特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
茜素红S染色试剂盒北京现货促销的品Pai:百奥莱博,是优质的细胞及免疫学产品,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多茜素红S染色试剂盒等细胞及免疫学产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:茜素红S染色试剂盒北京现货促销
英文名:Alizarin Red S Staining Kit
编号:BTN121105
产地:国产|进口
规格:100mL
茜素红S染色试剂中的茜素红S可通过与*离子和其他金属离子发生鳌和反应而形成可以在显微镜下直接观察的带颜色的复合物。本产品就是基于此原理而开发。
产品特点:
1.即开即用,用户不需要单独准备各种溶液。
2.操作简捷,性能稳定,显色清晰。
3.可用于组织切片中的*沉积,尤其适用于骨细胞或组织的病理和生理研究。
4.可用于检测动物原生代或培养细胞的*沉积。
5.本产品为通用型,不但用于*离子的检测,还可用于FeCl2和CdCl2的检测。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
茜素红S染色 | 100ml |
茜素红S pH调节液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:注意:试剂具有腐蚀性,操作时须带手套。实验时可以用含金属离子的切片或培养细胞作为阳性对照。可溶性蛋白会干扰茜素红S与*的相互作用,所以样品必须经过固定处理(以去除细胞中的可溶性蛋白)。对培养细胞,还必须洗涤去掉培养基(含血清等蛋白成分)。茜素红S与*的螯合反应需要在水相发生,因此加入茜素红S 前用水溶液洗涤掉前面操作所残留的有机溶剂。
一、
茜素红S染色液的准备1、根据所需检查的金属离子按下表选择茜素红S染色液的ZJpH。
金属离子 | ZJPH | 呈现的颜色 |
CaCl2,CaPO4、CaCO3 | 4.28-6.75 | 橙红 |
FeCl2 | 5.62-8.05 | 深紫 |
CdCl2 | 5.11-5.78 | 品红 |
2.用茜素红S pH调节液将茜素红S染色液调到所需的pH值。
二、
染色载片上细胞3.用缓冲中性、-乙醇混合液或乙醇作为固定剂固定铺在载玻片上的细胞(本试剂盒不提供上述固定剂)。
4.将细胞放入95%乙醇中处理。
5.将载玻片在空气中干燥。
6.将载玻片放在装有茜素红S染色液的染色缸中染色1-5分钟。注意:此步需要密切控制,每隔一分钟放在显微镜下检测,ZJ时间随样品中盐离子的多少不同而不同。
7.用蒸馏水洗涤载片一次。
8.用丙*(代"酮")浸泡载波片30秒。
9.用丙*(代"酮")-二甲*混合液(50:50)浸泡浸泡载波片15秒。
10.肉眼可见红色或紫色(取决于所检查的离子)即可终止染色,放光学显微镜观察。*沉积阳性细胞将呈现桔红色。
三、
染色石蜡包埋切片11.按常规方法进行固定、包埋、切片、脱蜡和水化等操作,直到70%乙醇处理这步。注意:固定剂使用4%的副甲醛或10%,切片厚度在0.4μm。
12.将切片浸入蒸馏水中。
13.将切片浸泡在茜素红S染色液中30秒-5分钟,具体时间以肉眼或显微镜下可见桔红色斑点为准。
14.用滤纸吸尽染色液后浸入丙*(代"酮")20次。
15.再进入丙*(代"酮")-二甲*混合液(50:50)20次。
16.ZH用二甲*处理并用封固剂封片。
四:
染色细胞培养(是26或6孔培养板培养的细胞,便于在显微镜下观察)
17.小心抽去培养液,注意不要吸走细胞。
18.沿壁上缓慢加入1-2mL自备的1×PBS或HBSS缓冲液,然后再小心将加入的液体吸出。
19.每孔中加入自备的无水乙醇直到全部覆盖细胞,室温放置30分钟后小心移弃无水乙醇,室温晾干。此步用于固定细胞。也可用10%甲醛代替无水乙醇,但固定时间只需要15分钟,同时还需要用蒸馏水洗涤3次才能进入下一步。每次洗涤时,先加入蒸馏水,再浸泡5-10分钟,然后小心吸走蒸馏水。注意:操作时不要破坏细胞单层。
20.每个细胞培养孔中加入1mL 茜素红S染色液,在室温下孵育至少20分钟,ZH小心吸走茜素红S染色液。
21.加入1mL蒸馏水,然后小心吸走蒸馏水。此为洗涤步骤。注意:洗涤一定不要震荡以避免形成的*沉积物脱落。
22.重复上步操作3次(共洗涤4次)。
23.样品可立即用于显微镜检测。有*沉积的细胞将呈现桔红色。
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SJ0840 预染次高分子量蛋白质
十六烷基三甲基*化铵 4-Phenylbutyric acid 112-02-7
E0605 脱纤维裂解马血(无菌)
磺胺嘧啶 NBT 68-35-9
甲基-α-D-吡喃半乳糖苷 TPP 97-30-3
BTN90309 红细胞裂解液B型(流式细胞分析用) Red Cell Lysis Solution,Type B
腺苷脱*酶 Spectinomycin HCl 9026-93-1
CYB162012 兔抗大鼠IgG(抗血清) 0.5ml
动物灌注液 500ml
9008-02-0 牛血红蛋白 Hemoglobin
BL0959 胶体金标记兔抗猪IgG抗体
F030404 胶体金标记小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG*GOLD
4-苄基*基-7-硝基*(代"*")并氧杂恶二唑 Carmine 18378-20-6
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·两性霉素B
编号:BTN120681
英文名称:Amphotericin B Solution
规格:1mL
本品为浓度为20mg/mL两性霉素B的水溶液。两性霉素B(二性霉素B;节丝霉素B;Fungizone)分子式:C47H73NO17,分子量:924.08,CAS号:1397-89-3,可溶性两性霉素B系来自链霉菌的多烯抗真菌类抗生素,它与真菌细胞膜的固醇类物质,特别是麦角固醇有亲和性,在膜上形成通道,使一些小分子流失。KJ谱为真菌和酵母,多用于细胞培养。在日光下易被破坏失效。
储存条件:低温运输、-20℃避光保存,有效期6个月。
·动物细胞裂解液B(变性)
编号:BTN80807B
英文名称:Animal Cell Lysis Solution(B)
规格:100mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶YZ成分,可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞,使之释放出细胞内蛋白,用于后续实验。
产品特点:1.快速裂解,多种裂解成分经过精心优化,能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能ZD程度地保留蛋白天然结构和功能,主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀,还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高,主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验,还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
注意事项:1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶YZ剂复合物,可以更有效地YZ蛋白酶活性,防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究,在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶YZ剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响,因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。
使用方法:一:
处理贴壁的培养细胞1. 去除贴壁细胞培养液,用冰浴预冷的PBS 洗两遍,去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
注意:裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1~2×106细胞)需要0.1~0.2mL本产品;25 cm2培养瓶(3~6×106细胞)需要0.3~0.6mL;75 cm2培养瓶(1~2×107细胞)需要1~2mL。对于特别大或特别小的细胞,需要用户摸索ZJ用量。
4. 冰上放置10-30分钟(ZJ时间跟细胞系相关),其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端,并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,新鲜使用。
7. 用前先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
二:
处理悬浮细胞1. 400×g,4℃离心10分钟收集悬浮细胞,弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍,步骤同DY步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品,充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞,期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀,留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,新鲜使用。
7. 使用前先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
三:
处理组织块1. 称量组织块,用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆,用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中,1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品,吹打混匀,放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次,共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,新鲜使用。
6. 使用前先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
茜素红S染色试剂盒北京现货促销关键词:Alizarin Red S Staining Kit,BTN121105,茜素红S染色试剂盒
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·TRIzol试剂伴侣
编号:BTN81027
英文名称:TRIzol-Mate
规格:50次
TRIzol是用于总RNA提取(主要是动物总RNA提取)的著名产品,具有广大的客户群。但其缺点之一是一直没有柱式升级产品,客户仍然要使用既繁琐又费事的非柱式操作(另一缺点是不能用于富含多糖和多酚的材料)为解决此问题,我们特推出本产品,其操作流程如下:
产品特点:1. RNA 质量更好,因为操作简短减少了RNA在提取过程中的降解。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在 1.9以上,比经典 TRIzol法得到的更纯。
3. 专门的洗涤条件能有效去除基因组 DNA,进一步减少其对 RNA的污染。
4.适用于其他基于酸酚/ 异硫*酸胍提取原理的RNA提取产品,包括TRIzol、TRIzol LS、TRI Reagent等。
5.可以省略*仿处理步骤,避免接触有毒试剂(但效果稍差)。
6.跟TRIzol 结合使用,把经典操作变成了柱式操作,简化了实验流程,用户可以节约30分钟的时间。
产品组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 50ml |
硅胶膜离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
RNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用及效果:
使用方法:1. 按 TRIzol的使用说明书进行总 RNA提取到加*仿之前一步。
2. 如果需要加*仿,则继续按TRIzol的使用说明书操作,用*仿处理裂解液离心后得到上清液。如果省略*仿处理步骤,则需要将裂解物直接离心。
3. 将经过*仿处理得到的上清液或没有经过*仿处理直接离心得到的裂解液转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:如果是经过*仿处理,则离心后,下层有机相和中间层将含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
4. 加入等体积的溶液A,颠倒混匀 30秒。
5. 根据混合物的多少,一次或分两次转移到离心吸附柱中。
6. 每次转移后,需要13000-15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
7. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品OD260/280 比值不高,可以再用0.3mL 通用洗柱液重复此步一次。
8.室温离心半分钟。此步对去除残留通用洗柱液十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的质量和使用。
9. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μl RNA 洗脱液。
10.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
11. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
12. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
13. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如我公司的RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的说明书进行操作。
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我公司生产供应销*(代"售")的细胞及免疫学正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购茜素红S染色试剂盒北京现货促销。
温馨提示:不可用于临床ZL。