北京现货猪圆环2型单重凝胶PCR检测试剂盒(PCV-2)折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括北京现货猪圆环2型单重凝胶PCR检测试剂盒(PCV-2)折扣价在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：北京现货猪圆环2型单重凝胶PCR检测试剂盒(PCV-2)折扣价
品Pai：百奥莱博
等级：科研试剂
产地：国产|进口
编号：SYA566

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·蜡状芽孢杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA135
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·结核杆菌(TB)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA488
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
一、简介
本试剂盒用一对结核杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对结核杆菌核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途
该试剂盒适合于检测外周血等样本中结核杆菌DNA，用于结核病等疾病的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成(40T/Kit)
组份 数量 规格
TB反应液(TB-qPCR MIX) 1管 560μL/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合液(Enzymes MIX) 1管 40μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
TB阳性对照(TB-PTC) 1管 50μL/管

四、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

五、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为12个月。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
6.1.1 适用标本类型：痰、支气管灌洗液、尿、粪、脑脊液或胸、腹水，其他肺外感染可取血、相应部位分泌液或组织细胞等。
6.1.2 标本采集
6.1.2.1 组织：取发病组织约1g，置入1.5mL洁净EP管，立即送检；
6.1.2.2 血液：无菌注射器抽取外周血1-2mL注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管；
6.1.2.3 液体标本：取0.5-1mL左右，置入1.5ml洁净EP管，立即送检；
6.2 样本前处理：
6.2.1 脑脊液和胸、腹水：13000rpm离心3min沉淀集菌，去上清；
6.2.2 痰、支气管灌洗液、尿、粪等污染标本：经4%NaOH(痰和碱的比例为1:4，尿、支气管灌洗液和碱的比例为1:1)处理15min；尿标本加5%鞣酸、5%乙酸各0.5mL于锥形量筒内静置，处理后吸去上清，沉淀直接用于提取结核杆菌DNA或者经酸中和后接种培养，然后再对培养物提取DNA。
6.3 DNA提取
6.3.1 对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取4µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(TB-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(TB-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(TB-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明结核杆菌核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明结核杆菌核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行结核杆菌real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明结核杆菌核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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-EDTA脱*液   500ml
69-78-3 DTNB 5,5二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲醛
三*甲基*树脂 β-Amylase
BL0904 FITC标记羊抗马IgG抗体
PP0701 蛋白印迹膜再生液Stripping Buffer
ARB13249 小鼠雄烯二酮(ASD)Elisa定量检测 Mouse androstenedione,asd ELISA KIT
嗜热菌蛋白酶 Taurine 9073-78-3
DN2101 M13噬菌体单链基因组DNA快速提取试剂盒
D0301 脱纤维绵羊血(无菌 pet瓶装) 100ml/200ml/500ml
EDTA溶液(2%,pH7.0)   100ml
CYB162018 兔抗Avidin(卵清亲合素) 0.5ml
ARB10106 人HCV-Ag Elisa分析 
Tris-甘*酸电泳缓冲液(5×SDS-PAGE)   100ml|500ml
ARB10795 人抗心肌抗体(AMA)酶联免疫定量检测 Human anti-myocardial antibody,ama ELISA KIT
抗蛋白酶 EDTA-MgNa2 37682-72-7
2-*基-2-甲基-1,3-丙二醇 5"-ATP,Na2 115-69-5
616-91-1 N-Acety-L-Cysteine N-乙酰-L-半胱*酸
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D-色*醇 Gly-Gly-Len 52485-52-6
BTN130646 尿嘧啶-DNA糖基化酶 Uracil DNA Glycosylase(UDG)
MOPS电泳缓冲液(1×,RNase free)   500ml
ARB12670 大鼠雌二醇(E2)elisa检测说明书 Rat estradiol,e2 ELISA KIT
ARB11546 人凋亡相关半胱*酸肽酶4(CAsp4)代做ELISA实验 Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,casp4 ELISA KIT
BL0791 大鼠IgG抗原(干粉)
ARB10292 人广谱细胞角蛋白(P-CK)Elisa方法检测 Human pan-cytokeRatin,p-ck ELISA KIT
阿糖胸苷 Lipase(pocine pancreas) 605-23-2
BL1247 D2000 DNA Ladder
Quant one step qRT-PCR 
ARB10512 人白细胞介素29(IL-29)elisa测定使用说明书 Human interleukin 29,IL-29ELISA KIT
PY02-238  李氏菌选择性培养基基础(MMA)  250克  
苏木素无水乙醇溶液  5%|10% 100ml
丙*(代"酮")酸激酶 Sesamol 9001-59-6
3,4-乙*(代"烯")二氧噻*(代"吩") Adonitol 126213-50-1

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