高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) DNA纯化

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) DNA纯化，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) DNA纯化
编号：ALH089
产地：国产|进口
规格：10次
英文名：A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，ZH低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(10次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
去蛋白液PD———————————100ml
漂洗液WB————————————2×25ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、方便，从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成，使用转速可以达到12000g，带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、P3的用量，洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间，提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小，必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱，质粒应该保存－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)|高纯质粒大量制备试剂盒

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·一步法荧光定量耐热RT-PCR试剂盒
编号：ALH197
英文名称：One Step heat-resistant qRT-PCR Kit
规格：50μl×50次|50μl×100次
本试剂盒是采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行Real Time PCR 的专用试剂，用本制品进行Real Time qRT-PCR 可在同一反应管内连续进行。反应过程中无需打开

管盖添加试剂并可对扩增产物进行实时检测，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。非常适合于微量RNA 尤其是微量RNA病毒的检测。本试剂盒包括最

适合Real Time PCR的突变改造M-MuLV H Minus逆转录酶(THERMOscript RTase)、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasinYZ剂mix、同时包含适用于逆转录和

PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性。同时该酶多点突变提高了耐热性，

可以在50℃反转录，提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率。而采用优质热启动酶HotMaster Taq DNA Polymerase可以ZD限度的减少PCR扩增全程中

的非特异性扩增产物产生，大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定量检测，重复性好

，可信度高。

试剂盒组份(50次)：
2×qRT-PCR Mix(含Sybr Green I)———————1.25ml
Enzyme Mix—————————————————50μl
耐热反转录酶————————————————50μl
RNase free H2O———————————————1.5ml

适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；部分高GC 含量或具有复杂二级结构的RNA 模板。

注意事项：
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step qRT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液（Master Mix，其中包括RNase-free ddH2O、Buffer、各种酶等），然

后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
2. 使用Enzyme Mix和RTase时，分取之前要小心地瞬间离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有高浓度的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
3. 2×qRT-PCR Mix内含Sybr Green I，保存或配制One Step qRT-PCR反应液时应避免强光照射。
4. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板。
5. 不同的片段，所需ZJRNA模板用量不同，过多的RNA会YZ反应，建议根据反应调整模板用量。
6. 只能使用特异性引物，不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 进行反应。

储存条件：-20℃，有效期12个月。


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