北京现货快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

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名称：北京现货快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料)厂家
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
编号：WE0142
  本品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品所含荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA相结合，使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活仅需在95℃孵育20s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟，大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效YZ了非特异产物的产生，并显著提高PCR的扩增效率。该产品应用范围广，适用于普通和快速定量PCR程序，可适用于无需ROX校正的所有荧光定量PCR仪。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0141)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0142)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0143)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

 

组份	WE0141-5ml	WE0142-5ml	WE0143-5ml
2×BaFaSYBR Mixture	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有荧光染料SYBR Green I，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaFaSYBR Mixture	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定ZJ的模板使用量。
3)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX.

2、PCR反应条件：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	20 s
变性	95℃	3 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	30 s
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、20s条件下实现酶的活化。在此条件下，大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板，可将预变性时间延长至1分钟，以使起始模板充分解链。若高温处理时间过长，会对酶的活性造成影响。可根据模板情况确定ZJ的预变性时间。
2)建议采用两步法PCR反应程序，退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定，本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

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GXRNA保存液 100ml
SDS-PAGE蛋白质高分子量 UDPG
(不需DNA酶消化)"
三十烷醇 L-Aspartic acid 593-50-0
ARB12890 小鼠甲状腺素抗体(TAb)尿液中含量检测 Mouse thyroxine antibody,tab ELISA KIT
SSC缓冲液(20×,pH7.0,RNase free)   500ml
A2801-12 新生牛血清Newborn Calf Serum
BL1169 酵母基因组DNA提取试剂盒
磷酰二肽 6-Methylcoumarin 119942-99-3
BTN130988 EcoR I-Not I-BamH I接头 EcoR I-Not I-BamH I Adaptors
67-42-5 乙二醇-双-(2-*基乙基)四乙酸 EGTA
动物组织总RNA提取试剂盒 
2646-71-1 NADPH-Na4 还原型辅酶Ⅱ四*
J0101 抗猪瘟病毒(CSFV)血清
2,9-二甲基-4,7-二*基-1,10-菲啰啉 Fluorene 4733-39-5
ARB13487 鸡神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)酶联免疫定量检测 Chicken glial fibrillary acidic protein,gfap ELISA KIT
碳酸*溶液(1mol/L)   100ml|500ml
BL1174 粪便基因组DNA提取试剂盒
ARB12675 大鼠雌激素受体(ER)酶免分析 Rat estrogen receptor,er ELISA KIT
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·二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24)
编号：WE0240
英文名称：NGS Multiplex Oligos For Illumina(Index Primers Set II)
规格：24次|96次
  本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer，专为illumina平台建库设计，index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要，制备的文库可用于Illumina GAIIx，HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。

试剂盒组成：

组份	24次	96次
Adaptor for Illumina	60μl	240μl
Universal Primer for Illumina	30μl	120μl
Index 13 -27 Primers for Illumina	12×10 μ l	12×20 μ l

自备仪器、试剂和耗材
1、磁力架：建议使用DynaMagTM-2(货号： 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒：建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号： WE0205)。
3、DNA建库试剂盒：建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号： WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管：建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管；枪头：建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、Adaptor为双链结构，请勿将其置于室温温度以上，以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心，使液体收集到管底，以免不同引物间交叉污染。

使用流程


操作步骤：

百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。

Adaptor for Illumina：
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina：
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 13–27 Primers for Illumina：

	Index Primers for Illumina	Index
Index 13 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGTTGACTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	AGTCAA
Index 14 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACGGAACTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	AGTTCC
Index 15 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCTGACATGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ATGTCA
Index 16 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGGGACGGGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CCGTCC
Index 18 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTGCGGACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GTCCGC
Index 19 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTTTCACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GTGAAA
Index 20 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGGCCACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GTGGCC
Index 21 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCCGAAACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GTTTCG
Index 22 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACGTACGGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CGTACG
Index 23 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATCCACTCGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GAGTGG
Index 25 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATATCAGTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ACTGAT
Index 27 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAAGGAATGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ATTCCT

储存条件：-20℃


北京现货快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料)厂家关键词：低含量ROX校正染料,BaFaSYBR Mixture(Low ROX),快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料),WE0142

8008-63-7 牛胆粉
细胞核蛋白提取试剂盒   50T|100T
N-三(羟甲基)甲基-3-*基丙磺酸*盐 TCH  91000-53-2
ARB12594 大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/GelAtinAse B)酶免分析 Rat matrix metalloproteinase 9/gelatinase b,mmp-9 ELISA KIT
丁基琼脂糖凝胶4FF Boc-L-α-phenylglycine 157885-28-4
6-苄*基嘌呤 ACE 1214-39-7
Ringer"s液(两栖动物专用)   500ml
ARB10794 人抗风疹病毒IgM抗体(Anti-RV IgM)ELISA代测服务 Human anti-rubella virus igM antibody,anti-rv igM ELISA KIT
SJ0197 DEAE Sepharose CL-6B
*化底醚翁 Glycerol phosphate calcium salt 518-67-2?
植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)   50T|100T
F050311 小鼠IgM抗体 Mouse IgM
4-甲氧基酚 Blue Sepharose 6FF 150-76-5
ARB14065 鲤鱼卵黄蛋白原(VTG)血清中含量检测 Fish vtg ELISA KIT
ARB11769 人腺病毒IgG(ADV-IgG)免费代测 Human adenovirus igg,adv-igG ELISA KIT
DP348 血液基因组DNA提取试剂盒
FastQuant RT Kit (With gDNase) 
ARB10424 人布氏杆菌病(brucellosIs)酶联免疫定量检测 Human brucellosis (brucellosis) ELISA KIT
BL0955 胶体金标记兔抗山羊IgG抗体
ARB11317 人促睡眠肽(DSIP)Elisa分析 Human delta sleep-inducing Peptide,dsip ELISA KIT

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