琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(柱式吸附) 核酸电泳和回收

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名称：琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(柱式吸附) 核酸电泳和回收
编号：BTN60202
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
英文名：Agarose gel DNA column Recovery Kit
规格：50次
本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA反应体系中(如PCR反应)回收DNA片段。试剂盒采用可以GX、专一结合DNA的硅胶膜和独特的溶胶体系，或DNA反应体系中回收的DNA片段，回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。

产品特点：
1.GX，回收效率ZG可达90%(跟片段大小和胶浓度等因素有关)。
2.快速，整个过程只需要十余分钟。
3. 回收DNA的范围为50bp－40Kb(但效率各不相同)。
4. 纯度高，本试剂盒回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。
5. 用途广，本试剂盒能回收单链、双链及环状DNA。
6. 储存方便，试剂盒可以在室温放置数月，不影响其质量。

试剂盒组成：

 

成分	规格
通用溶胶液	25ml
通用洗柱液	50ml
离心吸附柱	50套
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期为一年。

使用方法：
1. 对胶回收：切取含DNA片段的琼脂糖凝胶(100mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)，放入一干净的1.5mL塑料离心管(自备)中，用移液枪头捣碎，按重量比为1：3到1：5的比例加入通用溶胶液(100mg琼脂糖凝胶需要加入300μL-500μL通用溶胶液)。
 PCR回收：直接在PCR反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液，混匀，然后跳过第2步、直接从第3步做起。如果PCR反应中使用了石蜡，需要预先去除。
2. 50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟)，其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。如果片段长度在300bp以下，建议不要加热，以免DNA变性，影响回收率。
3. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中，套上液体收集管，静置3分钟。
 注意：静置有助于DNA与离心吸附柱的硅胶膜结合。若一次加不完，可分两次加入并离心。
4. 12000～15000g离心1分钟，倒掉收集管中的液体。
5. 加入0.7-0.8mL通用洗柱液于离心柱中，室温静置2分钟。
6. 12000～15000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
7. 12000～15000g离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。
8. 将离心柱置于一新的干净的塑料离心管(自备)中，加入30-100μl DNA洗脱液2.0于离心吸附柱硅胶膜的ZY，静置3分钟。
9. 12000～15000g离心1分钟。
10.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液，可立即用于后续实验或者放-20℃长期保存。

注意事项：
1.电泳回收DNA时，电泳缓冲液可以为TAE、TBE或者DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2。回收效果为SuperBuffer-2，TAE次之，TBE最差。详细见SuperBuffer-2产品介绍。
2. 通用洗柱液含有容易挥发物质，使用后一定要拧紧瓶盖，密闭保存。
3. 琼脂糖凝胶体积的大小与回收率成反比关系，即体积越大，越不利于回收，一次胶回收以使用100mg琼脂糖凝胶为宜。
4. 如果在五分钟内凝胶溶化不完全，可以适当的延长水浴时间以使胶充分溶化，否则DNA包裹在琼脂糖凝胶中，影响DNA的回收效率。
5.胶溶化后的液体转移到离心柱后，可以延长静置时间使DNA与膜充分结合，提高回收效率。
6. 洗脱DNA前的空甩很重要，其目的是去除膜上残留酒精，否则残留酒精会影响后续DNA反应。
7. 增大DNA洗脱液2.0使用量有利于回收，但要注意实际上样量与ZZ回收体积的关系，以便于计算回收率。DNA洗脱液2.0可以用TE或水替代，但回收率稍有降低。

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