北京实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)大量库存促销

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北京百奥莱博专业生产供应北京实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)大量库存促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)
产地：国产|进口
规格：5ml
品Pai：百奥莱博
编号：WE0146
  本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等，适用于不同类型探针法荧光定量。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新GX热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围，对目的基因定量更准确。适用于无需ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0144)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0145)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0146)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

 

组份	WE0144-5ml	WE0145-5ml	WE0146-5ml
2×BaldStar TaqMan Mixture	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1．使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2．避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar Taq Man Mixture	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定ZJ的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反应程序：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

两步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	1 min

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

储存条件：-20℃，避免反复冻融
关键词：BaldStar TaqMan Mixture(High ROX),高含量ROX校正染料,WE0146,探针法,实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料)


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编号	名称
WE0195	miRNA提取试剂盒
WE0400	口腔拭子DNA样本保存管
WE0347	抗GFP标签多克隆抗体
WE0397	游离DNA样本保存管(5ml,PET)
WE0358	DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L)
WE0329	抗c-Myc标签抗体琼脂糖介质
WE0252	DH5α感受态细胞
WE0310	TBST(pH8.0,10×)
WE0115	尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)
WE0181	酵母基因组DNA提取试剂盒
WE0369	RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L)
WE0282	多彩预染蛋白Marker
WE0361	生物素标记驴抗小鼠IgG(H+L)
WE0288	SDS-PAGE上样缓冲液(还原，5×)
WE0237	T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
WE0197	血液RNA提取试剂盒(含DNase I)
WE0140	实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ)
WE0241	二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12)
WE0223	RNA酶YZ剂
WE0173	植物基因组DNA提取试剂盒
WE0166	无内毒素质粒中提试剂盒
WE0186	鼠尾基因组DNA提取试剂盒
WE0218	红细胞裂解液
WE0207	磁珠法唾液DNA提取试剂盒
WE0238	T4 DNA聚合酶
WE0247	TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体，连接酶)
WE0163	高纯质粒中提试剂盒
WE0127	全血Taq DNA聚合酶
WE0281	蛋白银染试剂盒
WE0254	BL21(DE3)pLysS感受态细胞
WE0177	柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)
WE0196	固定组织RNA提取试剂盒