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名称:M-MuLV反转录酶(RNase H-)(逆转录酶)价格
编号:YT393
英文名:M-MuLV Reverse Transcriptase(RNase H minus)
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
本品是一种经过改造和优化的M-MuLV反转录酶(RNase H-)。和普通的M-MuLV反转录酶相比,M-MuLV反转录酶(RNase H-)也是一种依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶,可以以RNA或DNA为模板在引物存在的情况下完成互补DNA链的合成;但缺失了Ribonuclease H(RNase H)酶活性,不能够选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA。M-MuLV反转录酶(RNase H-)是最常用的反转录酶之一。
特点:M-MuLV反转录酶(RNase H-)可以合成长达13kb的cDNA,而普通的M-MuLV反转录酶(RNase H-)仅能合成长达9kb的cDNA;M-MuLV反转录酶(RNase H-)的最适反应温度为42-45℃并且在55℃时仍然有很高活性,可以避免普通的M-MuLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。
用途:M-MuLV反转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后cDNADY条链的合成。M-MuLV反转录酶(RNase H-)合成的cDNADY条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。M-MuLV反转录酶(RNase H-)也可以用于DNA探针的标记,通过引物延伸(primer extention)来分析RNA,以及用于基因芯片荧光探针的标记。
来源:本M-MuLV反转录酶(RNase H-)由大肠杆菌表达,表达的基因为经过突变优化的编码Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase的pol基因片段。
活性定义:One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTMP into a polynucleotide fraction in 10 min at 37℃. Enzyme activity is assayed in 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 6 mM MgCl2, 10 mM DTT, 40 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNADY条链等的需要。
酶储存溶液:50 mM Tris, pH 8.3, 100mM NaCl, 1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。
Reaction Buffer(5X):250 mM Tris, pH 8.3 at 25℃, 250 mM KCl, 20 mM MgCl2, 50 mM DTT。
失活或YZ:70℃孵育10分钟可以导致M-MuLV反转录酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚*(polyamine)对M-MuLV反转录酶(RNase H-)有YZ作用。
本产品中M-MuLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl,用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。
储存条件:-20℃。
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磷酸二**一水物 2,5-Dihydroxybenzaldehyde 10049-21-5
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·谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒
编号:YT298
英文名称:Cellular Glutathione Peroxidase Assay Kit
规格:100次
本试剂盒是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶活性的试剂盒。绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是含硒的,且硒为该酶的活性中性组成部分。细胞内也有很少量的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。本试剂盒检测的是最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。本试剂盒可检测组织匀浆产物、细胞裂解产物等样品中谷胱甘肽过氧化物酶的活性。一个试剂盒可进行100次检测。
本试剂盒如果和总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(YT299)配合使用,可以定量检测出样品中不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
谷胱甘肽过氧化物酶可以清除活细胞内过氧化物,在保护细胞免受自由基损伤过程中起着关键作用 。细胞内的脂类容易和自由基发生反应,产生脂类过氧化物。谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物,从而消除自由基的毒害作用。
谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。
谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化*以及许多有机过氧化物,产生水或有机醇。如果以过氧化*为底物进行检测,则同样可以分解过氧化*的过氧化*酶的酶活性会干扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。本试剂盒利用了一种间接测定的方法。谷胱甘肽过氧化物酶可以催化GSH产生GSSG,而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH,通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。在上述反应中,谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤,因此NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。
本试剂盒利用了如下的反应原理,GPx为谷胱甘肽过氧化物酶,GR为谷胱甘肽还原酶,R-OOH为过氧化物。
本试剂盒提供的有机过氧化物试剂(t-Bu-OOH)在没有谷胱甘肽过氧化物酶存在的情况下不会和GSH产生反应,也不会被细胞内的过氧化*酶催化而分解。因而可以较为特异地检测出谷胱甘肽过氧化物酶的活力。由于t-Bu-OOH不能被不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶所催化,所以本试剂盒可以比较特异地定量检测最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
试剂盒组份:
样品匀浆液————————————————100ml
谷胱甘肽过氧化物酶检测缓冲液———————50ml
谷胱甘肽还原酶——————————————160μl
NADPH———————————————————15mg
还原型谷胱甘肽(GSH)————————————14mg
过氧化物试剂(t-Bu-OOH)——————————200μl
注意事项:
1. 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应,所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。如果在样品中的还原剂无法避免,例如DTT、巯基乙醇等,则这些还原剂的总浓度至少低于0.1mM。0.15mM的DTT可以YZ40%的酶活力。
2. 常用的Triton X-100、Tween 20等去垢剂都含有较高水平的过氧化物,会影响本试剂盒的测定。如果必须使用这些去垢剂,使用纯度较高并注明含较低过氧化物的去垢剂。
3. 为消除样品中可能含有的可以消耗NADPH的酶的干扰,可以检测不加过氧化物试剂的样品作为对照。
4. 样品可以立即测定,也可以-70℃冻存待以后测定。
5. 一定要严格控制反应时的温度,否则会引起较多误差。
6. NADPH不太稳定,要严格按照后续说明操作,谨防失活。
7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或ZL,不得用于食品或药品。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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温馨提示:不可用于临床ZL。