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名称:北京PCR产物平末端DNA片段加A试剂盒厂家价格
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
英文名:Flat end DNA add A tail Kit
规格:50次
本试剂盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分钟左右完成整个过程。由Pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段,如该平末端DNA片段需要和T载体相连接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。
试剂盒组分:
Taq DNA polymerase——————————50μl
10×A-tailing buffer—————————50μl
dATP Mix———————————————50μl
操作步骤:
1. 平末端PCR 产物用PCR 清洁(无非特异扩增)或者胶回收纯化(有非特异扩增)。
2. 纯化好的平末端DNA 片段按以下反应体系加A尾:
平末端DNA 片段—————————7μl(不超过1μg)
dATP Mix————————————1μl
10×A-tailing buffer——————1μl
Taq DNA polymerase———————1μl
3. 轻轻混匀后72℃保温20-30 分钟。
4. 加A 尾的产物可以不需要再次清洁或者胶回收纯化,可直接用于连接反应。
储存条件:-20℃。
本品别名:DNA加A尾试剂盒 |PCR产物平末端DNA片段加A试剂盒
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·高保真PCR MasterMix
编号:ALH211
英文名称:2×KOD PCR MasterMix
规格:1ml
本品用于PCR,尤其用于PCR产物的克隆,DNA片段的平滑化。是从克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的3’→ 5’外切酶活性使得其扩增保真性比Pfu DNA Polymerase更高,保真性是Taq的约50 倍,同时具有合成速度快的特点,聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase 的5倍,Taq DNA Polymerase 的2倍,达到100-138bp/秒,可以在短时间内获得高产量的扩增产物,特别适合于高保真地扩增6kb以内的PCR产物,扩增所得的DNA为平末端,可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。本产品包含KOD DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可ZD限度的减少人为误差。本产品使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×KOD PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。
单位定义:75℃活性测定条件下,在30min内摄入10nmol的dNTPs 使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义为1U。
储存条件:-20℃。
·植物直接PCR试剂盒(无需提取DNA)
编号:ALH207
英文名称:Plant direct PCR Kit (without extraction of DNA)
规格:100次|500次
本试剂盒采用独特的裂解缓冲液快速裂解植物组织,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐YZ物的2×Direct PCR Mix扩增,扩增产物可直接上样电泳。适用于简单非多糖、多酚植物。操作简单,高通量筛选;一般扩增大小<2kb。
试剂盒组分(100次):
Stock A——————————0.5ml
Stock B——————————1ml
Buffer N-—————————5ml
2 × Direct PCR Mix————1ml
双蒸水(PCR级)———————10ml
注意事项:
1. 如果扩增条带较弱,可以适当增加减少模板加入量,裂解混合物模板一般可以在0.5μl-2μl内调节,但是注意一般不能超过4μl,加入太多,反而YZPCR反应。
2. 如果样品多酚多糖较多,扩增效果不理想,可在20 μl PCR反应体系加入2μl 10%PVP40改善效果。
3. 如果非特异扩增较多,可调整退火温度,或者适当增减模板用量。
4. 各溶液使用完毕后,应该立刻盖紧盖子,以免PH改变影响质量。
储存条件:-20℃。
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温馨提示:不可用于临床ZL。