特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")牛血清γ球蛋白标准品(2mg/mL)大量库存促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:牛血清γ球蛋白标准品(2mg/mL)大量库存促销
英文名:Bovine γ IgG Standard
规格:1mL
编号:BTN131071
产地:国产|进口
牛血清γ球蛋白标准品(BGG)经过滤CJ,质量稳定。本产品是考马斯(Bradford)分析实验的理想标准品,是使用任何方法测定抗体浓度的理想标准品。本产品浓度为2mg/mL。本品仅用于科研实验,不能用作YL及临床诊断。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:0.9% NaCl溶液或PBS缓冲液、BCA工作液。
使用方法:
本产品可应用于蛋白分析定量(BCA蛋白分析、考马斯-Bradford分析等)、抗体脱盐回收或其他层析操作的对照、SDS-PAGE电泳和分光光度计紫外灯的常规校准(吸收峰在280nm)等实验。由于蛋白操作彼此差别太大,本手册只列出此产品用于BCA蛋白分析的实验流程,其他流程不在此详述。
1.标准品溶液的稀释方法见下表。此标准品溶液的稀释可使用去离子水、0.9% NaCl或PBS。
2mg/mL本品(μL) | 稀释液(μL) | 稀释后产品终浓度(μg/mL) |
120 | 0 | 2000 |
90 | 30 | 1500 |
60 | 60 | 1000 |
45 | 75 | 750 |
30 | 90 | 500 |
15 | 105 | 250 |
10 | 110 | 125 |
0 | 120 | 0(空白对照) |
2.本产品标准曲线的制备
1)分别取50μL稀释后的本标准品溶液加入到1.5mL离心管中,每个浓度取2个平行样。
2)在每管中各加入1mL工作液后,立即混匀。
3)37℃水浴槽中反应30分钟后,冷却至室温。
4)使用分光光度计测定562nm处的吸光度值。测定时,使用1mL比色皿,用水校零。尽可能在20分钟内检测完毕所有样品。
5)各浓度本标准品溶液的吸光度值减去空白对照的平均值,绘制本标准品溶液的标准曲线。
3.检测样品的测定
检测样品建议与本标准品溶液同时进行测定,测定方法同上,与本标准品的测定方法一致。如果必要也可选择与本标准品溶液相同的稀释方法稀释检测样品后测定。
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·大提柱式质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN80912
英文名称:Mass-plasmid DNA column extraction kit
规格:5次
本试剂盒是用于质粒DNA大量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,ZH洗去杂质,GX快速提取质粒DNA,全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从50-100mL 过夜培养的菌液纯化得到高达300-500μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280= 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
试剂盒特点:1.快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
2.纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
3.产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
4.用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
5.价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 30ml |
溶液B | 30ml |
RNase A溶液(10mg/mL) | 0.15ml |
溶液C | 40ml |
大提离心吸附柱 | 5套 |
通用洗柱液 | 100ml |
DNA洗脱液2.0 | 10ml×2 |
说明书 | 1份 |
储存条件:RNase A溶液需-20℃保存,其余成分可室温或4℃保存,如有沉淀可加热溶解后再使用。
使用方法:1. 用250mL离心管收集100-300mL菌液,5000rpm离心10分钟,去除上清。
2. 往细菌沉淀中加入6mL溶液A,充分振荡悬浮(DY次使用时需要将RNase A溶液全部加入到溶液A中并混合均匀,未用完的、含RNase A的溶液A需放4℃保存)。注意:充分重悬细胞沉淀使之无细胞结块状物对于获得高的质粒产量十分重要。
3. 加入6mL溶液B,温和翻转10 余次至透明。若混合液不透明,应减少细菌的用量或室温放置5-10分钟直到裂解液变透明。注意: 避免剧烈振荡,否则细菌基因组DNA 将断裂为小片段,与质粒难以分离,污染质粒DNA。
4. 加入冰浴的8mL溶液C,颠倒混匀,冰上放置10分钟。混合物中将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
5. 6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力强,离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
6. 将上清液(约20mL)转移到离心吸附柱中,放入50mL 套管中。
7. 6000rpm离心5分钟,质粒DNA 将与离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
8. 将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
9. 重复上步一次,即将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
10.室温6000rpm 空甩5分钟,弃穿透液。注意:此步对去除残留通用洗柱液很重要,否则通用洗柱液会影响DNA的使用。
11. 将离心吸附柱放入一个自备的、干净的50mL塑料离心管中,加1mL DNA洗脱液2.0(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳),室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,收集液即是质粒DNA溶液。
12. 本试剂盒中的离心吸附柱吸附能力较强,所以再用1mL DNA 洗脱液2.0洗脱3-4次才能把绝大部分质粒DNA 洗脱下来。得到的RNA可以收集在一起立即使用或存放于-80℃待用。注:如果DNA 洗脱液不够,可以用自备的DEPC 水代替。
注:一般情况下,DY次洗脱可以洗脱约25%的质粒DNA;第二次洗脱可以洗脱约35%的质粒DNA;第三次洗脱可以洗脱约20%的质粒DNA;第四次洗脱可以洗脱约10%的质粒DNA;第五次洗脱可以洗脱约8%的质粒DNA。
13. 合并所得质粒DNA,立即使用或-20℃储存。如果需要使用液相内毒素清除剂清除质粒DNA中的内毒素,可以直接将此步所得的DNA溶液用于去内毒素处理。如果DNA浓度太低,可以另购本公司的核酸浓缩剂进行浓缩。
注意事项:1.细菌培养时间一般为12-16小时,但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
2.溶液A:溶液B:溶液C的比例为3:3:4。若细菌量增大,需按此比例放大这些溶液的使用量。
3.随菌体增多应延长溶液B的作用时间,直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
4.加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片,离心后应避免带入到后续处理中。
5.通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次,否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
6.质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。100mL高拷贝的菌液一般能得到700-1500ug质粒DNA,100mL低拷贝的菌液一般能得到150-350ug质粒DNA。
7.纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常,未分开的环套质粒,易被误判为基因组DNA。
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ARB10095 人D-乳酸脱*酶(D-LDH)酶免分析 Human d-lactate dehydrogenase,d-ldh ELISA KIT
ARB12581 大鼠凋亡诱导因子(AIF)血清中含量检测 Rat apoptosis inducing factor,aif ELISA KIT
甜菜碱溶液(5mol/L,PCR级) 10ml
D-生物素 L-Alanine ethlester hydrochloride 58-85-5
ARB10903 人抗滋养膜细胞抗体(ATA)Elisa分析 Human anti-trophoblast antibody,ata ELISA KIT
ARB14242 猪金属硫蛋白(MT)酶标法分析
BTN130420 Protein G琼脂糖 Protein G Agarose
PY02-278 月桂基硫*(代"酸")盐胰蛋白胨MUG肉汤 100g,用于大肠杆菌及O157:H7的检验
BTN131002 AP标记的抗生物素抗体 Anti Biotin Ab,AP
真菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法) 50T|100 T
5-肌苷一磷酸二*盐 Chromotrope 2R 20813-76-7
ARB10638 人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)酶标法分析 Human anti-endostatin antibody,es-ab ELISA KIT
RN1501 RNAfixer 无液氮RNA样品储存液
RN3401 DNASE I 柱上消化试剂盒(RNase free)
ARB11117 人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)elisa测定使用说明书 Human pulmonary surfatcant-associated protein a,sp-a ELISA KIT
BL1264 50ml离心套管
PY02-240 李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础 250克
HC0156 离心管盒(72孔)
SJ0850 兔血清
2,4-二**氧乙酸 Titan yellow 94-75-7
ARB12196 大鼠半胱天冬蛋白酶3(CAspAse3/CPP32)Elisa方法检测
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·Pfu DNA聚合酶
编号:BTN51207
英文名称:Pfu DNA Polymerase
规格:100U
Pfu DNA Polymerase是Pyrococcus furiosis(激烈火球菌)DNA Polymerase基因在大肠杆菌中表达并经多次过柱纯化分离而得。可用于高保真PCR、长链PCR的扩增,还可以用于DNA片段的粘转平反应。
产品特点:1.它具有3´-5´聚合酶活性,跟常用的Taq DNA聚合酶一样,能够用于PCR反应。
2.与Taq DNA Polymerase不同的是,它还具有3´-5´外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。
3.其出错率ZD的是具有校正功能的耐高温DNA Polymerase中ZD的。
4.Pfu DNA聚合酶比普通Taq DNA聚合酶热稳定性更好,95℃ 1小时仍维持90%以上活性。
产品组成: 成分 | 规格 |
Pfu DNA聚合酶(3U/μL) | 100U |
10×Pfu Buffer | 0.1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存。
使用方法:(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)
1.
按下列组份配制PCR反应液 Pfu DNA聚合酶(3U/μL) | 0.5-1μL |
10×Pfu Buffer | 5μL |
dNTP Mixture(各2.5mM) | 4μL |
模板DNA | 见下 |
引物1(10 uM) | 1μL |
引物2(10 uM) | 1μL |
灭菌蒸馏水 | Up to 50μL |
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量 哺乳动物基因组DNA | 0.5-1μg |
酵母基因组DNA | 5-500ng |
细菌基因组DNA | 0.5-50ng |
质粒DNA | 5-500pg |
PCR回收片段 | 1-100pg |
2.
PCR反应条件以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
温度 | 时间 | 循环数 |
94℃ | 3min | |
94℃ | 30sec | 30~50循环数 |
55℃ | 30sec |
72℃ | 2min |
72℃ | 5min | |
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定ZJ的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。
10×Pfu Buffer的组成:200mM Tris-HCl(pH8.8),100mM KCl,100mM(NH₄)2SO₄,500mM MgSO₄
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位。
质控标准:1.SDS-PAGE 考马市亮蓝染色无杂带污染。
2.无核酸内切酶活性检测(切刻酶活力)、核酸外切酶活性、核酸酶活性检测。
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温馨提示:不可用于临床ZL。