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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")增强型CCK-8试剂盒 细胞凋亡与增殖,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:增强型CCK-8试剂盒 细胞凋亡与增殖
规格:100次|500次|2500次|10000次
产地:国产|进口
编号:YT128
英文名:Enhanced Cell Counting Kit-8
品Pai:百奥莱博
本试剂盒是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒,比普通的CCK-8试剂盒具有更好的检测灵敏度和更宽的线性范围。
WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱*酶还原生成橙黄色的formazan(参考图1)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
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WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体内的一些脱*酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽,灵敏度更高。
WST-8和WST-1相比,检测灵敏度更高,更易溶解,并且更加稳定。
本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长YZ检测。
本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的增强型CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
WST-8对细胞无明显毒性。加入增强型CCK-8溶液显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到ZJ测定时间。
注意事项:
1. 由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发问题。一方面,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加相同量的PBS、水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
2. 本试剂盒的检测依赖于脱*酶催化的反应,所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测,如果待检测体系中存在较多的还原剂,需设法去除。
3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。
储存条件:4℃避光,有效期一年。
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增强型CCK-8试剂盒 细胞凋亡与增殖关键词:YT128,增强型CCK-8试剂盒,Enhanced Cell Counting Kit-8
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·总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)
编号:YT312
英文名称:Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method
规格:100次
本试剂盒是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma(FRAP)方法,可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。本试剂盒可以检测100个样品。
试剂盒组份:
TPTZ稀释液——————15ml
TPTZ溶液———————1.5ml
检测缓冲液——————1.5ml
FeSO4•7H2O——————200mg
Trolox溶液 (10mM)———0.1ml
活性氧ROS主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化*。在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧,同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。活性氧产生后,可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤,诱发氧化应激(Oxidative stress),继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及神经系统疾病等。
机体中存在多种抗氧化物,包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等,可以清除体内产生的各种活性氧,以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液,细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。
植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱,可以用于筛选强抗氧化能力的药物。
FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tripyridyltriazine(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ,随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。由于反应在酸性条件下进行,可以YZ内源性的一些干扰因素。并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10μM,因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰FRAP法的检测反应。由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的,样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显著影响检测反应。
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本试剂盒提供了抗氧化物Trolox作为对照。Trolox是一种维生素E的类似物,水溶性较好,抗氧化能力和维生素E相近。本试剂盒方便快捷,加入待测样品后3-5分钟即可进行吸光度测定,通常10-20个样品可以在十多分钟内检测完毕。
注意事项:
1. 在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂会对本试剂盒的检测产生干扰,需尽量避免。
2. 如果样品中含有外加的较高浓度的铁盐或亚铁盐,会干扰测定。但血浆、血清、细胞或组织裂解液等样品中含有的微量的铁盐或亚铁盐不会干扰测定。
3. 样品中不能添加DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的物质,也不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂。
4. 测定时需可以测定A593的酶标仪一台(测585-605nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。
5. TPTZ对人体有刺激性,请注意适当防护。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
增强型CCK-8试剂盒 细胞凋亡与增殖关键词:YT128,增强型CCK-8试剂盒,Enhanced Cell Counting Kit-8
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·DH5α甘油菌
编号:YT025
英文名称:E.coli DH5α
规格:200μl
本产品是收集生长在对数期的DH5α菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。DH5α常用于质粒扩增和质粒构建。
注意事项:
1. 使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。
2. 为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色,10X)
编号:YT187
英文名称:EMSA/Gel-Shift Loading Buffer
规格:200次
本品不含*酚蓝。如果觉得使用无色的上样缓冲液上样非常困难,可以使用含*酚蓝的EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(蓝色,10X)。每个包装的EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(无色,10X)足够进行200个EMSA上样。
通过EMSA,也称gel-shift,可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况,从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(无色,10X)可以用于EMSA研究时细胞核蛋白或纯化的转录因子和特定的双链寡核苷酸的结合反应后的上样。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·C端His标签融合蛋白质粒
编号:YT471
英文名称:C-His plasmid(with CMV promoter)
规格:1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和His tag(His标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以GX启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5"端含有一个可以编码His标签的序列,因此可以表达出含有His标签的融合蛋白,可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
multiple cloning site | 680-740 |
c-His tag | 741-758 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 811-832 |
SV40 polyA signal | 844-1227 |
f1 origin of ss-DNA replication | 1365-1669 |
bla promoter | 1694-1818 |
SV40 promoter | 1838-2176 |
neomycin/kanamycin resistance ORF | 2211-3002 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3003-3461 |
pUC origin | 3590-4257 |
本质粒的图谱如下:
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使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
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温馨提示:不可用于临床ZL。