1. 准备55℃,70℃水浴;无水乙醇;异丙醇;制冰机;1.5ml离心管;2ml离心管
2. 按照标签所示在漂洗缓冲液WB2中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3. 每次使用前请检查缓冲液R2,缓冲液R3是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
标准操作步骤:
如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、称0.3-0.5 g土壤置于2ml离心管中,加入0.4 g Glass Beads,再加入780μl 缓冲液R1与100μl 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5min。
注:对含水量丰富的样品,可以预先离心除去部分水分后再称取样品。缓冲液R2是腐殖酸去除剂,100μl对大部分样品来说足以有效除去腐殖酸等YZ因子。对一些腐殖酸含量特别丰富的土壤, 缓冲液R2的量可以适当增加,但不能超过250μl,否则会严重影响DNA的得率。
2、加入200μl 缓冲液R3(R3如有沉淀37℃水浴完全溶解后再用),涡旋混匀。 70℃水浴处理10min。期间振荡几次。
注:如果要纯化革兰氏阳性菌的DNA,请在70℃处理完后,再90℃水浴处理2min。
3、12000 rpm(~13000g)离心1分钟,取600μl上清到1.5ml离心管中,加入180μl 缓冲液R4混匀。
注:转移上清时确保不要吸取到沉淀,转移的上清量不超过80%。
4、冰上放置5分钟。12000 rpm(~13000g)离心1分钟。 转移上清到新的1.5ml离心管中。
注:转移上清时确保不要吸取到沉淀,转移的上清量不超过80%。
5、加入0.7倍上清体积的异丙醇颠倒混匀。12000 rpm(~13000g)离心2分钟。小心地倒掉上清。
注:如果样品中DNA含量很低,加入异丙醇混匀后-20℃放置1小时。
6、加入350μl 缓冲液R5,待沉淀完全溶解后加入300μl无水乙醇,混匀。
注:为加速溶解沉淀,可置样品于55℃水浴中。
7、将上步混合液转移到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),12000rpm离心30秒,倒掉滤过液。
8、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗缓冲液WB1,12,000 rpm (~13,000×g ) 离心30 秒,倒掉废液。
9、向吸附柱CG中加入600μl 漂洗缓冲液WB2(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13000g) 离心30 秒,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
10、向吸附柱CG中加入600μl漂洗缓冲液WB2,12,000 rpm (~13000g) 离心30秒,倒掉废液,将吸附柱CG放入收集管中。
11、12,000 rpm(~13000g)离心2分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注:此步骤非常重要,其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
12、将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50–100μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,12,000 rpm(~13000g)离心2分钟。
注意:a.洗脱缓冲液体积不少于50μl,体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13、DNA产物-20℃保存。
大量操作步骤(针对含微量核酸的样品)
1、称1-5g土壤置于10ml离心管中,加入1g Glass Beads,再加入3ml 缓冲液R1与200μl 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5分钟。
2、加入600μl 缓冲液R3,涡旋混匀。70℃水浴处理10分钟。期间振荡几次。
3、3000g离心3分钟,转移上清到新的离心管中,加入550μl 缓冲液R4混匀。
4、冰上放置5分钟。8000g离心10分钟。转移上清到新的离心管中。
5、以下按标准操作步骤的第五步继续操作。
DNA浓度及纯度检测:
基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。
常见问题分析:
常见问题 | 可能原因 | 建议 |
没有洗脱出DNA | 加入缓冲液R5后没有加入无水乙醇 | 样品过柱前,必须用无水乙醇调整核酸结合条件,否则核酸不能挂柱。 |
漂洗缓冲液WB2中没有加入乙醇 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。 |
低浓度的DNA量 | 缓冲液R2使用过量 | 按照步骤1加入适量缓冲液R2 |
洗脱体积太小 | 洗脱体积不能低于50μl,如洗脱体积太小,回收率将大大降低。 |
洗涤不恰当 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。 |
低A260/A280比率 | 蛋白污染 | 不要忽略步骤8中用漂洗缓冲液WB1冲洗吸附柱 |
洗脱液pH值不合适 | 确保使用的洗脱液pH在8.0以上,如低于8.0将导致DNA洗脱量过低。 |
下游应用不好 | 提取的DNA含盐量高 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。 |
提取的DNA含有乙醇 | 步骤11空甩柱子2分钟非常关键,彻底去除漂洗液中的乙醇。 |
YZPCR反应 | 增加缓冲液R2用量,彻底去除腐殖酸等PCRYZ因子;步骤4中确保不要吸取到沉淀。 |
储存条件:室温,有效期12个月。
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温馨提示:不可用于临床ZL。