北京现货PCR产物平末端DNA片段加A试剂盒厂家

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名称：北京现货PCR产物平末端DNA片段加A试剂盒厂家
编号：ALH352
品Pai：百奥莱博
英文名：Flat end DNA add A tail Kit
产地：国产|进口
规格：50次
本试剂盒提供了加A尾需要的所有成分，可以在20分钟左右完成整个过程。由Pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段，如该平末端DNA片段需要和T载体相连接，需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。

试剂盒组分：
Taq DNA polymerase——————————50μl
10×A-tailing buffer—————————50μl
dATP Mix———————————————50μl

操作步骤：
1. 平末端PCR 产物用PCR 清洁（无非特异扩增）或者胶回收纯化（有非特异扩增）。
2. 纯化好的平末端DNA 片段按以下反应体系加A尾:
平末端DNA 片段—————————7μl（不超过1μg）
dATP Mix————————————1μl
10×A-tailing buffer——————1μl
Taq DNA polymerase———————1μl
3. 轻轻混匀后72℃保温20-30 分钟。
4. 加A 尾的产物可以不需要再次清洁或者胶回收纯化，可直接用于连接反应。

储存条件：-20℃。

本品别名：DNA加A尾试剂盒 |PCR产物平末端DNA片段加A试剂盒

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ARB10355 人心肌特异性肌*蛋白T(cTnT)酶联免疫定量检测 Human cardiac isoform of tropnin t,ctnt ELISA KIT
ARB13564 兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA代测服务 Rabbit soluble vascuolar cell adhesion molecule 1,svcam-1 ELISA KIT
没食子兰 BOC-L-Ile 1562-85-2
ARB10527 人白喉抗体(DIphtherIA Ab)尿液中含量检测 Human diphtheria antibody ELISA KIT
ARB12317 大鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)Elisa分析 Rat hypoxia-inducible factor 1α,hif-1α ELISA KIT
F030203 HRP标记小鼠抗人IgG Fab抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG Fab*HRP
对二甲*基亚苄基罗丹宁 HBPIPU 536-17-4
ARB12929 小鼠皮质醇(CortIsol)elisa检测操作说明书 Mouse cortisol ELISA KIT
ARB12239 大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)定量分析 Rat vascular endothelial cell growth factor d,vegf-d ELISA KIT
57-30-7 Pentobarbital Sodium *
PY08-057  十六烷三甲基*化铵琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于绿脓杆菌的选择性分离培养
ARB10272 人干扰素调节因子(IRF)ELISA检测服务 Human interferon regulatory factor,irf ELISA KIT
胆酸*(猪) Cholic acid 206986-87-0
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PY02-019A  乙酰胺酚红琼脂  250克  
N-羟基-7-偶氮*并三氮唑 Esculin sesquihydrate 39968-33-7
ARB10880 人抗高尔基体抗体(AGAA)含量测试 Human anti-golgi appaRatus antibody,agaa ELISA KIT
16009-13-5 *化血红素 Chlorohemin
ARB10151 人Runt相关基因2(RUNX2)含量检测 Human runt-related transcription factor 2,(runx 2)ELISA KIT
F030220 HRP标记兔抗马IgG抗体 Rabbit Anti-Horse IgG*HRP
ARB12299 大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)elisa测定使用说明书 Rat anti-endomysial antibody iga,ema iga ELISA KIT
CYB166017-D 兔抗猪IgG-GOLD
维生素PP Triclosan 98-92-0
BL0914 FITC标记兔抗生物素抗体
7681-49-4 Sodium fluoride *化*
CBZ-L-羟脯*酸 AMPSO sodiu*(代"m") salt 13504-85-3
BL0902 FITC标记羊抗猪IgG抗体
ARB10510 人白细胞介素22(IL-22)含量检测 Human interleukin 22,IL-22 ELISA KIT
DL-乳酸 FMOC-OSU 50-21-5
BTN80916 96孔板质粒DNAOUT(离心法) 96 Microwell Plate Plasmid DNAOUT
ARB12130 大鼠甲状旁腺激素(PTH)酶免分析 Rat paRathyroid hormone,pth ELISA KIT
ARB10950 人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)血清中含量检测 Human glutathione peroxidase,gsh-px ELISA KIT
PY01-002  胰蛋白胨  250克  
BL0918 RBITC标记羊抗人IgG抗体
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·酵母质粒小量提取试剂盒
编号：ALH082
英文名称：Yeast high purity plasmid small amount rapid extraction kit
规格：50次
本试剂盒适用于酵母小规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合lyticase特异消化酵母细胞壁，能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除， ZH低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(50次)：
RNaseA(10mg/ml)—————————150μl
Lyticase————————————2500U
溶液YP1—————————————15ml
溶液YP2—————————————15ml
溶液YP3—————————————20ml
去蛋白液PD———————————25ml
漂洗液WB————————————15ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便，不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶液YP3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 通常酵母质粒拷贝数都很低，高拷贝质粒ZD得率一般为每5 ml 培养物提取1μg左右的质粒。用于下游试验时通常建议使用量为：1-5μl用做PCR 模板;5-10μl 用于转化大肠杆菌,选择GX率的感受态细胞。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成， 与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇， 0.1M Na2EDTA，14 mMβ-巯基乙醇)。配制方法：在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇，加入200 ml 0.5 M Na2EDTA (pH 8.0) ，不需要调节PH 值，定容到1L，4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
6. 菌体浓度检测一般OD600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml，由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD值变化也很大，以上仅供参考。
7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。

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