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名称:谷胱甘肽琼脂糖(GST-琼脂糖)厂家
规格:2mL
编号:BTN120101
产地:国产|进口
英文名:Glutathione Agarose
谷胱甘肽琼脂糖亲和基质是结合谷胱甘肽(GSH)的4%浓度的交联珠状琼脂糖基质,可用于结合和分离纯化带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)等谷胱甘肽亲和性蛋白质分子,特别是重组表达的GST融合蛋白。可用于带有GST标签的重组蛋白的纯化和GST pull-down实验。
产品特点:
1.特异性高,不与非GST融合蛋白相结合。
2.高结合量,每毫升基质可结合5~10mg重组GST融合蛋白。
3.高度灵活,可填装任意品Pai的柱子。
储存条件:低温运输,4℃保存(切勿冻结),有效期一年。
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·柱式植物RNA大量提取试剂盒
编号:BTN80903
英文名称:Plant RNA Column large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是柱式植物RNA提取试剂盒(BTN71203)的大提升级产品,它结合了植物RNA提取试剂盒的GX性(其效果在近五十多种各类植物中得到验证,植物名单见植物RNA提取试剂盒产品介绍的附录)和柱式纯化系列产品的快捷性。
试剂盒特点:
1.样品处理量大,一次可以处理5g的植物材料。
2. 操作简单快速,处理一个样品只需要约二十分钟。
3. RNA 纯度更高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
4.产量高(具体根据材料不同而不同)。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 100ml |
溶液B | 30ml |
溶液C | 100ml |
大提离心吸附柱 | 5套 |
通用洗柱液 | 100ml |
RNA洗脱液 | 5ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 估算组织细胞的用量。每次大量提取一般需要3-5g植物叶片、或1-3g植物种子、或5-10g植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块),放入50mL塑料离心管中,加入20mL溶液A,然后用匀浆器匀浆。匀浆时会产生泡沫,但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织,但为避免氧化,砚磨时必须将组织浸泡在溶液A中进行,不能只在液氮中砚磨,然后再将砚磨物转移至干净的50mL塑料离心管中。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3.在离心管中加入5mL的溶液B和5mL自备*仿,在振荡器上充分振荡1-3分钟,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000~15000g离心3~5分钟,水相和有机相之间将有较厚的细胞破碎物。
5. 将上清液转移到另一干净的50mL塑料离心管中。下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。留下少量上清液不取。
6. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
7. 将一半的溶液转移到大提离心吸附柱中,13000-15000g室温离心3~5分钟,弃穿透液。
8. 将剩下的一半溶液转移到同一大提离心吸附柱中,13000-15000g室温离心3~5分钟,弃穿透液。
9. 加10mL 通用洗柱液,室温离心3~5分钟,弃穿透液。
10. 重复上步一次,加10mL 通用洗柱液,室温离心3~5分钟,弃穿透液。
11.室温离心1-3分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
12. 将大提离心吸附柱转移到一个自备的RNase-free 收集管中,加入0.5mLRNA 洗脱液,室温放置1-2分钟。
13. 13000-15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品。
14. 再加入0.5mL RNA 洗脱液,重复上面两步一次。
15. 将两次洗脱得到的RNA 立即使用或存放于-80℃待用
16. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
17. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
18. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
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温馨提示:不可用于临床ZL。