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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)现货价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)现货价格
编号:BTN81212B
规格:30次
品Pai:百奥莱博
英文名:One-Stop Protein Native PAGE Pack(B)
非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目前电泳法分离活性蛋白的主要方法之一,跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同,它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同,所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐,为此本公司开发了本产品。
产品特点:
1.即开即用,不需单独准备各种成分,十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺
2.非变性,电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用,得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
3.可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
4.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
5.提供具有3种不同pH的缓冲液套装,便于客户选择最适合的缓冲液体系。
产品组成:
成分 | 规格 |
丙*(代"烯")酰胺干粉 | 60g |
甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉 | 3g |
TEMED | 1.5ml |
过硫*(代"酸")铵干粉 | 1g |
高中低缓冲液套装选一 | ABC之一(见下) |
说明书 | 1份 |
高pH缓冲液套装(只有BTN81212A有此成分) |
高pH浓缩胶配胶液(pH6.7),4× | 100ml |
高pH分离胶配胶液(pH8.9),4× | 200ml |
高pH电泳液(pH8.3) | 10L(干粉) |
高pH上样液,5× | 1ml |
中pH缓冲液套装(只有BTN81212B有此成分) |
中pH浓缩胶配胶液(pH5.5),4× | 100ml |
中pH分离胶配胶液(pH7.5),4× | 200ml |
中pH电泳液(pH7.0)干粉A | 55.2g |
中pH电泳液(pH7.0)干粉B | 10g |
中pH上样液,5× | 1ml |
低pH缓冲液套装(只有BTN81212C有此成分) |
低pH浓缩胶配胶液(pH6.7),4× | 100ml |
低pH分离胶配胶液(pH4.3),4× | 200ml |
低pH电泳液(pH4.5) | 10L(干粉) |
低pH上样液,5× | 1ml |
注:高、中和低pH缓冲液套装里面均含100mL浓缩胶配胶液、200mL分离胶配胶液、10 L电泳液(干粉)和1mL上样液,只是pH不同。
储存条件:常温运输和保存(上样液需-20℃保存),保存期为一年。
使用方法:如何选择缓冲液?
高pH浓缩胶,高pH分离胶,高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此,绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液,电泳液,配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要,缓冲液的ZJpH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI,则蛋白质分子带电多(电荷密度大),电泳速度快,分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性,失去活性,所以ZJpH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡,需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定,没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5,所以在不知道目标蛋白的pI时,可以先选用高pH缓冲系统。
一、
配制分离胶1.确定浓度。对分子量在100Kd以上的蛋白质,可选用3-5%的胶;对分子量在20-150KD之间的蛋白质,可选用5-10%的胶;对分子量在10-80KD之间的蛋白质,可选用10-15%的胶。对未知样品,建议使用7.5%的胶。
2.配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL去离子水的比例配制10%的APS溶液,该溶液可以在4℃存放一周。
3.配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺,充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液。此溶液在一个月内用完,必须4℃避光保存。
4.配10mL分离胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中,先加入4.2mL去离子水、3.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液和2.5mL 4×分离胶配胶液。
5.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能YZ丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6.加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则按比例增加),迅速摇匀后倒胶。注意:如果购买的是低pH缓冲系统,由于在低pH缓冲液中PAGE聚合速度降低,所以需要增加上述两成分的用量。
7.在胶面距离顶部1-1.5 cm的时候停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm厚的水,使胶顶部液面平整。由于比重不同,水和丙*(代"烯")酰胺溶液不会混合。
8.室温聚合30-60分钟后,用1×分离胶配胶液洗涤凝固的胶的顶部,待用。
二、
配制浓缩胶(浓缩胶可以提高分辨率,适合于成分复杂的样品,一般使用浓度为4%。使用浓缩胶时蛋白质泳动速度主要跟其尺寸和形状相关。因浓缩胶pH跟分离胶pH不同,蛋白质可能会发生聚合和沉淀。对成分单一的样品,可以不用浓缩胶,此时蛋白的泳动速度主要跟其电荷密度,尺寸和形状相关。)
1.配10mL浓缩胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中,先加入6.2mL去离子水、1.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液和2.5mL 4×浓缩配胶液。
2.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能YZ丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
3.按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则用量需按比例增加),迅速摇匀后在已经凝固的分离胶上倒胶。
4.在液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子。
5.室温聚合30-60分钟,拔出梳子,用1×电泳液冲洗加样孔。
三、
电泳1.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够1×电泳液。注:本产品提供10升的三种不同pH的电泳液干粉中的一种,低PH和高PH值电泳液用前需将所有干粉溶解在1 L水中得10×电泳液,可以室温放置,用时再稀释成1×电泳液。一般不需要再调节pH,但保险起见,可以用pH试纸测试一下1×电泳液。高中低pH电泳缓冲液的pH分别是8.3,7.0和4.5。
注意:中pH值的电泳液干粉只能配1x电泳液,否则不溶解。称取中pH电泳液(pH7.0)干粉A,5.52g,中pH电泳液(pH7.0)干粉B 1g混匀,加去离子水至彻底溶解,调PH7.0,定容至1L。客户根据可实际需要量按比例增减。
2.连接电极。如果浓缩胶和分离胶的pH高于目标蛋白pI,目标蛋白将带负电荷并向阳极移动,可以按标准的SDS-PAGE方法接通电极(上阴极下阳极);如果浓缩胶和分离胶pH低于目标蛋白pI,目标蛋白将带正电荷并向阴级移动,此时应该下阴极上阳极。
3.300V预电泳直到电流不再降低(约需要30分钟)以去除残留过硫*(代"酸")铵。
4.换电泳液。
5.在液体蛋白质样品中加入5×上样液(16μl液体样品加4μL上样液)后上样。0.75 mm厚的胶可以上10μl,1.5 mm厚的胶可以上20μl。在未用加样孔中也要加1×上样液以防有样品的空道的样品扩散。注意:如果用考染检测,每个孔的蛋白在50-100μg总蛋白,如果银染则只需要1ug即可。样品如果是蛋白质沉淀,可用1×上样液直接溶解蛋白质沉淀后再上样。蛋白质溶液或沉淀中不能含有能够改变上样液pH的残留成分(如蛋白质沉淀剂TCA),用前用pH试纸测试一下,不在上样液的pH范围时就用酸或碱调到正常范围。大量样品可用透析法调pH。
6.上样自备的天然PAGE蛋白质标准或等电电泳的标准品(如果有的话)。
7.用15 mA(对0.75 mm厚的胶)或30mM(对1.5mm厚的胶)的电流电泳直到染料移动到分离胶底部。微型胶一般需要1-2小时。注意:电泳过程在冷室或有冷却系统,以免电泳产热使蛋白质变性。
8.终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或酶活性检测)。
更多有关
北京一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)现货价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·尿嘧啶切刻酶
编号:BTN130666
英文名称:Uracile Nicking Enzyme
规格:50U
本产品在尿嘧啶位置产生一个单核苷酸缺口,它是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和DNA糖基化酶-裂解酶 Endo Ⅷ的混合物。UDG催化尿嘧啶碱基的切割,形成一个脱碱基(脱嘧啶)位点,但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo Ⅷ的裂解酶活力使脱碱基位点 3´和5´端的磷酸二酯键断裂,释放无碱基的脱氧核糖。其反应示意图如下:
产品特点:1.PCR产物的克隆;
2.在DNA的尿嘧啶处产生缺口。
产品组成: 成份 | 规格 |
尿嘧啶切刻酶(1000U/mL) | 50μL |
10×Buffer | 1mL |
使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在10μl反应体系中,37℃条件下,15分钟使10pmol的含有单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链产生切刻所需要的酶量。
北京一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)现货价格关键词:一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装,一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH),BTN81212B,One-Stop Protein Native PAGE Pack(B)
·革兰氏阳性菌DNA提取试剂盒(百万碱基级)
编号:BTN130949
英文名称:Gram positive bacteria DNA extraction kit(millions of base)
规格:10次
·消解酶干粉(溶细胞酶)(≥200U/mg)
编号:BTN100919
英文名称:Digestion enzyme,powder
规格:100mg
本品是从藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus后改名为Oerskovia xanthineolytica)深层培养获得的酶干粉,它能有效的裂解活酵母细胞细胞壁。其主要成分是Alkaline Proteinase和β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucanlaminaripentaohydrolase),前者负责破坏细胞壁的甘露糖蛋白层使后者能够进入细胞壁外层葡聚糖层并发挥作用。本产品主要用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球形成及葡聚糖水解。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·去离子水
编号:BTN81209
英文名称:Deionized water
规格:250mL
本品是从藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus后改名为Oerskovia xanthineolytica)深层培养获得的酶干粉,它能有效的裂解活酵母细胞细胞壁。其主要成分是Alkaline Proteinase和β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucanlaminaripentaohydrolase),前者负责破坏细胞壁的甘露糖蛋白层使后者能够进入细胞壁外层葡聚糖层并发挥作用。本产品主要用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球形成及葡聚糖水解。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·红色DNA上样液(6×,非甘油)
编号:BTN130958A
英文名称:DNA Loading Buffer(Red)
规格:10mL
本品是从藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus后改名为Oerskovia xanthineolytica)深层培养获得的酶干粉,它能有效的裂解活酵母细胞细胞壁。其主要成分是Alkaline Proteinase和β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucanlaminaripentaohydrolase),前者负责破坏细胞壁的甘露糖蛋白层使后者能够进入细胞壁外层葡聚糖层并发挥作用。本产品主要用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球形成及葡聚糖水解。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·单细胞裂解液(RNA提取)
编号:BTN130804
英文名称:Single Cell Lysis Solution
规格:1mL
本产品为单细胞RNA提取专用裂解液,本裂解液经多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效YZ核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸结构的稳定含有常用。纯化所得RNA可用于测序、单细胞PCR等实验。本产品足够使用200次以上。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
·放线菌*(代"素")D
编号:BTN120680
英文名称:Actinomycin D Solution
规格:1mL
本品为浓度为1mg/mL 放线菌*(代"素")D的DMSO溶液。放线菌*(代"素")D(更生霉素;Cosmegen、Meractinomycin),分子式为C62H86N12O16,分子量:1255.41。可作为代谢YZ剂,细胞质膜研究。它能YZRNA的合成,作用于mRNA,干扰细胞的转录过程,阻止蛋白质的合成。吞食有极高毒性。
抗性机制:放线菌*(代"素")D分子中含有一个*氧环结构,通过它连接两个等位的环状肽链。此肽链可与DNA分子的脱氧鸟嘌呤发挥特异性相互作用,使dactinomycin D嵌入DNA双螺旋的小沟中,与DNA形成复合体,阻碍RNA多聚酶的功能,YZRNA的合成,特别是mRNA的合成。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
北京一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)现货价格关键词:一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装,一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH),BTN81212B,One-Stop Protein Native PAGE Pack(B)
ARB11315 人促胰液素/胰泌素(SecretIn)检测服务 Human secretin ELISA KIT
ARB11576 人基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/GelAtInAse B)酶免分析 Human matrix metalloproteinase 9/gelatinase b,mmp-9 ELISA KIT
BTN90309 红细胞裂解液B型(流式细胞分析用) Red Cell Lysis Solution,Type B
ARB13389 牛溶菌酶Lysozyme ELISA检测服务
CD111 超纯dTTP(100mM)
放线菌*(代"酮") N-Acetyl-L-Glutamine 66-81-*(代"9")
无*基酵母氮源[不含硫*(代"酸")胺] γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide
FMOC-L-甘*酸 Dibenzo-18-crown-6 29022-11-5
BL0909 FITC标记兔抗豚鼠IgG抗体
TBS-葡萄糖溶液 500ml
ARB13736 兔胸腺细胞球蛋白(ATG)免费代测
琼脂糖蛋白A VA
L-酪*酸二*盐 Norfloxacin 69847-45-6
ARB14104 肌酐(CR)测试盒
pH标准缓冲溶液(pH=4.00) 50ml|100ml
C0301 优级新生牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
ARB13531 兔一氧化*(代"氮")(NO)Elisa分析 Rabbit nitric oxide,no ELISA KIT
ARB10595 人血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)酶标法分析 Human platelet-derived growth factor-bb,pdgf-bb ELISA KIT
L0203 IgG(1、2a、2b)类单克隆抗体腹水纯化试剂盒
ARB12222 大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)Elisa定量检测 Rat platelet-derived growth factor soluble receptor α,pdgfsr-α ELISA KIT
双*链霉素 Histamine 5490-27-7
ARB13884 猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/SLAⅡ)尿液中含量检测 Swine major Histocomp*(代"a")tibility complexⅡ,mhcⅡ/slaⅡ ELISA KIT
北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购北京一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)现货价格。
温馨提示:不可用于临床ZL。