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百奥莱博专业生产供应耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)现货供应,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)现货供应
规格:10000U
英文名:Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-)
品Pai:百奥莱博
本产品为点突变型M-MLV逆转录酶(RNase H缺失),拥有RNA和DNA聚合酶活性,但由于在RNase H结构域内进行了点突变,该酶缺少RNase H的活性,不会降解DY链CDNA 合成时形成的RNA-DNA 复合物中的RNA,从而可以从长模板中获得高产量的全长cDNA。缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。
产品特点:
1.温度稳定性,点突变产物的热稳定性可防止与二级结构相关的问题,增强了与模板的亲和力。
2.能够在较宽的温度范围内保持活性,在42-45℃之间具有ZJ活性,在温度高达55℃时仍有活性。
3.聚合酶活性增强,本产品与其它缺失突变得到的M-MLV 逆转录酶相比,具有更高的cDNA产率。
4.高产量制备全长的DY链cDNA,最长可达13kb。合成时可掺入带有修饰的核苷酸(例如 Cy3-、Cy5-、罗丹明-、*基烯丙基-、荧光素-标记的核苷酸)。
5.广泛的工作范围:提高了逆转录的性能,使得可以在更广泛的酶浓度和底物浓度的条件下工作。
产品组成:
成分 | 规格 |
耐热型MMLV逆转录酶(H-),200U/μL | 50μl |
5×RT Buffer | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:1.在无RNase的PCR管中加入如下成分:
成分 | 用量 |
▶RNA模板 |
Total RNA 或poly(A)RNA 或specific RNA | 0.1ng-5μg 10pg-500ng 0.01 pg-0.5μg |
▶引物 |
Oligo dT18 或随机引物 或基因特异引物 | 0.5μg(100pmol) 0.2μg(100 pmol) 15-20 pmol |
▶RNase-free水 | Up to 12.5μL |
2.对富含二级结构的高GC RNA模板,65℃保温5分钟后迅速冰浴2-10分钟。
3.离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。
4.按顺序向上述反应液中加入下表各成分,反应终体积为20μL:
5×RT Buffer | 4μL |
RNase Inhibitor | 0.5μL(20U) |
dNTP Mix,10mM each | 2μL(终浓度1mM) |
耐热型MMLV逆转录酶(H-) | 1μL(200U) |
轻柔混匀,短暂离心。
5.42℃保温60分钟(Oligo dT18或基因特异引物);如果是随机引物则先在25℃保温10分钟,然后再转移至42℃保温60分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板保温温度可以设为55℃。
6.70℃保温10分钟终止反应后置冰上冷却,得到cDNA。该产物可直接用于PCR扩增或-20℃保存。
耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)现货供应正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·L-谷胱甘肽(还原型)
编号:BTN120705
英文名称:Glutathione
规格:5g
还原型谷胱甘肽是人类细胞质中自然合成的一种肽,由谷*酸、半胱*酸和甘*酸组成,含有巯基(-SH),广泛分布于机体各器官内,作为一种抗氧化剂,可以保护肝脏细胞膜,增强肝脏的能力,为维持细胞生物功能呈有重要作用。本产品可用于配制纯化GST标签蛋白的洗脱液。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期两年。
·非酶多糖清除剂(RNA样品专用)
编号:BTN60204
英文名称:Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger
规格:10mL
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide,PS)污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前没有十分有效的方法去除这一污染。我公司开发的非酶法PS清除剂能够比较好的解决这一问题。
产品特点:1.GX,能有效地去除总RNA中的PS污染,使RNA溶液不再粘稠。
2. 不含RNase污染,RNA分子完整性不会受到任何影响。
3.快速,全部操作在样品管中完成,只需要二十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 将十分粘稠的总RNA样品用RNase-free水稀释到100-500μl左右,加入等体积的65℃预热10分钟后的PS Scavenger,振荡器上充分振荡1分钟。
2. 加入等体积的*仿,振荡器上充分振荡1分钟。
3. 12000~15000g离心2分钟,转移上清到一新的离心管中,交界处将有白膜样的多糖沉淀。
4. 加入0.1倍体积的3 M NaOAc(pH5.2)和两倍体积的无水乙醇,混匀后12000~15000g离心10-20分钟。小心弃上清。
5. 加入1mL 75%乙醇,振荡器上短暂振荡后12000~15000g离心2分钟,小心弃上清。
6. 短暂离心,用移液枪小心吸去残留液体后,加入适量RNase-free水或具有灭活残留RNase的液相RNase Scavenger。立即使用或-80℃保存。
耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)现货供应关键词:耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性),Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-),BTN131210
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·鲑鱼精DNA溶液
编号:BTN100604
英文名称:Salmon Sperm DNA Solution
规格:1mL
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链鲑鱼精DNA溶液,可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·衣霉素溶液
编号:BTN120702
英文名称:Tunicamycin Solution
规格:1mL
本产品为5mg/mL的衣霉素溶液,溶剂为甲醇。衣霉素(链病毒菌素;Nsc177382;Aids010655),分子式:C37H60N4O16,分子量:816.89,CAS号:11089-65-9 。为放线菌Streptomyces lysosuperficus产生的核苷酸抗生素。可YZ具有被膜(envelope,含糖蛋白)的病毒的繁殖。作用机理是YZ合成糖蛋白糖链必需的拟脂(多萜醇,dolichol)中间产物的生成。常作为研究糖蛋白的工具,能通过YZN-乙酰*基葡萄糖-1-磷酸到一磷酸长醇的转移从而阻止糖蛋白的形成。
储存条件:低温运输,4℃避光保存,有效期6个月。
·6nt随机引物(0.5 ug/uL)
编号:BTN100409
英文名称:Hexamer
规格:5μg
本产品为长度为6nt的随机引物,序列为5´-(NNNNNN)-3´,主要用于以任何RNA为模板合成cDNA,也可以用于DNA探针的随机引物标计。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
疑难解答:Q:在合成cDNA时,使用Oligo dT12-18和用随机引物有何区别?
A:只有当以带polyA尾巴的RNA作为模板才能使用Oligo dT作为引物,而任何RNA模板都可以使用随机引物。使用后者的序列覆盖率比使用Oligo dT更高。
耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)现货供应关键词:耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性),Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-),BTN131210
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N-乙酰-L-谷*酸 5-Hydroxymethylfurfural 1188-37-0
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)现货供应。
温馨提示:不可用于临床ZL。