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北京百奥莱博专业生产供应北京HRP标记抗His标签单克隆抗体大量库存促销,我公司销*(代"售")全品类的抗体抗原,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京HRP标记抗His标签单克隆抗体大量库存促销
规格:100μl
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
英文名:HRP Conjugated Anti His-Tag Mouse Monoclonal Antibody
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:鼠IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:500-3000)、ELISA(1:1000-20000)
我公司的北京HRP标记抗His标签单克隆抗体大量库存促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·IPTG溶液(50mg/ml)
编号:WE0219
英文名称:IPTG Solution(50mg/ml)
规格:5ml
·柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)
编号:WE0175
英文名称:Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
规格:50次|200次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、淋巴细胞、无细胞体液等样本中提取总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA及病毒DNA。本品可以处理0.1-1ml的全血,ZG得率可达30μg,可纯化获得大小为100 bp到50 kb的DNA,纯化的DNA产量高、质量好,ZD限度去除蛋白、色素、脂类及其他YZ性杂质污染,可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 | 200次 |
Buffer RCL | 125ml | 2×260ml |
Buffer GR | 15ml | 50ml |
Buffer GL | 15ml | 50ml |
Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 50ml |
Buffer GE | 15ml | 60ml |
蛋白酶K | 12.5 mg | 50 mg |
蛋白酶K 储存液 | 1.25ml | 5ml |
吸附柱 DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点1、纯度高:提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大:可从0.1-1.0ml的全血中提取基因组DNA。
3、兼容性强:适用于处理各种抗凝血液和细胞样本。
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、本试剂盒最多可以提取0.1-1ml全血样品或1×107个白细胞。
4、DY次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴孵育重新溶解。
6、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。
操作步骤:
1、样品处理:
1.1、提取200 ul血液样品时,向离心管(自备)中加入样本后,可直接进行下一步实验。
1.2、当血液样本量小于200μl时,加入Buffer GR补足至200μl,再进行下一步实验。
1.3、当血液样本量超过200μl时,加入1~2.5倍体积的Buffer RCL,轻轻涡旋或颠倒混匀,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,小心吸弃上清液,如果沉淀中还有红色,可以重复以上步骤一次。然后向沉淀中加入200μl Buffer GR,震荡至彻底混匀,再进行下一步实验。
1.4、如果处理血液样本为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血,其红细胞为有核细胞,血液样本量为5-20μl,可加入Buffer GR,补足至200μl后进行后续实验。
注意:如果下游试验对RNA敏感,可加入4μl RNase A(100mg/ml)溶液,震荡15秒,室温放置5分钟。RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
2、向以上溶液中加入20μl 蛋白酶K ,混匀。
3、加入200μl Buffer GL,震荡至彻底混匀。
注意:不要将蛋白酶K 和Buffer GL进行预混。
4、56℃孵育10分钟,其间颠倒混匀数次。
注意:孵育10分钟DNA的产量已经达到ZD,继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、加入200μl无水乙醇,颠倒混匀数次。短暂离心,使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组,建议重复步骤7。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)如果要提高DNA的终浓度,可以将所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1 分钟。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京HRP标记抗His标签单克隆抗体大量库存促销关键词:HRP标记抗His标签单克隆抗体,WE0335,小鼠抗重组His标签,HRP标记重组His标签抗体
·快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料)
编号:WE0142
英文名称:BaFaSYBR Mixture(Low ROX)
规格:5ml
本品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品所含荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA相结合,使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活仅需在95℃孵育20s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟,大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,有效YZ了非特异产物的产生,并显著提高PCR的扩增效率。该产品应用范围广,适用于普通和快速定量PCR程序,可适用于无需ROX校正的所有荧光定量PCR仪。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0141):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0142):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0143):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成: 组份 | WE0141-5ml | WE0142-5ml | WE0143-5ml |
2×BaFaSYBR Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
50×Low ROX | - | 200μl | - |
50×High ROX | - | - | 200μl |
ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有荧光染料SYBR Green I,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系: 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
2×BaFaSYBR Mixture | 25μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Template DNA | 2μl | |
50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
ddH2O | up to 50μl | |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定ZJ的模板使用量。
3)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX.
2、PCR反应条件: 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 20 s | |
变性 | 95℃ | 3 s | 35-40个循环 |
退火/延伸 | 60℃ | 30 s |
融解曲线分析 | 95℃ | 15 s | |
60℃ | 1 min | |
95℃ | 15 s | |
60℃ | 15 s | |
注意:
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、20s条件下实现酶的活化。在此条件下,大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板,可将预变性时间延长至1分钟,以使起始模板充分解链。若高温处理时间过长,会对酶的活性造成影响。可根据模板情况确定ZJ的预变性时间。
2)建议采用两步法PCR反应程序,退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定,本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
北京HRP标记抗His标签单克隆抗体大量库存促销关键词:HRP标记抗His标签单克隆抗体,WE0335,小鼠抗重组His标签,HRP标记重组His标签抗体
BTN120201 超敏化学发光(HRP)检测试剂盒 Ultrasensitive ECL Kit
ARB13056 小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)尿液中含量检测 Mouse transferrin receptor,tfr ELISA KIT
F030504 FITC标记小鼠抗HIS抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*FITC
BL1218 亮绿SF染色液(1%)
F020230 山羊抗猪IgG抗体 Goat Anti-Pig IgG
ARB12861 小鼠心肌营养素1(CT-1)定量分析 Mouse cardiotrophln 1,ct-1 ELISA KIT
ARB12831 小鼠己糖激酶(HK)elisa检测操作说明书 Mouse hexokinase,hk ELISA KIT
ARB10941 人低密度脂蛋白受体(LDLR)代做ELISA实验 Human very low density lipoprotein receptor,vldlr ELISA KIT
BL0800 人血清IgA抗原(液体)70-80%纯度
BTN81103 一站式真菌mRNAOUT One-Stop Fungal mRNA Isolation Kit
BTN100204 一站式PCR-SSCP套装 One-Stop PCR-SSCP Pack
BL1378 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(PH=8.8)
ARB13668 兔白细胞介素1β(IL-1β)免费代测 Rabbit interleukin 1β,IL-1βELISA KIT
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京HRP标记抗His标签单克隆抗体大量库存促销。