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北京百奥莱博专业生产供应细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)报价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)报价
规格:20次|50次
产地:国产|进口
编号:ALH158
英文名:Cells/Tissue Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder,通过选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder,ZD限度的减少了基因组DNA对凋亡DNA ladder的观察干扰,因此显著的提高了检测敏感度,反应可在微量离心管进行,2.5小时完成,快速方便;无需有机抽提,检测灵敏度极高,可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5~10×10^5 个,但投入的细胞量可在1×10^5~5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1~2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比,整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差往往造成难以准确取材,可能显著影响实验结果。但只要组织确实发生凋亡,有经验的用户也可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder
试剂盒组份(50次):
Extraction buffer ———10ml
10%SDS—————————1ml
Enzyme A————————1ml
Enzyme B————————1ml
Precipitant ——————7ml
为保持活性方便运输,Enzyme B 客户收到时为冻干粉,收到后加500μl 灭菌水(25 次)或者1ml 灭菌水(50次)溶解后-20℃保存。Enzyme A 和Enzyme B 为酶溶液,应该避免反复冻融降低活性,如果要分多次使用,按照每次使用量分装后-20℃保存。
注意事项
1. *化乙锭染色过度将降低DNA条带检测灵敏度,可用水冲洗凝胶10~30分钟。如冲洗过头可再用*化乙锭复染。可用更灵敏的DNA染色剂SYBR Green。也可进行丙*(代"烯")酰胺DNA凝胶电泳和DNA银染。
2. 对细胞进行干预处理后,凋亡可能仅在某一时间点或某一干预强度下最为明显。需要进行预试验确定ZJ干预时间或强度。此时也可用凋亡小体/hoeschst染色试剂盒(ALH160)快速染色凋亡小体观察。
3. 推荐起始细胞量为5~10×10^5 个,但投入的细胞量可在1×10^5~5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1~2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。六孔板的一个孔相当于一个35 mm培养皿长满后可得到1~10×10^5 个细胞,如果细胞凋亡发生率为10%,经过处理可得到约1~10×10^4个凋亡细胞,应该足以获得清晰的凋亡DNA ladder。反之如果不能从>3×10^6个细胞获得清晰的凋亡DNA ladder,表明其中凋亡细胞少于1%。此时增加细胞用量也难已奏效。
4. 从组织块提取凋亡DNA ladder。取10~20 mg组织块放入小玻璃匀浆器,加100~200μl Extraction buffer,上下手动匀浆15~20次。取出匀浆液,冰上5~10 min。振荡10秒。4500 rpm 10分钟收集上清液并转移到新1.5ml离心管,执行提取步骤3。另外一种方法是将30~50mg组织剪碎后在PBS里面匀浆,制成细胞悬液,离心收集细胞后接步骤2继续执行提取。
5. 采用高质量琼脂糖,使用宽度较小和厚度较窄的样品梳子,制作较薄的琼脂糖凝胶(厚度约2~4 mm);用较低的电压进行慢速电泳,将显著增加凋亡DNA条带检测灵敏度。电泳距离不要太长,否则将使小的凋亡DNA条带弥散而降低分辨率。
本品别名:细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)|细胞凋亡DNA Ladder分提试剂盒|组织凋亡DNA Ladder提取试剂盒
细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)报价正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·动物组织细胞免DNA提取PCR试剂盒
编号:ALH203
英文名称:Animal Tissue PCR Kit(Free of DNA Extraction)
规格:100次|500次
本试剂盒采用独特的裂解缓冲液快速裂解动植物组织,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐YZ物的2 × Direct PCR Mix扩增,扩增产物可直接上样电泳。动植物组织(哺乳动物,海洋动物,昆虫等)、细胞、唾液、毛发等。使用简单,高通量筛选;一般扩增大小<2.5kb
试剂盒组分(100次):
缓冲液AD1—————————0.75 ml
缓冲液AD2—————————7.5ml
2×Direct PCR Mix—————1ml
双蒸水(PCR级)———————10ml
注意事项:
1. 如果扩增条带较弱,可以适当增加或者减少模板加入量,裂解混合物模板一般可以在1μl~4μl内调节。
2. 如果非特异扩增较多,可调整退火温度,或者适当增减模板用量。
3. 各溶液使用完毕后,应该立刻盖紧盖子,以免PH改变影响质量。
储存条件:-20℃。
细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)报价关键词:细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA),细胞凋亡DNA Ladder分提试剂盒,组织凋亡DNA Ladder提取试剂盒
·血液miRNA提取试剂盒
编号:ALH071
英文名称:Blood microRNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解全血(液体样本)和灭活细胞RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, ZH低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15¬-30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA,对于血液样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。
产品组分:
Lysis buffer———————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3.独特的裂解液配方,可直接裂解全血,不需要先裂解去除红细胞。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1. DY次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,*仿,一次性注射器,研钵。
4. Lysis buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中ZDrRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
储存条件:室温,有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)
细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)报价关键词:细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA),细胞凋亡DNA Ladder分提试剂盒,组织凋亡DNA Ladder提取试剂盒
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温馨提示:不可用于临床ZL。