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实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)北京厂家现货的品Pai:百奥莱博,是优质的核酸扩增(PCR)产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)北京厂家现货
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
规格:5ml
编号:WE0146
英文名:BaldStar TaqMan Mixture(High ROX)
本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP基因型分析等,适用于不同类型探针法荧光定量。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新GX热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。适用于无需ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0144):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0145):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0146):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
组份 | WE0144-5ml | WE0145-5ml | WE0146-5ml |
2×BaldStar TaqMan Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
50×Low ROX | - | 200μl | - |
50×High ROX | - | - | 200μl |
ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1.使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2.避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
2×BaldStar Taq Man Mixture | 25μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
Template DNA | 2μl | |
50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
ddH2O | up to 50μl | |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定ZJ的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序:
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
两步法PCR:
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 10 min | |
变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)北京厂家现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·HRP标记抗c-Myc标签单克隆抗体
编号:WE0333
英文名称:HRP Conjugated Anti c-Myc Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:20μl|100μl
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗c-Myc标签鼠单克隆抗体,可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的c-Myc标签(EQKLISEEDL), 而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测c-Myc Tag融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:鼠IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
·多彩预染蛋白Marker
编号:WE0282
英文名称:Multicolor Protein Marker
规格:20次(100μl)|100次(5×100μl)
本品由10.5-175 kD范围的11条蛋白组成(10.5 kD、14 kD、22 kD、29 kD、42 kD、51 kD、62 kD、70 kD、95 kD、130 kD、175 kD)。由低到高的分子量范围可监测电泳过程中的蛋白分离情况、判断目标蛋白的分子量,并且可以监测Western Blot实验中的转膜效率。10.5 kD、42 kD、95 kD的三条带结合有蓝色染料更便于实时观察电泳进程、判断蛋白分子量。本产品推荐上样量为5μl。
注意事项:
1、本品已包含上样缓冲液,直接使用,不可在100℃加热或煮沸。
2、为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。
操作步骤:
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、根据加样孔的大小,每泳道加5μl进行聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳。
实验图例15%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后结果
储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。
实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)北京厂家现货关键词:高含量ROX校正染料,WE0146,实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料),BaldStar TaqMan Mixture(High ROX)
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·RNase A溶液(100mg/ml)
编号:WE0225
英文名称:RNase A(100mg/ml)
规格:1ml
·GX多重PCR Mix
编号:WE0124
英文名称:Super Multiplex PCR Mix
规格:1ml|5ml
本品是由SuperStar DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,专用于多重PCR扩增。本品所含的 SuperStar DNA Polymerase是全新GX热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,可有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,扩增范围更广泛。本产品适用于各种类型的多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
产品组成:
组份 | 1ml | 5ml |
2×Super Multiplex PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
试剂 | 50μl反应体系 |
2×Super Multiplex PCR Mix | 25μl |
Primer Pool | 0.1-0.3μM |
DNA or cfDNA | 5ng-100ng |
ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。
2、PCR反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 2 min | |
变性 | 98℃ | 20 s | 30-40个循环 |
退火延伸 | 65℃ | 90 s |
终延伸 | 72℃ | 5 min | |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)北京厂家现货关键词:高含量ROX校正染料,WE0146,实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料),BaldStar TaqMan Mixture(High ROX)
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杆菌肽 BAA 1405-87-4
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人血清白蛋白(组份五) NTA 70024-90-7
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HC0090 离心管(尖底罗口)
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温馨提示:不可用于临床ZL。