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名称:荧光素酶报告基因质粒阴性对照 报告基因检测
编号:SY0113
产地:国产|进口
英文名:Luciferase Reporter Plasmid negative control
品Pai:百奥莱博
规格:1μg
Luciferase Reporter Plasmid negative control是萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)报告基因的阴性对照质粒,通过对质粒上可以被预测出的转录因子结合位点全部进行适当的突变处理,使质粒对转录因子的非特异结合降到了ZD。Luciferase Reporter Plasmid negative control阴性对照质粒是在 Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 和 pTA 之间插入了一段不含转录因子结合位点的杂乱序列,因此不会表达 Luciferase。
质粒图谱
储存条件:-20℃。
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·悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂
编号:SY0606
英文名称:Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent
规格:0.5ml
悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂是一种阳离子脂质体转染试剂,经优化专门用于悬浮细胞的转染,且适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染,对大多数真核细胞具有很高的转染效率。悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂以无菌的液体形式提供。
注意事项
1. 为得到ZY的转染效率,请先用无血清培养基(如OPTI-MEMⅠ培养基)稀释 Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent,之后与DNA或RNA做混合。
2. 使用高质量的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率,务必确保质粒的高纯度和无菌状态,彻底去除质粒提取过程中可能残留的*酚和高盐,因为上述酚类会对细胞造成损失,而高盐分会干扰“-复合物”的形成。质粒中的内毒素也是转染的大敌,务必去除。
3. 转染时培养基中不能添加抗生素。
4. 阳离子脂质体应该在4℃保存,要注意避免多次反复长时间开盖,因为可能会导致脂质体氧化而影响转染效率。
5. 需优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到ZD的转染效率。DNA和的比例,通常推荐是1:2 或者1:3。
储存条件:4℃,有效期一年。
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·*化乙锭
编号:SY0249
英文名称:Ethidium Bromide (EB)
规格:1g
本品为粉末状EB,可配制成10mg/ml的储存液。用于电泳检测时,工作浓度为 0.5μg/ml。*化乙锭,英文名Ethidium bromide,缩写EB,一种DNA嵌入剂,可插入DNA/RNA中,其插入双链RNA、双链DNA后荧光强度分别增强21倍、25倍,因此在低浓度(10μg/ml)染色后无需脱色,是分子生物学常用的一种核酸染料、移码诱变剂、DNA/RNA酶YZ剂。*化乙锭已用于核酸的许多荧光分析,还可结合到单链 DNA(虽然强度不高)和三链 DNA 上。另外,EB可与吖啶橙结合用于区分存活的、凋亡和坏死的细胞。
使用方法
一、胶染法(电泳前染色)
1. 制胶时加入EB 核酸染料使其工作浓度0.5μg/ml(每50mL 琼脂糖溶液中加入2.5μL 10mg/ml EB水溶液)。
2. 按照常规方法进行电泳。
注意事项
1) 此方法比较节省染料,250 μL(10mg/ml)染料大约可以做100块 50mL的胶。
2) EB兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
3) 胶染法不适合预制聚丙*(代"烯")酰胺凝胶,对于聚丙*(代"烯")酰胺凝胶请使用泡染法。
4) 在染料的存在下,线状双链DNA的迁移率减小了15%。
二、泡染法(电泳后染色)
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 室温下将电泳后的凝胶在含有EtBr (0.5ug/ml)的电泳缓冲液或水中浸泡30-45min。
3. (可选)对于检测较小量DNA(<10ng),可将EB染色后的凝胶于水或1mM MgSO4 中室温脱色20min,从而降低因未结合EB引起的背景荧光信号。
储存条件:室温,避光,有效期4年。
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温馨提示:不可用于临床ZL。