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40%丙稀酰胺溶液(37.5:1)优惠价是高品质的蛋白质研究产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多40%丙稀酰胺溶液(37.5:1)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:40%丙稀酰胺溶液(37.5:1)优惠价
规格:100ml
英文名:40% Acylamide Solution(37.5:1)
编号:RFT069
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
40%丙稀酰胺(37.5:1)即为含40% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的质量比例为37.5:1。常用于配制丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白的分离。
储存条件:4℃,避光。
我公司的40%丙稀酰胺溶液(37.5:1)优惠价,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·动物组织细胞DNA提取试剂盒
编号:RFT035
英文名称:Animal tissue cell DNA Extraction Kit
规格:50次|100次
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,能提取多种细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以GX、专一吸附DNA,可ZD限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
提取效率:
动物细胞培养液(样本量10^6~10^7):5~30 μg
动物组织(样本量30mg):10~30μg
试剂盒组分;
组份 | 50次 | 100次 | 贮存方式 |
缓冲液GA | 15 ml | 30 ml | 室温 |
缓冲液GB | 15 ml | 30 ml | 室温 |
去蛋白液GD(浓缩液) | 18 ml | 36 ml | 室温 |
漂洗液PW(浓缩液) | 25 ml | 25ml | 室温 |
洗脱缓冲液EB | 15 ml | 15 ml | 室温 |
蛋白酶K(20 mg/ml) | 1ml | 2×1ml | -20℃ |
RNase A(10 mg/ml) | 0.5 ml | 1 ml | -20℃ |
吸附柱CG | 50个 | 100个 | 室温 |
收集管(2 ml) | 50个 | 100个 | 室温 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
准备工作:
1. 准备55℃和70℃水浴;无水乙醇;1.5ml灭菌离心管。
2. 按照标签所示在去蛋白液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3. 每次使用前请检查缓冲液GA,缓冲液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
操作步骤:
如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、处理材料:
a. 培养细胞:贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液(如用PBS缓冲液或类似缓冲液),10,000 g离心1分钟,倒尽上清,加入200μl缓冲液GA,振荡至彻底悬浮。
b. 组织:取约30mg动物组织(脾组织用量应少于10 mg)加入到事先盛有200μl 缓冲液GA的1.5ml离心管中,用研磨杵彻底将组织研碎。
2、加入20μl蛋白酶K (20 mg/ml)溶液。
a. 提取细胞基因组时,加入蛋白酶K混匀后,55℃放置5-10分钟。
b. 提取组织基因组时,加入蛋白酶K混匀后,在55℃放置,直至组织溶解。
注:不同组织裂解时间不同,通常需1-3小时即可完成(鼠尾需要消化过夜),期间间歇颠倒混匀样品。
3、加入10μl RNaseA(10 mg/ml)溶液,混匀后室温放置2分钟。
4、加入220μl缓冲液GB,充分颠倒混匀,70℃放置10分钟,溶液应变清亮,简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注:加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置一段时间后会消失。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,会影响DNA的纯度和得率,而且可能导致步骤6中离心柱堵塞。
5、加入220μl 无水乙醇,颠倒混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注:加入乙醇后会产生絮状沉淀,可用枪头反复抽打1-2次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理,容易导致步骤6中离心柱的堵塞。
6、将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),11000g离心2分钟,倒掉废液,吸附柱CG放回收集管中。
注:如果出现吸附柱堵塞现象,可将离心时间延长到5分钟。
7、向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),11000g离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
8、向吸附柱CG中加入700μl 漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),11000g离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
9、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),11000g离心1分钟,倒掉废液。
10、将吸附柱CG放回废液收集管中,11000g离心2分钟。
注:此步骤非常重要,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
11、将吸附柱CG转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加100μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,11000g离心2分钟。
注意:
a.洗脱缓冲液体积不少于100μl,体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
12、DNA产物-20℃保存。
储存条件:室温,有效期12个月。
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·快速银染试剂盒
编号:RFT055
英文名称:Fast Silver Stain Kit
规格:25次
本快速银染试剂盒是一种快速简单、可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染的试剂盒。本试剂盒也可以用于2D凝胶的银染,并且染色后兼容后续的质谱检测。本试剂盒只需约90分钟内可以完成凝胶的银染。对于BSA蛋白,检测灵敏度可以达到0.3ng蛋白。本试剂盒可足够用于25块常规的8×10cm凝胶的银染。
试剂盒组成:
组份 | 规格 | 贮存 |
银染增敏液(100×) | 26 ml | 常温 |
银溶液(100×) | 26 ml | 常温,避光 |
银染基本显色液(10×) | 250 ml | 常温 |
银染显色加速液(2000×) | 1.5 ml | 常温,避光 |
银染终止液(20×) | 125 ml | 常温 |
注意事项:
1、由于银染非常灵敏,操作时请注意尽量使用高纯度的水,并确保所使用的器皿非常清洁,使用洁净的玻璃器皿。操作时必须戴手套,避免皮肤和凝胶直接接触。
2、需自备乙醇、冰醋酸及MilliQ级纯水或双蒸水。
3、下述使用说明中各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶,各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大,对于更厚的凝胶,作用时间需按照厚度的比例适当延长。
4、本说明书所指的常温温为20-25℃,操作温度较低时由于溶液的扩散能力下降,各步骤需适当延长时间。
5、银染基本显色液(10×)在低温环境下可能会出现沉淀,可在30-37℃水浴中溶解,并充分混匀后使用。
储存条件:室温,有效期12个月。
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·蛋白酶YZ剂混合物(100×)
编号:RFT194
英文名称:Protease inhibitor cocktail
规格:1ml|5×1ml
本品是一种通用型用于细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶YZ剂混合物(200mMAEBSF, 30μM Aprotinin, 1 mMBestatin,1.4mME64 and 1mMLeupeptin in DMSO),并提供独立包装的0.1MEDTA。EDTA为单独包装,以便选择性使用。如用于检测金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。
细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等YZ剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于常规细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶YZ剂混合物,包含了广谱的丝*酸、半胱*酸和酸性蛋白酶YZ剂以及*基肽酶YZ剂。
本产品使用便捷,通常以1:100的比例分别把蛋白酶YZ剂混合物(通用型, 100×)和0.1MEDTA(100×)加入裂解液中,即可用于常规的细胞或组织蛋白的提取,并有效YZ蛋白降解。
本产品可以有效YZ常规细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性,如丝*酸蛋白酶、*基肽酶、半胱*酸蛋白酶、苏*酸和天冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝*酸蛋白酶不可逆YZ剂,其YZ常数与PMSF和DFP的YZ常数相似,可以有效YZ胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作为PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Aprotinin是丝*酸蛋白酶的竞争性可逆YZ剂;Bestatin是*基肽酶可逆YZ剂;E64是半胱*酸蛋白酶不可逆YZ剂;Leupeptin是丝*酸和半胱*酸蛋白酶可逆YZ剂;EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆YZ剂。
使用方法:
1、本蛋白酶YZ剂混合物为100×的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶YZ剂混合物),混匀后即可使用。含有蛋白酶YZ剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。根据需要,0.1M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中。
2、待所需的YZ剂添加完毕混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
提示:蛋白酶YZ剂混合物尽量避免反复冻融,DY次使用后,可按照每次使用量分装冻存。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购40%丙稀酰胺溶液(37.5:1)优惠价。
温馨提示:不可用于临床ZL。