北京实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)价格

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北京实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：北京实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)价格
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：BaldStar TaqMan Mixture(Low ROX)
规格：5ml
编号：WE0145
  本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等，适用于不同类型探针法荧光定量。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新GX热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围，对目的基因定量更准确。适用于无需ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0144)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0145)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0146)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

 

组份	WE0144-5ml	WE0145-5ml	WE0146-5ml
2×BaldStar TaqMan Mixture	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1．使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2．避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar Taq Man Mixture	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定ZJ的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反应程序：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

两步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	1 min

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

更多有关北京实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)价格的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
BTN120401 热启动Taq DNA聚合酶 Hot Start Taq DNA Polymerase
PY04-062  两性霉素B及头孢霉素混合液  1ml/支×10支  每支添加于100mlCamp-BAP琼脂培养基基础中，用于弯曲杆菌选择性分离培养
7647-14-5 Sodium Chloride  *化*
1239-45-8 *化乙锭 Ethidium Brmide
BTN130628 Lambda核酸外切酶 Lambda Exonulease
一*化碘 PNPG 7790-99-0
BL0920 RBITC标记兔抗人IgM抗体
ARB13224 小鼠脱*表雄酮(DHEA)血清中含量检测 Mouse dehydroepiandrosterone,dhea ELISA KIT
ARB13687 兔色素上皮衍生因子(PEDF)酶免分析 Rabbit pigment epithelium-derived factor,pedf ELISA KIT
1-乙基-3-(3-二甲*丙基)碳二亚胺盐*(代"酸")盐 D-Arginine 25952-53-8
Nα-FMOC-Nω-PBF-L-精*酸 BOC-Leu-Gly-Arg?Pna?HC1 154445-77-9
ARB13800 豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)酶联免疫定量检测 Guinea pig immunoglobulin g2,igg2 ELISA KIT
N-乙酰-L-亮*酸 5-HT 1188-21-2
F010101 小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg
BTN130424 SP交换介质 SP Medium
PY02-029  碱性蛋白胨水  250克  
ARB11791 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)Elisa定量检测 Human basic fibroblast growth factor,bfgf ELISA KIT
对羟基*乙*(代"胺") Glucose Dehydrogenase 51-67-2
植酸* BCA 14306-25-3
1772-03-8 D-*基半乳糖 D(+)Galactosamine hydrochloride
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·抗His标签多克隆抗体
编号：WE0351
英文名称：Anti His-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
规格：20μl|100μl
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签，而不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。

抗体类型：亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原：人工合成多肽
应用范围：WB(1：1000-5000)、ELISA(1：1000-20000)

·FITC标记驴抗山羊IgG(H+L)
编号：WE0364
英文名称：Donkey Anti-Goat IgG, FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的驴抗体，特异识别山羊IgG，检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。FITC即硫*酸荧光素，为一种常用荧光染料，常用于免疫荧光和流式细胞检测等多标记检测。经本荧光抗体染色的标本，在荧光显微镜下观察呈现明亮的绿色荧光。

免疫原：山羊IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)


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·高保真多重PCR Mix(下一代测序用)
编号：WE0125
英文名称：HiFi PCR Mix for NGS
规格：1ml|5ml
  本品是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系，具有高保真性、高延伸性、低偏好性的特点，对复杂的DNA模板(如高GC含量模板)有均衡的扩增效率，特别适合于二代建库中多重PCR的扩增。

本品所含的GX热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，扩增范围更广泛。本产品有效提升了基因组中高GC或高AT区域的扩增效率，降低扩增偏好性从而提高测序覆盖度。

产品组成：

组份	1ml	5ml
2×HiFi PCR Mix	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意事项：
1、该产品不适用于有修饰的引物。
2、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
3、避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系
2×HiFi PCR Mix	25μl
Primer Pool	0.1 -0.3μM
DNA or cfDNA	5ng-100ng
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	2 min
变性	98℃	20 s	30-40 个循环
退火延伸	65℃	90 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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