北京BTN100920型生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)价格厂家

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名称：北京BTN100920型生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)价格厂家
规格：50μL
英文名：Biotin-dUTP Solution
编号：BTN100920
产地：国产|进口
本产品是浓度为1mM的Biotin-11-dUTP。分子式：C28H41N6O17P3SNa3，分子量：927.6。分子结构式图如下：

Biotin-11-dUTP常用于PCR、缺口平移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等方法标记DNA。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

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·限制性内切酶SphI
编号：BTN17-0260
英文名称：Sph I Restriction Endonuclease
规格：500U
Sph I限制性内切酶识别位点：
5´...G　C A T G↓C...3´
3´...C↑G T A C　G...5´

产品组成：

 

成分	规格
SphI，10U/μL	50μL
Buffer A，10×	1mL
Buffer B，10×	1mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

贮存Buffer：10mM potassiu*(代"m")-phosphate(pH7.0＠25℃)，50mM KCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.15% Triton X-100，0.5mg/mL BSA and 50% glycerol。
1×Buffer A：10mM Tris-HCl(pH7.5)，10mM MgCl2，0.1mg/mL BSA。
1×Buffer B：33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃)，10mM magnesium acetate，66mM potassiu*(代"m") acetate，0.1mg/ml BSA。

活性定义：一个活性单位是指50μl反应体系中，37℃条件下，1小时内将1μg的lambda DNA完全分解所需的酶量。

热灭活：65℃下孵育20分钟可灭活。

使用方法：
1．单酶切DNA：
①在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
Sph I	0.5-2μL
10×Buffer A	2μL
DNA(0.5-1μg/μL)	1μL
nuclease-free water	16L

②轻柔混匀，短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
2．双酶切或多酶切DNA：
需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液(一般Buffer B可作为双酶切Buffer)，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
3．直接酶切PCR产品：
①在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
PCR reaction mixture	10μL(~0.1-0.5μg of DNA)
nuclease-free water	18μL
10×Buffer A	2μL
Sph I	1-2μL

②轻柔混匀，短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。


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75621-03-3 CHAPS
α-*乙酸 Rhodamine 123 86-87-3
脂磷壁酸 Hydroxynaphthol blue 56411-57-5
ARB11397 人神经肽Y(NPY)酶免分析 Human neuroPeptide y,np-y ELISA KIT
D-半胱*酸盐*(代"酸")一水化合物 DL-Phenylglycinol 32443-99-5
BL0797 狗IgG抗原(干粉)
F040103 牛血清白蛋白偶联三聚"青"胺 BSA-MEL
对甲*磺酸乙酯 Potassium carbonate sesquihydrate 80-40-0
BTN130910 Long-Taq DNA聚合酶 Long-Taq DNA Polymerase
ARB10384 人可溶性CD28(sCD28)酶联免疫定量检测 Human soluble cluster of differentiation 28,scd28 ELISA KIT
HC0138 程序降温盒
BTN130421 DEAE交换介质 DEAE Medium
75-78-*(代"5") 二甲基二*硅烷
肝素琼脂糖凝胶6FF Xanthine
102029-73-2 乙酰辅酶A Acetyl Coenzyme A
BL0263 DifcoTM Skim Milk 脱脂奶粉
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·柱式Oligo回收试剂盒
编号：BTN80401
英文名称：Oligo column recovery kit
规格：50次

·柱式腐殖酸清除剂
编号：BTN60801
英文名称：Column Humic Acid Scavenger
规格：30次
用绝大多数文献报道的方法从土壤或湖海沉积物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染，用百奥莱博的土壤DNA提取试剂盒从泥碳(腐殖酸含量超过50%)等腐殖酸丰富的土壤样品中提取的DNA也有腐殖酸污染，它们往往对PCR等后续反应有极大的YZ作用。本产品专门用于从土壤DNA样品中清除腐殖酸污染。

产品特点：
1.去污染效果好，能使腐殖酸的浓度降低10倍以上。
2.DNA回收率高，一般都在80%以上。
3.操作过程简单快速，只需要10分钟。
4.扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
5.处理后的样品原液或稍微稀释后即可用于PCR。

试剂盒组成：

成分	规格
专用上柱液	9ml
离心吸附柱	30套
通用洗柱液	30ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1.将0.3mL专用上柱液与50μl或50μl以下的含腐殖酸的DNA溶液轻柔混匀。如果DNA溶液体积超过50μl，专用上柱液的体积需按1:6(DNA溶液:专用上柱液)的比例相应增加。不要剧烈震荡，否则DNA容易断裂。
2. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中，套上收集管，放于离心管架上，静置3～5分钟，12000～15000g离心1分钟并倒掉收集管中的液体。若一次加不完，可分两次加入并离心。
3. 加入0.5mL通用洗柱液于离心柱中，12000～15000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
4. 重复第3步操作1次。
5. 12000～15000g离心1分钟以去除离心柱中的残留液体。
6. 将离心柱置于一新的干净的离心管(自备)中，加入50μl通用洗脱液，静置3～5分钟，12000～15000g离心1分钟。
7.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。

使用效果：

图注：从泥碳(腐殖酸含量大于60%)中提取的DNA用本产品处理前(B)和处理后(A)的颜色对比。处理前OD340为4.0(4为所用分光光度计的上限，实际读数可能远高于4)，处理后降低到0.3。处理前的原液、10倍和100倍稀释液均无PCR扩增，而处理后均可以扩增。

疑难解答：
Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染？
A：方法一是目测法，即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色，说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测ZD光吸收。注意：有腐植酸污染并不表示DNA不能使用，有的腐殖酸并不YZPCR扩增。
Q: 腐殖酸的ZD吸收波长是多少？
A：腐植酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质,其结构千差万别，土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同，所以其ZD吸收波长也各不相同。有的土壤的腐殖酸的ZD吸收波长在260nm(见Appl. Environ. Microbiol.，63：4993，1997)，有的则在340nm，所以用特定的波长测定OD值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma，Fluka等公司出售的腐植酸产品成分一般比较简单，其ZD吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
Q:是否腐植酸都会YZ后续的DNA反应？
A：否，因为腐植酸是一大类物质的统称，他们的结构和特性各不相同，所以是否对后续反应有影响通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生，而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生，说明可能有YZ作用。
Q：除本方法外，还有什么有效方法去除DNA样品中的腐植酸？
A：可以先电泳，然后用超大片段胶回收试剂Magic Gel DNArc(BTN60706)纯化DNA，如此得到的DNA原液一般可以直接扩增。
Q：本产品与柱式DNArc有何区别？
A：本产品由柱式DNArc改进而来，主要区别一是使用了不同的上柱液，减少了硅胶膜对DNA的非特异吸附，更适用于微量DNA样品；二是上柱液中含有腐殖酸去除试剂，适合于土壤DNA样品。
Q：在用土壤DNA进行细菌专一性PCR时，为何没加DNA模版的阴性对照有扩增产物出现？
A：这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取，提取过程中污染了E.coli的基因组DNA，而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版，所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。

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