特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液(国产,进口)在内的一系列生化试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液(国产,进口)
产地:国产|进口
英文名:Kanamycine H2SO4 Solution
编号:RFT179
规格:5×1ml
卡那霉素是一种从Streptomyces kanamyceticus中分离出来的*基糖酐类抗生素。在分子生物学中,卡那霉素常被作为一种蛋白质合成的YZ剂,用于筛选具有卡那霉素抗性基因的克隆。临床上,卡那霉素用于ZL多种细菌的感染,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、结核杆菌等。卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液(Kanamycine H2SO4 Solution(10mg/ml)由卡那霉素硫*(代"酸")盐溶于水组成,经0.22μm过滤CJ,可以直接添加到培养基中。一般工作浓度为10~50μg/ml,其中严紧型质粒常采用10 μg/ml,松弛型质粒常采用50μg/ml。
使用方法:
根据实验具体要求操作,一般卡那霉素在LB中终浓度为10~50μg/ml。可以大体按照1/1000 LB体积加入10mg/ml Kanamycin溶液,如100ml LB中加入100μl 卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液。
注意事项:
1、尽注意无菌操作,避免污染。
2、避免反复冻融。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃避光,有效期6个月。
欲咨询购买卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液(国产,进口),请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·30%丙稀酰胺溶液(29:1)
编号:RFT065
英文名称:30% Acylamide Solution(29:1)
规格:100ml
30%丙稀酰胺(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的质量比例为29:1。常用于配制丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,常用于蛋白的分离。
储存条件:4℃,避光。
·15kb DNA ladder(250~15000bp)
编号:RFT011
英文名称:30% Acylamide Solution(29:1)
规格:100T(2×250μl)
本产品是由7条带状双链DNA条带组成的DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。7条带大小包括250,1000,2500,5000,7500,10000,15000bp。其中2500bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为0.8-1.0%,凝胶长度10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间35-40分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液(国产,进口)关键词:卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液,RFT179,Kanamycine H2SO4 Solution
·庆大霉素溶液(50mg/ml)
编号:RFT178
英文名称:Gentamicin Sulfate Solution
规格:5×1ml
硫*(代"酸")庆大霉素是一种*基糖苷类抗生素,对多种革兰阴性菌,如埃希氏菌、布氏杆菌、肠杆菌、弗朗西斯氏菌、耶尔森氏菌等,及部分葡萄球菌具有抗性。它YZ蛋白质合成的起始、延伸和终止。
CAS号:1405-41-0
分子式:C21H43N5O7·H2SO4
分子量:575.67
储存条件:-20℃避光,有效期12个月
·1kb plus DNA ladder(300~10000bp)
编号:RFT004
英文名称:Gentamicin Sulfate Solution
规格:100T(2×250μl)
本产品是由12条带状双链DNA条带组成的DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。12条带包括300,500,800,1000,1500,2000,3000,4000,5000,6000,8000,10000bp。其中2000bp条带含量为100ng/5μl,其余条带浓度含量为50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中进行电泳。
注:根据电泳梳子的厚度和宽度确定上样量。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl;窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8-10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间35-40分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液(国产,进口)关键词:卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液,RFT179,Kanamycine H2SO4 Solution
卡那霉素硫*(代"酸")盐溶液如何储存?
化学试剂的变质,大多数情况是因为受外界条件的影响,如空气中的氧气、二氧化碳、水蒸气、空气中的酸碱性物质以及环境 温度、光照等,都可使化学试剂发生氧化、还原、潮解、风化、析晶、稀释、锈蚀、分解、挥发、升华、聚合、发霉、变色以及燃爆等变化。经常检查储存中的化学 试剂的存放状况发现实际起过的储存期或变质应及时报告,并按规定妥善处理 ( 降级使用或报废) 和销帐。在正常储存条件下,一般化学试剂贮有不宜超过2年,基准试剂不超1年。为了避免环境和其他因素的干扰,所有化学试剂一经取出不得放回贮有容器: 属于必须回收的试剂或指定、退库、的试剂,必须另设专用容器回收或贮存,具有吸潮性或易氧化,易变质的化学试试剂必须密封保存,避免吸湿解,氧化或变质。 定期盘点,核对出现差错应及时检查原因,并报主管领导或部门处理。
·土壤基因组DNA提取试剂盒
编号:RFT036
英文名称:Soil genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本公司的土壤DNA提取试剂盒采用独特的腐殖酸去除液(缓冲液R2)能够有效去除腐殖酸;吸附柱CG能能有效去除金属等YZ因子,提纯得到的基因组DNA可直接用于PCR 反应,酶切或定量实验。
试剂盒组份:
试剂盒组成 | 50次 | 贮存方式 |
缓冲液R1 | 40 ml | 常温 |
缓冲液R2 | 6 ml | 常温 |
缓冲液R3 | 6 ml | 常温 |
缓冲液R4 | 10 ml | 常温 |
缓冲液 R5 | 20 ml | 常温 |
漂洗缓冲液WB1 | 30 ml | 常温 |
漂洗缓冲液WB2 (浓缩液) | 13 ml | 室温 |
洗脱缓冲液EB | 15 ml | 室温 |
Glass beads | 20 g | 常温 |
吸附柱CG | 50个 | 室温 |
收集管(2 ml) | 50个 | 室温 |
说明书 | 1份 | |
准备工作:
1. 准备55℃,70℃水浴;无水乙醇;异丙醇;制冰机;1.5ml离心管;2ml离心管
2. 按照标签所示在漂洗缓冲液WB2中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3. 每次使用前请检查缓冲液R2,缓冲液R3是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
标准操作步骤:
如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、称0.3-0.5 g土壤置于2ml离心管中,加入0.4 g Glass Beads,再加入780μl 缓冲液R1与100μl 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5min。
注:对含水量丰富的样品,可以预先离心除去部分水分后再称取样品。缓冲液R2是腐殖酸去除剂,100μl对大部分样品来说足以有效除去腐殖酸等YZ因子。对一些腐殖酸含量特别丰富的土壤, 缓冲液R2的量可以适当增加,但不能超过250μl,否则会严重影响DNA的得率。
2、加入200μl 缓冲液R3(R3如有沉淀37℃水浴完全溶解后再用),涡旋混匀。 70℃水浴处理10min。期间振荡几次。
注:如果要纯化革兰氏阳性菌的DNA,请在70℃处理完后,再90℃水浴处理2min。
3、12000 rpm(~13000g)离心1分钟,取600μl上清到1.5ml离心管中,加入180μl 缓冲液R4混匀。
注:转移上清时确保不要吸取到沉淀,转移的上清量不超过80%。
4、冰上放置5分钟。12000 rpm(~13000g)离心1分钟。 转移上清到新的1.5ml离心管中。
注:转移上清时确保不要吸取到沉淀,转移的上清量不超过80%。
5、加入0.7倍上清体积的异丙醇颠倒混匀。12000 rpm(~13000g)离心2分钟。小心地倒掉上清。
注:如果样品中DNA含量很低,加入异丙醇混匀后-20℃放置1小时。
6、加入350μl 缓冲液R5,待沉淀完全溶解后加入300μl无水乙醇,混匀。
注:为加速溶解沉淀,可置样品于55℃水浴中。
7、将上步混合液转移到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),12000rpm离心30秒,倒掉滤过液。
8、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗缓冲液WB1,12,000 rpm (~13,000×g ) 离心30 秒,倒掉废液。
9、向吸附柱CG中加入600μl 漂洗缓冲液WB2(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13000g) 离心30 秒,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
10、向吸附柱CG中加入600μl漂洗缓冲液WB2,12,000 rpm (~13000g) 离心30秒,倒掉废液,将吸附柱CG放入收集管中。
11、12,000 rpm(~13000g)离心2分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注:此步骤非常重要,其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
12、将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50–100μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,12,000 rpm(~13000g)离心2分钟。
注意:
a.洗脱缓冲液体积不少于50μl,体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13、DNA产物-20℃保存。
大量操作步骤(针对含微量核酸的样品)
1、称1-5g土壤置于10ml离心管中,加入1g Glass Beads,再加入3ml 缓冲液R1与200μl 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5分钟。
2、加入600μl 缓冲液R3,涡旋混匀。70℃水浴处理10分钟。期间振荡几次。
3、3000g离心3分钟,转移上清到新的离心管中,加入550μl 缓冲液R4混匀。
4、冰上放置5分钟。8000g离心10分钟。转移上清到新的离心管中。
5、以下按标准操作步骤的第五步继续操作。
DNA浓度及纯度检测:
基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。
常见问题分析:
常见问题 | 可能原因 | 建议 |
没有洗脱出DNA | 加入缓冲液R5后没有加入无水乙醇 | 样品过柱前,必须用无水乙醇调整核酸结合条件,否则核酸不能挂柱。 |
漂洗缓冲液WB2中没有加入乙醇 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。 |
低浓度的DNA量 | 缓冲液R2使用过量 | 按照步骤1加入适量缓冲液R2 |
洗脱体积太小 | 洗脱体积不能低于50μl,如洗脱体积太小,回收率将大大降低。 |
洗涤不恰当 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。 |
低A260/A280比率 | 蛋白污染 | 不要忽略步骤8中用漂洗缓冲液WB1冲洗吸附柱 |
洗脱液pH值不合适 | 确保使用的洗脱液pH在8.0以上,如低于8.0将导致DNA洗脱量过低。 |
下游应用不好 | 提取的DNA含盐量高 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。 |
提取的DNA含有乙醇 | 步骤11空甩柱子2分钟非常关键,彻底去除漂洗液中的乙醇。 |
YZPCR反应 | 增加缓冲液R2用量,彻底去除腐殖酸等PCRYZ因子;步骤4中确保不要吸取到沉淀。 |
储存条件:室温,有效期12个月。
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