立氏立克次体/莫氏立克次体双重荧光PCR检测试剂盒现货价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博生产销*(代"售")的立氏立克次体/莫氏立克次体双重荧光PCR检测试剂盒现货价格，是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品，欢迎的您垂询订购。

名称：立氏立克次体/莫氏立克次体双重荧光PCR检测试剂盒现货价格
品Pai：百奥莱博
等级：科研试剂
编号：SYA139
产地：国产|进口

我公司的立氏立克次体/莫氏立克次体双重荧光PCR检测试剂盒现货价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
ARB12303 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)Elisa方法检测 Rat anti-glucoprotein 210,gp210 ELISA KIT
HC0202 细胞过滤筛
HC0037 黑色细胞培养板 20块/包 (平底)
PY02-405  DTM培养基基础  250克  
ARB10556 人对氧磷酶(PON)含量分析 Human paraoxonase,pon ELISA KIT
ARB11219 人细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)检测服务 Human cytokeRatin 18-m65,ck 18-m65ELISA KIT
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SJ0790 酒石酸
BL1142 支原体检测试剂盒
ARB12040 大鼠乙酰胆碱(Ach)定量分析 Rat acetylcholine,ach ELISA KIT
L-正亮*酸 DL-Tyrosine 327-57-1
DEPC水 β-Naphthoflavone
CYB163061 兔抗羊IgG-FITC
依来铬"青"蓝R D-Prolinamide 3564-18-9
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ARB10400 人可溶性肿瘤坏死因子-1(sTNF-1)elisa检测说明书 Human soluble tumor necrosis factor1,stnf-1 ELISA KIT
ARB14060 鲑鱼补体蛋白3(C3)检测服务 Fish c3 ELISA KIT
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·禽流感H5病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA155
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·转基因植物35S启动子单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA276
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪流感病毒N2亚型(SIV-N2)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA457
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·布鲁氏菌(BS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA498
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·立克次体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA131
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对立克次体特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对立克次体的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测全血等样本中的立克次体，用于立克次体感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50μL，加入100μL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明立克次体核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明立克次体核酸阴性。
（3） 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行立克次体qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明立克次体核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·鸡肠炎沙门氏菌(SPP.E)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA544
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鲤春病毒血症(SVC)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA510
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·A组链球菌/金黄色葡萄球菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA054
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·小反刍兽疫病毒(PPRV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA575
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·麻疹病毒/风疹病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA250
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·霍乱弧菌毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA076
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·大肠杆菌O104/O157双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA106
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·沙门菌/志贺菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA096
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·嗜肺军团菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA045
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·大肠杆菌致贺毒素黏附抹平因子(Eae)/溶血素(Hly)双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA108
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽流感H5病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA155
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肠出血性大肠杆菌(O157)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA080
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适用于增菌培养物、疑似病料及食品中大肠杆菌O157的检测，其检测结果仅供参考。

出血性大肠杆菌(EHEC O157)可引起人的出血性腹泻和肠炎的大肠埃希氏菌，引发人类、家畜以及野生禽兽不同形式的疾病。本方法为荧光PCR检测方法，反应在同一管内连续进行，操作简单，并有效防止了污染，能对样品中或预培养液中的大肠杆菌O157进行快速检测，具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。O157的探针报告基团为FAM，淬灭基团为None。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
大肠杆菌O157荧光qPCR反应液(O157-qPCR MIX)	1管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(O157-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃以下，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
➤食品样品：样品的采集与预培养按照《食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验 (GB/T 4789.36-2008) 要求进行。
➤粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。

二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
➤液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：建议采用相关标准方法进行前增菌，并按照液体培养物方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(O157-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	15µL	N×15µL

向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(O157-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(O157-PTC)：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明O157核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明O157核酸阴性。
➤如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行O157 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明O157核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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