特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京现货副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)(国产,进口)由老Pai试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)等细菌PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)(国产,进口)
等级:科研试剂
规格:48次/盒
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
一、简介:
本试剂盒用一对副溶血性弧菌不耐热溶血毒素特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对副溶血性弧菌不耐热溶血毒素的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的副溶血性弧菌不耐热溶血毒素(TLH),用于副溶血性弧菌不耐热溶血毒素(TLH)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 | 数量 | 规格 |
TLH反应液(TLH-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
TLH阳性对照(TLH -PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、
荧光PCR 仪器适用范围ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR 检测仪。
五、
储存条件及有效期:本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
六、
样品采集、前处理与DNA 提取6.1 样品采集
水样便取0.5-1 mL;疑似污染的食物取1g。
6.2 样本前处理:
水样便13000rpm离心2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;疑似污染的水直接取100μL。
6.3
DNA提取可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的(DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套),并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。
由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。
七、
检测步骤:7.1
试剂的准备从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(TLH-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
酶混合液 | 1µL | N×1µL |
总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL 荧光PCR 反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TLH-PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2
qPCR反应条件将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min |
预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、
结果分析:8.1
结果分析条件设定直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2
试验成立判定(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(TLH-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3
结果判定(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明副溶血性弧菌不耐热溶血毒素核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明副溶血性弧菌不耐热溶血毒素核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行副溶血性弧菌不耐热溶血毒素qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明副溶血性弧菌不耐热溶血毒素核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、
注意事项:(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京现货副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)(国产,进口)极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·口蹄疫A型(FMDV-A)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA477
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肺炎支原体/肺炎衣原体双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA052
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、
简介:本试剂盒用一对犬细小病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对犬细小病毒核酸进行体外扩增检测,用于对可疑感染病犬的病原学诊断。
二、
用途:本试剂盒适用于检测咽拭子、痰液,肺、淋巴结等组织以及血清等标本中肺炎支原体(MP)和肺炎衣原体(CP)DNA,适用于肺炎支原体和衣原体感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。
三、
试剂盒组成:(48T)
名称 | 数量 | 规格 |
核酸提取液 | 2管 | 1.5ml/管 |
Taq 酶系 | 1管 | 50μl/管 |
qPCR MIX | 1管 | 1.0ml/管 |
阳性质控品 | 1管 | 50μl/管 |
阴性质控品 | 1管 | 250μl/管 |
四、
荧光PCR 仪器适用范围:取得资格认证的荧光定量PCR仪。
五、
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期6个月。
六、
样本采集及运输:1. 适用标本:咽拭子、痰液、组织、血液等。
2. 标本采集:
痰液:取受检者深部痰液2-3ml置入5ml离心管,密闭送检。
咽试子:受检者生理盐水漱口,无菌咽试子粘取深部痰液,置入5ml离心管,密闭送检。
灌洗液:取待检者肺灌洗2-3ml,置于5ml离心管,密闭送检。
其他标本:取发病动物血液、组织等标本立即送检。
3. 保存运输:标本建议立即送检,如果需要保存建议于-20℃或者-80度保存,不超过6个月。避免反复冻融。标本运送时应采用0℃冰壶。
七、
检测步骤:1. 核酸提取
1.1 痰液或灌洗液:将痰液或灌洗液充分混匀,取0.5ml转至1.5ml干净离心管,加入等体积4%NaOH,充分混匀,室温放置10min,12000rpm离心5分钟,弃上清,沉淀加50μl核酸提取液,充分混匀,100℃处理10分钟,12000rpm离心5分钟,取上清液4μl做PCR反应。
1.2 咽试子:取1ml生理盐水加入5ml离心管,充分洗涤咽试子,将洗涤液转至1.5ml干净离心管中,13000rpm离心5分钟,弃上清,沉淀加50μl核酸提取液,充分混匀,100℃处理10分钟,12000rpm离心5分钟,取上清液4μl做PCR反应。
1.3 固体组织:剪取约0.5g组织,用生理盐水洗去血污,剪碎加入TE0.5ml转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50ul转移到1.5ml离心管中,加入50μl核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀) 并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清4μl进行PCR反应。
1.4 其他液体标本(培养物或血清等):取标本1-2ml,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀加入50μl核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀) 并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清4μl进行PCR反应。
上述标本也可以选用取得资格认证的商业化试剂盒提取DNA。
2.PCR扩增
从试剂盒中取出qPCR MIX、Taq酶系室温融化并振荡混匀后,瞬时离心。设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
计算好各试剂的使用量,在一个灭菌洁净离心管中充分混匀,瞬时离心,向设定的N个PCR反应管或反应板中加入21μl上述试剂,然后再分别加入4μl 提取的待测样品、阳性质控品和阴性质控品,瞬时离心。放入荧光定量PCR仪器的反应槽内,按对应顺序设置阳性质控品、阴性质控品以及待测样品,并设置样品名称、报告基团设置为FAM和HEX(或JOE或VIC),其中FAM基团检测肺炎支原体,HEX(或JOE或VIC)基团检测肺炎衣原体,淬灭基团为TAMRA。
推荐扩增条件为:94℃→2分钟,后94℃ 30秒→55℃ 45秒(采集荧光),40个循环。
基线调整取6-15个循环的荧光背景信号,阈值设定原则上以阈值线刚超过阴性质控品的检测荧光曲线的ZG点。
3. 结果分析判定
反应结束后,针对FAM和HEX(或JOE或VIC)双通道,使用手动调整阈值使阴性质控品Ct 值均在40以上,Ct 值小于35的为阳性;Ct 值在35-40之间,为灰区,需要进行重复试验。重复试验之后,如果Ct 值仍然在35-40之间,判断为阴性。
其中FAM通道为肺炎支原体检测结果,HEX(或JOE或VIC)通道为肺炎衣原体检测结果。
4. 质控标准
阴性质控品:CT值均显示UNDET或者CT=40,即结果为阴性;
阳性质控品:Ct 值均应小于 30,且呈标准“S”型扩增曲线。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效,全部试验应重新进行。
八、
注意事项:(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京现货副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)(国产,进口)关键词:百奥莱博,TLH,SYA070,副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒,副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)
铜检测试剂盒(Cuprizone微板法) 100T
ARB10930 人吡*(代"啶")交联物(PY)检测服务 Human pyridinium crosslink/pyrilinks,py ELISA KIT
ARB13377 牛流行性出血热(EHF)elisa检测
HC0062 袋装无菌滤芯吸头
ARB13700 兔阿霉素(ADR)ELISA检测服务 Rabbit adramycin,adr ELISA KIT
PY08-076 磷酸盐缓冲液 9ml 20支/盒 用作稀释液
ARB12398 大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)Elisa分析 Rat retinol-binding protein,rbp ELISA KIT
Na-对甲*磺酰-L-赖*酸*甲基*(代"酮")盐*(代"酸")盐 Fast green FCF 4272-74-6
ARB10340 人水蛭素(HRD)酶联免疫定量检测 Human hirudin,hrd ELISA KIT
ARB10868 人抗核周因子抗体(APF)Elisa定量检测 Human anti-perinuclear factor,apf ELISA KIT
ARB12668 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA检测服务 Rat carbonic anhydrase,ca ELISA KIT
DP106 质粒小提中量试剂盒
RN2901 "Allprep 组织/细胞RNA/DNA分提试剂盒
F040318 牛IgG抗原 Bovine IgG
ARB14239 大鼠I型胶原交联*基末端肽(NTx)代做ELISA实验
北京现货副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)(国产,进口)关键词:百奥莱博,TLH,SYA070,副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒,副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)
·手足口病肠道病毒(EV71)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA211
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·副溶血性弧菌耐热相关溶血素(TRH)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA072
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、
简介:本试剂盒用一对副溶血性弧菌耐热相关溶血素特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对副溶血性弧菌耐热相关溶血素的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、
用途:该试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的副溶血性弧菌耐热相关溶血素(TRH),用于副溶血性弧菌耐热相关溶血素(TRH)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、
试剂盒组成:(48T)
组份 | 数量 | 规格 |
TRH反应液(TRH-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
TRH阳性对照(TRH -PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、
荧光PCR 仪器适用范围ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列,博日系列及其他荧光定量PCR 检测仪。
五、
储存条件及有效期:本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6 个月。
六、
样品采集、前处理与DNA 提取6.1 样品采集
水样便取0.5-1 mL;疑似污染的食物取1g。
6.2 样本前处理:
水样便13000rpm离心2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;疑似污染的水直接取100μL。
6.3
DNA提取可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的(DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套),并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。
由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。
七、
检测步骤:7.1
试剂的准备从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(TRH-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
酶混合液 | 1µL | N×1µL |
总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TRH-PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2
qPCR反应条件将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min |
预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、
结果分析:8.1
结果分析条件设定直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2
试验成立判定(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(TRH-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3
结果判定(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明副溶血性弧菌耐热相关溶血素核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明副溶血性弧菌耐热相关溶血素核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行副溶血性弧菌耐热相关溶血素qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明副溶血性弧菌耐热相关溶血素核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、
注意事项:(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货副溶血性弧菌不耐热溶血毒素荧光PCR检测试剂盒(TLH)(国产,进口)。
温馨提示:不可用于临床ZL。