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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒优惠价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒优惠价
英文名:β-galactosidase Assay Kit
规格:24样
产地:国产|进口
编号:BTN130599
品Pai:百奥莱博
本产品是分光光度法测定β-GAL活力的,测定原理为β-GAL分解对-硝基*(代"*")-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基*(代"*")酚,后者在400nm有ZD吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。
β-半乳糖苷酶广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β半乳糖苷化合物中的β半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
酶提取液 | 50ml |
溶液A | 粉剂1瓶 |
溶液B | 15ml |
溶液C | 50ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃保存,其中试剂A需-20℃保存,有效期半年。
使用方法:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
一、酶液提取
1.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):酶提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL酶提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200 W,超声3秒,间隔10秒,重复30次);15000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
2.组织:按照组织质量(g):酶提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1 g组织,加入1mL酶提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
二、 测定操作步骤
1.分光光度计预热30分钟以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2.取出试剂A,临用前向试剂瓶中加入5mL蒸馏水,充分溶解备用,制备成溶液A工作液(用不完的溶液A仍需-20℃保存)。
3.样本测定(在EP管中依次加入下列试剂):
试剂名称 | 对照管(μl) | 测定管(μl) |
样本 | 50 | 50 |
蒸馏水 | 200 | 0 |
溶液A工作液 | 0 | 200 |
溶液B | 250 | 250 |
迅速混匀,放入37℃准确水浴30分钟 |
溶液C | 1000 | 1000 |
充分混匀,400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。 |
三、酶活性计算公式
标准条件下测定的回归方程为y=0.00543x -0.0027;x为标准品浓度(nmol/mL),y为吸光值。
注:V反总:反应总体积,0.5mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入酶提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万;T:反应时间,30分钟。
1.按照样本蛋白浓度计算:
酶
活性定义:每mg 组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷Cpr
如果需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
2.按照样本鲜重计算:
酶
活性定义:每g组织每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/g鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷W
3.按细菌或细胞密度计算:
酶
活性定义:每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol 对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/104cell)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样总)÷T=0.123×(ΔA +0.0027)
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更多有关
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·丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(49.5%T,3%C)
编号:BTN160802
规格:300mL
·大肠杆菌Rosetta感受态细胞
编号:BTN140379
英文名称:E.coli Rosetta Competent Cell
规格:10*100μl
本产品为采用大肠杆菌Rosetta菌株经特殊工艺处理得到的大肠杆菌化学感受态细胞,具有*霉素抗性,补充大肠杆菌缺乏的6 种稀有密码子(AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA)对应的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系统中的表达水平,经 pUC19质粒检测转化效率高达 109cfu/μg。
基因型:F- omp T hsd SB(rB- mB-)gal dcm pRARE(CamR)
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
·5M异硫*酸胍溶液
编号:BTN100902
英文名称:E.coli Rosetta Competent Cell
规格:250mL
本产品为采用大肠杆菌Rosetta菌株经特殊工艺处理得到的大肠杆菌化学感受态细胞,具有*霉素抗性,补充大肠杆菌缺乏的6 种稀有密码子(AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA)对应的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系统中的表达水平,经 pUC19质粒检测转化效率高达 109cfu/μg。
基因型:F- omp T hsd SB(rB- mB-)gal dcm pRARE(CamR)
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
·三合一RNA上样液(B型,6X)
编号:BTN3130B
英文名称:RNA Loading Buffer
规格:1.5mL
本品是集RNA变性RNA、上样、RNA染色三种功能于一体的即用型溶液。
产品特点:1.能提高RNA上样速度,免去繁琐的准备步骤,减少污染。
2.其含有的RNaseYZ剂能YZRNA样品中残留RNase的活性,保证电泳过程中RNA的完整性。
3.所含甘油和染料(仅BTN3130A含EB染料),便于直接上样和UV观察RNA电泳条带,免去染色和脱色过程。
4.本产品与DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2完全兼容。
产品组成: 成分 | 规格 |
三合一RNA上样液 | 1.5ml |
说明书 | 1份 |
本产品为红色液体,含红色的EB(*化乙锭),有致癌性,避免用手直接接触。
另一红色电泳示踪剂的电泳速度相当于50nt的RNA。
储存条件:常温运输,4℃(短期)或-20℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 按1:1-1:3的比例将RNA样品与RNA上样液混合(如5μL RNA+15μL RNA上样液)。
2. 65-85℃水浴保温10分钟,。
3. 冰浴5分钟后即可直接上样电泳。
注:本产品含EB,所以琼脂糖凝胶中可以不必再加EB。本产品与甲醛琼脂糖变性凝胶或用DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2配制的非变性琼脂糖变性凝胶兼容。
4.电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果,RNA 条带成红色。
疑难解答:Q:为何RNA样品在甲醛变性胶中的电泳效果比普通非变性胶差?
A:这是因为在非变性胶中,即使内部有切口的RNA分子(实际已经是两条RNA分子)也会通过形成发夹结构而跟完整的分子等速电泳,而在变性胶中,完整RNA分子和内部有切口的RNA分子将以不同的速度泳动,所以变性胶看起来效果不好是反应了真实情况,非变性胶看起来好只是一种假象。要求严格的实验(如CDNA文库构建)还是使用甲醛变性胶判断RNA的质量好坏。
北京现货β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒优惠价关键词:β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒,β-galactosidase Assay Kit,BTN130599
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·96孔板血液DNA提取试剂盒(真空法)
编号:BTN131194
英文名称:96 Microwell Plate Blood DNA Extraction Kit
规格:1次
·即用型荧光定量RT-PCR试剂盒
编号:BTN101219
英文名称:Instant Realtime RT-PCR Kit
规格:50次
本产品是基于荧光染料检测的即用型双酶一管式RT-PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量RT-PCR分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、MMLV-Taq DNA聚合酶混合物、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有一管式实时定量RT-PCR所需要的成分,用户只需加入RNA模板和引物即可进行实时定量RT-PCR反应,具有广泛的用途。
产品特点:1.一管式完成qRT-PCR反应,避免样品交叉污染,尤其适合临床应用。
2. 即开即用,用户不需要单独准备qRT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个(RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix),将加样步骤减少到ZD,极大降低了加样误差,增加了可重复性。
4. 使用范围广,适用于从病毒RNA到人RNA的各种RNA模板。
5.高灵敏度,每个RT-PCR体系ZD可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的最长达2000nt。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
双酶一管式qRT-PCR Buffer,2× | 750μl |
MMLV-Taq Mix | 100μl |
RNase-free水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:1.在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分(下面只列出样品管的设置情况,用户可自己根据需要设置阳性和阴性对照):
成分 | 样品 |
自备RNA模板(分下面三种情况) | 见下 |
总RNA | 100-500ng |
或poly(A)mRNA | 10-500ng |
或体外转录得到的专一RNA | 0.01pg-500ng |
RNA特异性引物一(自备) | 终浓度300nM(注1) |
RNA特异性引物二(自备) | 终浓度300nM |
RNase-free水 | 补到10μL |
双酶一管式qRT-PCR Buffer(2×) | 15μl |
自备ROX(某些荧光PCR机型需要) | 3μL(注2) |
MMLV-Taq Mix | 2μl |
注1:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM范围内调整引物浓度。引物、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减RNase-free水用量,保证总反应体积不变即可。
注2:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的ZJ浓度为1×(即在每30μl反应体系中加3μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的ZJ浓度为0.05-0.1×(每30μL反应体系加0.3μL 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入3μL 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR仪中进行荧光定量RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃ 30分钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm值和PCR产物长度由用户自行决定注)、ZH72℃ 5分钟。并在退火或延长步骤中记录荧光信号。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,ZD吸收光谱在471nm,结合DNA时的ZD吸收光谱在500nm,ZD发射光谱在530nm。
北京现货β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒优惠价关键词:β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒,β-galactosidase Assay Kit,BTN130599
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·胃蛋白酶YZ剂溶液(1mg/mL)
编号:BTN100835
英文名称:Pepstatin Solution
规格:1mL
木瓜蛋白酶YZ剂可以YZ木瓜蛋白酶(papain)、胰蛋白酶(trypsin)和血浆酶(plasmin)等蛋白酶活性,YZ能力是弹性蛋白酶YZ剂的100倍。木瓜蛋白酶YZ剂的分子量为677.63,易溶于水。本产品为木瓜蛋白酶YZ剂水溶液,浓度为0.5mg/mL,工作浓度为50μg/mL。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
使用方法: 将本产品加到各种裂解液中,使其终浓度为50μg/mL 即可。含有本产品的水溶液或缓冲液在2-8℃下可以稳定1周,-20℃条件下大约可稳定1个月。注意避免将产品反复冻融。低浓度的本产品稀释液应置于冰上,且只能保存1天。
具体使用含本产品的裂解液的方法,根据裂解液的不同而不同,本说明书无法提供详细流程。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/%E8%AF%95%E5%89%82%E7%9B%92%20(41).jpg)
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温馨提示:不可用于临床ZL。