北京重组小鼠S100A15A现货供应

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名称：北京重组小鼠S100A15A现货供应
编号：JN1559
英文名：Recombinant Mouse S100 calcium binding protein A15A
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
产地：国产|进口
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成，目的基因编码的Met1-Tyr108表达纯化得来。

S100A15A质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)

S100A15A制剂：冻干品

S100A15A保存：
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存，室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4～7℃保存2～7天，可分装后置于-20℃保存三个月。

S100A15A复溶：
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后，请根据用量分装冻存，避免反复冻融。

关于S100A15A：
Members of the S100 protein family are involved in calcium- or zinc-dependent cellular functions and regulate immune-mechanisms, cell proliferation and differentiation. Some S100 members have been established as tumor markers because they are dysregulated during carcinogenesis. Psoriasin (S100A7) and koebnerisin (S100A15) are highly homologous proteins that have been first described in psoriasis, which is characterized by disturbed epidermal maturation and chronic inflammation. Several studies showed that the coexpression of the hS100A7 and hS100A15 in psoriasis suggests that both proteins participate in keratinocyte maturation, proliferation and/or skin inflammation.

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·Pfu DNA聚合酶
编号：JN0016
英文名称：Pfu DNA Polymerase
规格：250U|250U×5
  本酶为Pyrococcus furiosus中分离的pfu DNA pol基因在大肠杆菌中进行表达后经多步纯化分离而得。Pfu DNA聚合酶具有3´→5´外 切酶(校正)活性，当聚合反应发生碱基错配时，聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。Pfu DNA聚合酶为使用范围最广的高保真DNA聚合酶，其错误率仅为1.3x10-6，推荐Pfu DNA聚合酶用于需高保真的PCR反应。

产品组成：

 

组份	JN0016-250U
Pfu DNA 聚合酶（5U/μl）	50μl
dNTP混合液(各10mM)	200μl
10×Pfu DNA Buffer with Mg2+	2ml

产品用途：用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入 突变、全基因合成，DNA片段的补平等（参见实验方案）。

使用建议：
Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3´端"A"突出，其PCR产 物的克隆有几种方案。
1、PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆 于平滑末端的载体中（参见实验方案）。
2、将产物3´末端加A后再与T载体连接（参见实验方案）。
3、引物中引入15bp与载体同源序列，利用BalbRec PCR产物一步定向无缝克隆试剂盒（Cat# JN0001）直接连接到目的载体。
由于Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3´端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3´→5´外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并ZH加入Pfu酶。

应用实例：


图例一）50μl扩增体系中，以5ngλDNA为模板，对500bp～6.0kb片段的扩增结果。
泳道1：0.5kb；泳道2：1.0kb； 泳道3：2.0kb；泳道4：3.0kb； 泳道5：4.0kb；泳道6：6.0kb 泳道M：1kb DNA Marker；

图例二） 50μl扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模板，可对特定基因片段（380bp）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；泳道M：DNA 2000 Ladder

常用反应体系（50μl）

10×Pfu Buffer	5μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)	1.0μl
模板	1-50ng（质粒）
	10ng-1μg(基因组)
Pfu	0.25μl（1.25U）
ddH2O	至50μl
*Mg2+终浓度为1.5mM

常用PCR循环：

当扩增片段<3K：

温度	时间	循环数
94℃	1分钟30秒
94℃	30秒	30次循环
57℃	30秒
72℃	根据产物长度调整，60秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温

当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：

温度	时间	循环数
94℃	20秒
94℃	5秒	30次循环
68℃	根据产物长度调整，60秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE检测纯度大于95%；PCR 方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。



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高纯度质粒小提试剂盒 
F030101 HRP标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*HRP
聚腺苷酸 α-D-Lactose monohydrate
J0308 兔抗大鼠IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
鸟苷 5-Fluorouracil 118-00-3
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