特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)怎么卖是高品质的DNA纯化产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)等DNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)怎么卖
规格:4次
编号:BTN80926
产地:国产|进口
英文名:Fungus DNA Column large-scale extraction kit(Glass bead method)
品Pai:百奥莱博
本试剂盒在柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN70901)基础上改良而得大提升级产品,主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。
产品特点:
1.处理量大,一次可以处理1-3g 各种真菌组织。
2. 纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和YZ剂,得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplex PCR、RAPD、RELP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
3. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA。
4.产率一般在10-100μg/g真菌样品。离心吸附柱ZD吸附量为800μg。
5. DNA片段长度一般在20-40kb左右。
6.适用范围广,适用于度大多数真菌材料,包括酵母(S.cerevisiae、S.pomb、Pichia pastoris)等。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 40ml |
溶液B | 40ml |
溶液C | 100ml |
大提离心吸附柱 | 4套 |
通用洗柱液 | 200ml |
DNA洗脱液2.0 | 5ml |
酸洗玻璃珠,400μm | 40g |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 对菌液:取60-100mL 过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2. 对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约1 g),转移到装有20mL 无菌水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3. 对孢子材料,一般取1-3g左右,直接加入到离心管中,在材料中加入无菌水20mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
4.沉淀中加入10mL溶液A和10 克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟,可以延长震荡时间。
5. 加入10mL的溶液B,涡旋震荡5分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个50mL的干净的塑料离心管中。
6.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再第二次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。
7. 将20mL 通用洗柱液加入离心柱,12000rpm离心1分钟,弃穿透液。
8. 重复上步操作一次。
9. 12000rpm 空甩1分钟去除残留液体。
10. 将离心柱放置在一新的50mL塑料离心管中,加入500μL DNA 洗脱液2.0。
11.室温放置5分钟后12000rpm离心1分钟,管底即为真菌DNA样品,吸取离心管中的DNA溶液重新滴加在吸附柱上,离心洗脱以收集更多的DNA。
12. 所得DNA可立即使用,也可长期保存在-20℃。
13. 注:如离心机转速不能达到12000rpm,可以用ZD转速离心10-15min 代替12000rpm离心1-2min。
我公司的
柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)怎么卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·动物细胞裂解液B(变性)
编号:BTN80807B
英文名称:Animal Cell Lysis Solution(B)
规格:100mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶YZ成分,可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞,使之释放出细胞内蛋白,用于后续实验。
产品特点:1.快速裂解,多种裂解成分经过精心优化,能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能ZD程度地保留蛋白天然结构和功能,主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀,还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高,主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验,还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
注意事项:1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶YZ剂复合物,可以更有效地YZ蛋白酶活性,防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究,在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶YZ剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响,因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。
使用方法:一:
处理贴壁的培养细胞1. 去除贴壁细胞培养液,用冰浴预冷的PBS 洗两遍,去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
注意:裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1~2×106细胞)需要0.1~0.2mL本产品;25 cm2培养瓶(3~6×106细胞)需要0.3~0.6mL;75 cm2培养瓶(1~2×107细胞)需要1~2mL。对于特别大或特别小的细胞,需要用户摸索ZJ用量。
4. 冰上放置10-30分钟(ZJ时间跟细胞系相关),其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端,并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,新鲜使用。
7. 用前先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
二:
处理悬浮细胞1. 400×g,4℃离心10分钟收集悬浮细胞,弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍,步骤同DY步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品,充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞,期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀,留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,新鲜使用。
7. 使用前先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
三:
处理组织块1. 称量组织块,用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆,用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中,1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品,吹打混匀,放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次,共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,新鲜使用。
6. 使用前先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
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·血液RNA提取试剂盒
编号:BTN3071
英文名称:Blood RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒是专门从全血样品中快速提取总RNA的试剂盒,主要用于提取全血细胞的总RNA(提取血浆病毒RNA 需使用病毒RNA提取试剂盒,提取纯化后的白细胞RNA可使用动物RNA提取试剂盒)。
试剂盒特点:1. RNA 无明显降解和DNA污染,OD260/280 均在1.9以上。血液RNA的产量与动物种类和动物的状态(如有疾病与否)有很大关系,人全血产量为2-6μg/mL,兔全血产量为5-10μg/mL。
2. 操作简单,直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品,不需裂解红细胞等任何预处理步骤,整个提取过程只需要十多分钟,可以全在室温下进行。
3.处理量大,每管的样品处理量可以达到1.5mL,高于进口的同类产品。
4.与常用的抗凝剂(包括肝素,EDTA,柠檬酸*,草酸*)兼容,得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。
试剂盒组成: 成分 | 50T |
溶液A | 50ml |
溶液B | 15ml |
溶液C | 25ml |
溶液D | 25ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,溶液B和溶液C有腐蚀性。4℃保存的溶液A可能会产生白色沉淀,用前需65℃水浴加热直到沉淀溶解。有效期一年。
使用方法:1. 将0.2-1.5mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中,15000g室温离心3分钟,弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL,则需要减少血液的使用量,具体减少量需根据具体情况决定,因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。如果提取0.1mL以下的微量血液样品加入百奥莱博的微量助沉剂RNApp。
2. 将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
3. 将0.3mL的溶液B和0.2mL *仿加入离心管,剧烈震荡30秒。
4. 13000-15000g室温离心5分钟,将上清液(为无色或浅红色,约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。为防止污染,留100μl左右的上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
5. 加入0.5mL的溶液C和0.2mL的*仿到上清液中,用手上下剧烈摇晃30秒。
6. 13000-15000g室温离心3分钟,将上清液(无色,约1mL)转移到另一干净离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物(蛋白质)。可以按每次吸取100-200μl的方式分批转移。
7.在上清液中加入1/2 体积的溶液D,用手上下剧烈摇晃30秒,溶液将呈白色浑浊状。
8. 13000-15000g室温离心5-30分钟,小心移弃上清液,避免触及管底大量的白色RNA沉淀。
9.在离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡器上振荡混均30秒。室温离心13000-15000g 1分钟,RNA 此时在管底形成细小沉淀。小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
10. 重复第9 步的75%乙醇清洗步骤一次。
11. 短暂快速离心数秒使管壁上残留液体沉到管底(约50μl),用移液枪小心吸弃,注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,因为残留的乙醇会影响后续反应。
12.室温短暂放置2分钟,立即加入适量(一般为10-30μl)溶解液使RNA沉淀溶解。建议使用具有灭活残留RNase 功能的新型RNA 溶解液液相RNase Scavenger 而不要使用经典的DEPC 水。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA将变得十分难溶。RNA样品可以直接使用,也可以存放于-80℃长期保存。
疑难解答:1.有的样品在第4 步离心后有很厚的中间层,上清很少。原因是蛋白质变性不充分,可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
2.有的样品在加入溶液D离心后,沉淀上浮在液面,这是由于液体的比重大于沉淀,可以加入少量的超纯水使溶液的比重降低,直到沉淀能下去为止。也可能把下层的有机相取上来了,如果这样需要重做。
3.千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则将变得十分难溶。
4.无论使用甲醛变性胶还是非变性胶电泳时,一定要使用RNA变性/上样液(如百奥莱博的RNAload)以让RNA 充分变性,否则加样孔中会有RNA复合物(人们会误以为是DNA污染)。使用没有变性能力的DNA上样液不能使RNA 复合物分离。
5.测OD时一定要使用pH8.0的缓冲液(如TE),不要使用微酸性的DEPC水,否则OD 值会比真实的值低15-20%。
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·PAGE胶DNA柱式回收试剂盒
编号:BTN80202
英文名称:DNA column recovery kit for PAGE gel
规格:50次
聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离小片段DNA的主要方法,但是目前市场上没有专门的产品用于从聚丙*(代"烯")酰胺凝胶中回收DNA片段,本产品就是百奥莱博专门为此用途而开发的、从PAGE凝胶中回收DNA片段的试剂盒。
产品特点:1.GX,采用GX的溶液使DNA快速从PAGE中扩散出来,使回收效率50-90%(跟片段大小和胶浓度等因素有关)。
2.可回收50bp-500bp的DNA片段(如果片段长度超过5100bp,建议使用琼脂糖分离回收方法)。本产品也能回收单链DNA。
3. 操作简单,整个过程只需要离心机,不需要其他设备。
4. 纯度高,采用能专一结合DNA的硅胶膜是杂质和DNA分离,回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。
5. 储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 25ml |
溶液B | 25ml |
通用溶胶液 | 50ml |
通用洗柱液 | 50ml |
离心吸附柱 | 50套 |
DNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短期),有效期一年。
使用方法:1. 切取含DNA片段的PAGE凝胶(100mg左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入1.5mL离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
2. 按重量比为1:2的比例加入溶液A(100mg PAGE凝胶需要加入200μL溶液A)。
3. 将离心管水平放置并室温摇晃1-10个小时以让DNA从PAGE凝胶中扩散出来。如果DNA片段超过500bp,摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃,DNA扩散速度会增加。
4. 12000~15000g室温离心2分钟,将含DNA的上清液转移到新的离心管中。
5. 再用100μL的溶液A洗涤凝胶一次并与上步得到的上清合并。
6. 加入900μL通用溶胶液和0.3mL溶液B,混合均匀后将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置3分钟,然后再12000~15000g离心1分钟,倒掉收集管中的液体。
7. 加入600-800μL通用洗柱液于离心柱中。
8. 12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
9. 12000~15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
10. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入25-50μL通用洗脱液,静置3分钟。
11. 12000~15000g离心1分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)怎么卖。
温馨提示:不可用于临床ZL。