北京现货细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)批发

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北京现货细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)批发由老Pai试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持，本产品用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：北京现货细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)批发
编号：ALH158
英文名：Cells/Tissue Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
品Pai：百奥莱博
规格：20次|50次
产地：国产|进口
本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder，通过选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder，ZD限度的减少了基因组DNA对凋亡DNA ladder的观察干扰，因此显著的提高了检测敏感度，反应可在微量离心管进行，2.5小时完成，快速方便；无需有机抽提，检测灵敏度极高，可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5～10×10^5 个，但投入的细胞量可在1×10^5～5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1～2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比，整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差往往造成难以准确取材，可能显著影响实验结果。但只要组织确实发生凋亡，有经验的用户也可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder

试剂盒组份(50次)：
Extraction buffer ———10ml
10%SDS—————————1ml
Enzyme A————————1ml
Enzyme B————————1ml
Precipitant ——————7ml
为保持活性方便运输，Enzyme B 客户收到时为冻干粉，收到后加500μl 灭菌水（25 次）或者1ml 灭菌水（50次）溶解后－20℃保存。Enzyme A 和Enzyme B 为酶溶液，应该避免反复冻融降低活性，如果要分多次使用，按照每次使用量分装后－20℃保存。

注意事项
1. *化乙锭染色过度将降低DNA条带检测灵敏度，可用水冲洗凝胶10～30分钟。如冲洗过头可再用*化乙锭复染。可用更灵敏的DNA染色剂SYBR Green。也可进行丙*(代"烯")酰胺DNA凝胶电泳和DNA银染。
2. 对细胞进行干预处理后，凋亡可能仅在某一时间点或某一干预强度下最为明显。需要进行预试验确定ZJ干预时间或强度。此时也可用凋亡小体/hoeschst染色试剂盒(ALH160)快速染色凋亡小体观察。
3. 推荐起始细胞量为5～10×10^5 个，但投入的细胞量可在1×10^5～5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1～2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。六孔板的一个孔相当于一个35 mm培养皿长满后可得到1～10×10^5 个细胞，如果细胞凋亡发生率为10%，经过处理可得到约1～10×10^4个凋亡细胞，应该足以获得清晰的凋亡DNA ladder。反之如果不能从＞3×10^6个细胞获得清晰的凋亡DNA ladder，表明其中凋亡细胞少于1%。此时增加细胞用量也难已奏效。
4. 从组织块提取凋亡DNA ladder。取10～20 mg组织块放入小玻璃匀浆器，加100～200μl Extraction buffer，上下手动匀浆15～20次。取出匀浆液，冰上5～10 min。振荡10秒。4500 rpm 10分钟收集上清液并转移到新1.5ml离心管，执行提取步骤3。另外一种方法是将30～50mg组织剪碎后在PBS里面匀浆，制成细胞悬液，离心收集细胞后接步骤2继续执行提取。
5. 采用高质量琼脂糖，使用宽度较小和厚度较窄的样品梳子，制作较薄的琼脂糖凝胶(厚度约2～4 mm)；用较低的电压进行慢速电泳，将显著增加凋亡DNA条带检测灵敏度。电泳距离不要太长，否则将使小的凋亡DNA条带弥散而降低分辨率。

本品别名：细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)|细胞凋亡DNA Ladder分提试剂盒|组织凋亡DNA Ladder提取试剂盒

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9007-34-5 Collgen TypeⅡ  胶原蛋白Ⅱ型(牛)
B0901 狗血清(辐照灭菌)
HC0289 Biohit单道可调半支灭菌移液器
ARB13508 鱼骨*素/骨谷*酸蛋白(OT/BGP)代做ELISA实验 Fish oste ocalcin/bone gla protein,ot/bgp ELISA KIT
F020228 兔抗绵羊IgG抗体 Rabbit Anti-Sheep IgG
299-11-6 PMS　 吩嗪硫*(代"酸")甲脂
M0106 特级牛血清白蛋白/BSA
γ-球蛋白(牛) Sodium formate 9007-83-4
PY01-169  中性红  ind  25克  
1,1-二蒽醌亚胺 Potassium tungstate 82-22-4
BL0855 兔抗狗IgG纯化抗体
ARB13556 兔子内皮抑素(ES)elisa检测操作说明书 Rabbit endostatin,es ELISA KIT
BTN130578 小鼠抗V5标签单抗 Anti V5-Tag Mouse Mab
SDS溶液(20%,pH7.2)   100ml
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ARB11005 人补体7(C7)Elisa定量检测 Human complement fragment 3c,c3c ELISA KIT
Gordon-Sweets银*溶液   100ml
3458-28-4 D-甘露糖 D-Mannose
ARB11684 人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)Elisa分析 Human glucose-6-phosphate isomerase,gpi ELISA KIT
ARB12362 大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)尿液中含量检测 Rat leptin receptor,lr/ob-r ELISA KIT
*酚碱性品红溶液(5%/0.5%)   100ml
SJ0010 人纤维连接蛋白(Fn)
甘油-3-磷酸氧化酶 Sulfatase from Helix pomatia 9046-28-0
ARB10181 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa检测说明书 Human α1-acid glycoprotein,α1-agp ELISA KIT
ARB12263 大鼠肌*蛋白T(Tn-T)elisa检测操作说明书 Rat troponin t,tn-t ELISA KIT
对甲*亚磺酸* p-Phthalaldehyde 824-79-3
甘油溶液(75%,无菌)   100ml
14375-45-2 脱落酸 Abscisic acid (ABA)
BL1168 全血基因组DNA提取试剂系统
PAGE不连续蛋白加样缓冲液(5×)   5ml
F030436 胶体金标记山羊抗猪IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Pig IgG*GOLD
ARB11184 人视黄酸诱导基因/RIG-1样受体(RLR)酶免分析 Human retinoic acid inducible gene/rig-like receptor,rlr-9 ELISA KIT
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·石蜡包埋组织miRNA提取试剂盒
编号：ALH074
英文名称：Paraffin Embedded Tissues microRNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒用于快速从固定、石蜡包埋组织样品中提取RNA包括microRNA。独特的裂解液/蛋白酶K迅速裂解细胞释放出RNA，然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， ZH低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。得到的RNA可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。

产品组分：
裂解液——————15ml
结合液——————25 ml
漂洗液——————10ml
蛋白酶K——————20mg（可选）
RNase-free H2O——————10ml
基因组DNA清除柱和收集管——————50套
RNA吸附柱和收集管室温——————50套

产品特点：
1.完全不使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速，简捷，单个样品RNA提取操作一般可在1小时内完成。
3.试剂盒的独特基因组清除柱和配方确保有效清除基因组DNA残留，一般情况下得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保RNA高纯度，可直接用于下游各种实验。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量JD不要超过基因组DNA清除柱和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如不超过2个10μm厚度石蜡切片。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液PKD、结合液RBC中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA提取过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）
5. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（DNase 消化也无法做到100%无残留），本试剂盒采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术，绝大多数DNA 已经被清除，可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
6. RNA 纯度及浓度检测：
完整性： RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于石蜡包埋组织固定和包埋过程中一般由于RNA 与蛋白反应交联会导致RNA 断裂或者降解，一般电泳后UV下只能看到模糊弥散（smear）带型，随着储存的时间越长，降解断裂越严重，甚至只能看到峰值仅仅在100bp 左右的模糊条带。这都属于RNA 提取正常情况。
纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的参考指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA不纯。
浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40。

储存条件：室温，有效期9个月。

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