柱式DNA清除剂大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

柱式DNA清除剂大量库存促销是高品质的RNA纯化产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多柱式DNA清除剂等RNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：柱式DNA清除剂大量库存促销
规格：50次
产地：国产|进口
英文名：Column DNA Scavenger
编号：BTN90318
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染，这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。

本产品是非酶DNA清除剂-2的柱式升级产品，可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷，同时还具有比非酶DNA清除剂-2操作上更快速的特点。

产品特点：
1. 操作更加简单快速，全部操作只需要几分钟。
2. 回收率高达80%以上。
3.GX，能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平，而RNA分子完整性不受任何影响。
4. 本身不含RNase污染。
5. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和4℃长期保存；而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
6. 性价比高，单位成本远低于RNase-free DNase。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	2.5ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存。

使用方法：

1. 将50μl总RNA溶液与溶液A按1：1的比例混合，充分震荡半分钟。注意：RNA溶液中盐(如*离子)的浓度不能高于0.2 M，如果RNA溶液的量不足50μl，加无RNase水补足到50μl以便后续操作。
2. 加入相当于RNA溶液和溶液A混合液总体积9倍体积的溶液B，颠倒数次充分混匀。注意：溶解溶液B沉淀。溶液B在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将混合液转移到离心吸附柱中，室温12000rpm离心半分钟，弃穿透液。
4. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
5.一次洗涤一般足够去除杂质。如果有必要，可以再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟并弃穿透液。一般情况，此步可以省略。
6. 加0.7mL溶液C到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透。
7.室温12000rpm离心半分钟。此步十分重要，否则会影响RNA的使用。
8. 将离心吸附柱转移到一个新的1.5mL离心管中，加入30-50μl RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。室温12000rpm离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

疑难解答：
Q：能否用本产品对同一样品进行反复处理？
A：可以。
Q：本产品跟DNA Scavenger-2(BTN70801)有何区别？
A：本产品为柱式升级产品，比DNA Scavenger-2更快速清除RNA样品中的DNA污染。

关于柱式DNA清除剂大量库存促销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·一站式miRNA柱式大提试剂盒
编号：BTN80906
英文名称：One-stop miRNA column large-scale extraction kit
规格：5次
本试剂盒是在柱式miRNA提取试剂盒(BTN80104)基础上自主开发的大提升级产品，是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

试剂盒特点：
1.样品处理量大，一次最多可以处理2g的样品。
2.一步法直接分离纯化小RNA，比Ambion的两步法和PAGE电泳回收法更简单。整个过程只需要二十多分钟。
3. 得到的小RNA 长度大部分在200nt以下，包括 5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
4.小RNA 纯净，OD260/280一般都在1.9以上。无基因组DNA的污染。可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
6.适用范围广，可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
离心吸附柱(大提)	10套
通用洗柱液	100ml
RNA洗脱液	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
由于离心吸附柱的吸附量限制，本产品每次提取只能处理2 g左右的各种组织，可以在50mL塑料离心管中操作。
1. 新鲜配制裂解液20mL。将溶液A和溶液B按 1:1的比例混合(即溶液A和溶液B各10mL)，然后根据组织细胞类型的不同分为下面几种情况使用。注意：溶液A和溶液B混合后必须立即使用，不要放置，否则会产生沉淀。如果产生沉淀，需加热到65℃使其溶解后才能使用。
a)对贴壁细胞：吸尽培养液，按每10 平方厘米细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，按每 1-5×106悬浮细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell，1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜的动物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中，每克组织加10mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/ mL 裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
d)对新鲜的植物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
e)对 RNAhold 保存动物或植物组织：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，放入50mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
2. 将裂解物转移至一个干净的50mL塑料离心管中，然后加入0.2-0.3倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需0.2-0.3mL *仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000～15000g室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约12-16mL)转移到一个离心吸附柱(大提)中以去除大RNA。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下部分上清液不取。同时吸取上清时缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。本试剂盒提供的离心吸附柱(大提)之间没任何区别，可以随机选一个做大RNA 吸附，另一个做小RNA 吸附。
5. 12000～15000g室温离心离心吸附柱(大提)1分钟，收集管中的穿透液。大RNA 将与离心吸附柱的膜结合，小RNA 将存在于穿透液中。如果需要回收大RNA，请按附录的方法操作，但需要单独购买本公司的通用洗柱液和RNA 洗脱液。
6.在穿透液中加等体积的溶液C，混匀。此时溶液的总体积约30mL。
7. 分一次或分两次将混合液转移到新的离心吸附柱(大提)中，每次转移后需要12000～15000g室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液。
 注意：不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱(大提)。
8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中，12000～15000g室温离心1分钟，弃穿透液。
9. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 12000～15000g室温离心1分钟以甩出残留液体。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 miRNA的使用。
11. 将离心吸附柱(大提)转移到一自备的、50mL RNase-free 收集管中，加入0.5-1mL RNA 洗脱液。
12. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的溶液即为miRNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

附录：
1. 用 10mL自备的通用洗柱液洗涤结合有大RNA的离心吸附柱(大提)。
2. 重复上步一次。
3.干甩一次。
4. 加入0.5-1mL RNA 洗脱液，室温放置2-3分钟。
5. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的溶液即为大RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。


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·大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞
编号：BTN130558
英文名称：E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Rosetta(DE3)pLysS是Rosetta(DE3)的衍生菌株，为高度严紧表达宿主菌，一般用于毒性含真核蛋白靶蛋白表达，lac透性酶突变，可以控制表达水平，提供稀有密码子tRNAs。抗性为*霉素(34μg/ml)。

基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)plysS pRARE(CmR)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

·植物RNA提取试剂盒
编号：BTN3080
英文名称：Plant RNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是我们公司自主开发的独特产品，其原理完全不同于异硫*酸胍/酚/*仿提取方法，克服了后者不能区分RNA(本质上是多糖)和其他植物多糖的缺点，能GX将RNA和其他植物多糖分开，同时还能有效去除多酚和其他植物次级代谢成份。其有效性在近五十多种各类植物(见附录，包括十分棘手的松柏类植物)中得到验证。

试剂盒特点：
1.适用于绝大多数植物，从五十多种植物材料中都成功提取到了总RNA，其中包括松针、柏树、香蕉等用胍/酚/*仿方法未能提取到RNA的植物(注：部分植物组织，如果实，RNase含量极高，需要另外加RVCYZ其活性)。
2. 操作简单快速，最短可以只需要约十五分钟，可以全在室温下进行。
3. 得到的RNA平均 OD260/280在1.9左右，可直接用于RT-PCR和Northern等研究。

试剂盒组成：

成分	50T
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	25ml
溶液D	25ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1、准备
a)估算试剂和组织细胞的用量并准备足够的*仿、75%乙醇和RNA溶解液(如RNApreserve、无RNase的水或有灭活残留RNase活性的液相RNase清除剂)。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
b)溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解。
2、匀浆
a)先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块)，放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5-20秒，将不超过1mL的匀浆液转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。有的植物组织(果实)含有大量水份，匀浆液会多于1mL，转移时也只取1mL。
b)如果用砚磨法破碎植物组织，需将植物组织浸泡在1mL溶液A中再砚磨，尽量避免植物组织跟空气直接接触，然后将砚磨物转移到新的1.5mL离心管中。
3、DY次分相
a)在装有裂解物的离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿，用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
b)室温12000～15000g离心5分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。
c)将上清液(约0.8mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。留下100μl上清液不取。
4、第二次分相
a)在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自备*仿，用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
b)室温12000～15000g离心3分钟，两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
c)将上清液(约1mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物。
5、沉淀
a)在上清液中加入0.5倍体积的溶液D，用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀，此时溶液呈白色浑浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。如果提取 50mg以下的微量植物组织样品，在此步加入我们公司的微量助沉剂RNApp。
b)室温12000～15000g离心3～5分钟，RNA将在管底形成白色沉淀(约黄豆大小)。如果组织样品量少或需要提高RNA回收率，也可以延长离心时间到20-30分钟。
c)小心移弃上清液，避免触及管底RNA沉淀。
注意：如果加入溶液D离心后沉淀漂浮在上面，说明植物糖份多，溶液比重大，可以少加植物样品，也可以适当加无RNase的水稀释直到沉淀能够沉下去为止。如果离心后管底有类似*仿的相出现，说明上一步离心时间不够或取上清时取到了下层的有机相，可以适当延长离心时间或取上清时留下约100μl不取或在第四步时加0.3mL的自备*仿。
6、DY次清洗
a)在离心管中加入1mL 75%的乙醇，振荡器上振荡混均30秒。
b)室温12000～15000g离心1分钟，RNA将在管底形成细小沉淀(约芝麻大小)。
c)小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
7、第二次清洗
a)重复第六步一次。
b)短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留液,注意不要吸弃沉淀。此步将有效去除残留的乙醇，否则后续反应会受到影响。
8、溶解
a)加入适量(一般为20-100μl)RNA溶解液使RNA沉淀溶解，存放于-80℃或立即使用。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA将变得十分难溶。
9、检测
a)RNA完整性的电泳检测
如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。如果是简单检测，可以使用TAE或我们公司的SuperBuffer-2 DNA/RNA两用快速电泳液，但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques，9：558，1990)。普通DNA上样液不含变性剂，也没经过去RNase处理，所以不要使用。
尤其需要注意的是不要使用TBE进行RNA电泳，因为TBE所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分，硼*(代"酸")通过与RNA核糖中的羟基发生络合反应，形成RNA分子内或RNA分子间的络合复合物，使同样长度的RNA具有不同的泳动速度，电泳条带弥散，同时有大的RNA络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关，而RNA样品中污染的其他多糖(如植物中提取的RNA)也会参与此反应，使硼*(代"酸")对RNA电泳的影响更复杂，所以TBE对RNA电泳的影响没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行，是避免使用。
由于动物细胞中70-80%的RNA为rRNA，后者又由28S(约4800nt)，18S(约1900nt)和5.8S(约120nt)三种组成，所以变性胶电泳后应该在UV下看见三条清晰的rRNA带。由于核酸长度与结合EB的数量成正比(当然还与RNA的二级结构有关，双链部分结合能力比单链部分强)，所以28S rRNA条带的荧光强度一般比18S rRNA条带的荧光强度强1.5-2.3倍。如果这两条rRNA带不清晰或比例小于此范围则表示RNA有降解(因为大的RNA被酶降解的可能更大)。
跟动物一样，植物果实和种子的RNA一般有三条电泳带，但植物叶片的RNA有四条或更多rRNA带，多余的RNA来源于叶片中大量存在的叶绿体。
b)RNA产量产率测定
将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%，因为核酸光吸收跟溶液pH相关，而DEPC水中的DEPC高压分解后产生的CO2与水反应生成碳酸，使溶液pH降低进而降低RNA的光吸收。RNA的产率还随组织的营养状态和组织的种类不同而不同，100mg种子的RNA产量一般为100-120μg，100mg叶片为30-60μg，100mg果实为20-40μg。
c)RNA纯度测定
无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，OD260/OD230一般在2.0-2.3之间，如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染，但一般不影响RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除，DNA和多糖污染可以分别用我们公司的DNA Scavenger和PS Scavenger去除。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，我们公司初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA变性。使用我们公司优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
Q：为何提取的RNA电泳时带型不清楚或根本没有条带？
A：可能原因：
  1、电泳没有使用MOPS缓冲液+甲醛变性胶；
  2、没有使用RNA专用的上样液或使用的RNA专用的上样液放置时间过长；
  3、植物组织样品中RNase很多，可以使用RVC(部分植物果实需要此处理)；
  4、植物组织中含多酚等影响提取的物质(如松柏等植物)，可以在溶液A中加入终浓度为0.1 M的硼*化*。


柱式DNA清除剂大量库存促销关键词：BTN90318,Column DNA Scavenger,柱式DNA清除剂

ARB10559 人丝*酸/苏*酸蛋白*(代"磷")酸酶(STK)含量测试 Human serine/threonine protein kinase,stk ELISA KIT
HC0111 透析袋MD44(8000-14000)
BTN130895 YPD液体培养基 YPD Liquid Medium
BTN81206 *基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain
BL0279 胰蛋白酶-EDTA含酚红
L-赖*酸甲酯盐*(代"酸")盐 DDD 26348-70-9
L-天门冬*酸* Eosin B 39162-75-9
ARB11980 大鼠E*黏蛋白/上皮*黏蛋白(E-CAd)elisa检测说明书 Rat epithelial-cadherin,e-cad ELISA KIT
PY04-067  TTC   0.1 mg/支×10支  每支添加于100mlTTC营养琼脂培养基基础中，用于药品卫生检验中细菌总数测定
ARB10518 人白细胞介素5(IL-5)酶联免疫定量检测 Human interleukin 5,IL-5 ELISA KIT
9001-48-3 谷胱甘肽还原酶(来源于酿酒酵母)Glutathionereductase
2,6-二*靛酚 TMPD 956-48-9
曙红Y(水溶) CAMP,Na 17372-87-1
003005 大鼠血浆 100ml|500ml
DP341 磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒
ARB13607 兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)酶免分析 Rabbit tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,traIL-r3 ELISA KIT
盐*(代"酸")万古霉素 Azophloxine 1404-93-9
ARB11240 人毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M1(M-AChRM1)elisa检测操作说明书 Human muscarinic acetylcholine receptor m1,m-achr m1 ELISA KIT
盐*(代"酸")*肼 L-Dopa 59-88-1
F040106 牛血清白蛋白偶联莱克多巴胺 BSA-RAC
DP333 大量血液基因组DNA提取试剂盒
硅藻土载体 New Methylene Blue N zinc chloride double salt  68855-54-9

我公司生产供应销*(代"售")的RNA纯化产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购柱式DNA清除剂大量库存促销。