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北京百奥莱博专业生产供应Western一抗二抗清除剂(中性)折扣价,我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:Western一抗二抗清除剂(中性)折扣价
编号:YT073
英文名:Antibody Stripping buffer(Neutral)
品Pai:百奥莱博
规格:250ml
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
抗体清除剂选型表:
产品编号 | YT071 | YT072 | YT073 | YT074 |
产品名称 | Western一抗二抗清除剂(强碱性) | Western一抗二抗清除剂(弱碱性) | Western一抗二抗清除剂(中性) | Western一抗二抗清除剂(酸性) |
产品包装 | 250ml | 250ml | 250ml | 250ml |
pH | 强碱性 | 弱碱性 | 中性 | 酸性 |
对于膜上蛋白的保留效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
对于一抗二抗的去除效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
去除一抗二抗所需时间 | 15-20分钟 | 20-30分钟 | 20-30分钟 | 40-80分钟 |
适用膜的类型 | PVDF和NC | PVDF和NC | 仅PVDF | PVDF和NC |
腐蚀性 | 强 | 弱 | 无 | 弱 |
用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜,即硝酸纤维素膜时,不宜选用YT071N。从时间角度考虑,强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短,可以优先考虑。从价格因素考虑,强碱性的去除液性价比ZG。从安全性考虑,中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作,并进行适当防护,使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
对于特定的抗原和抗体,很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出ZJ的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
注意事项:
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
2. 本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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除
Western一抗二抗清除剂(中性)折扣价外,我公司正在打折促销以下产品:
·封闭液(用PBS配置,含曲拉通X-100)
编号:YT873
英文名称:Blocking Buffer(PBS)
规格:100ml
本品是ZX一代的快速GX封闭液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品,可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等实验中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品配制在PBS中,含有适当浓度Triton X-100。 按照每张膜封闭需要5-10ml封闭液计算,一个包装的本产品 可以封闭10-20张膜。
本封闭液快速GX。封闭时间通常仅需5-15分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速 封闭液相比,显示出更强的信噪比(参考下图)。
本封闭液封闭后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比。
本封闭液兼容性好,兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂,不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素,不会干扰基于生物素的检测。
本封闭液使用灵活。本产品配制在含有适当浓度Triton X-100的PBS中,可以直接用于相关实验,但也可以根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一抗或二抗的稀释。
本产品与BSA及国外同类产品的封闭效果对比参见下图。在相同样品和实验条件下,仅封闭液及封闭时间存在如下图所示的差异时,我公司的本封闭液封闭后的整体背景明显低于BSA封闭后的背景,而且目的条带亮度明显高于国外同类品Pai产品。
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每组实验从左到右依次为:5μl蛋白Marker,2.5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液,5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液。请注意对于抗体A,本封闭液比BSA和国外同类产品具有更低 的背景,并且和国外同类产品相比信号明显更强。对于抗体B,本封闭液比BSA具有更低的背景,和国外同类产品相比信号明显更强。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
注意事项:
1. 本产品推荐仅使用一次,重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比很高的一抗,例如一些内参抗体,本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用 过的封闭液混合。
2. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外,如有特殊需要,也 完全可以4℃封闭过夜。
3. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
4. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
5. PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异 常背景。
储存条件:4℃,有效期一年。
Western一抗二抗清除剂(中性)折扣价关键词:Antibody Stripping buffer(Neutral),YT073,Western一抗二抗清除剂(中性)
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·STAT5凝胶迁移探针(1.75μM)
编号:YT258
英文名称:STAT5 Probe For EMSA(1.75μM)
规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT5 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的STAT5结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约30个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行20个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition),可以进行30-60个冷竞争反应。
STAT5 consensus oligo的序列如下:
5"-AGA TTT CTA GGA ATT CAA TCC-3"
3"-TCT AAA GAT CCT TAA GTT AGG-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
Western一抗二抗清除剂(中性)折扣价关键词:Antibody Stripping buffer(Neutral),YT073,Western一抗二抗清除剂(中性)
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温馨提示:不可用于临床ZL。