Koser氏枸橼酸盐肉汤产品优势及特点:
1. 培养基产品的生产、检验严格执行cGMP管理和ISO9001管理体系,符合生物制药原辅料要求,质量稳定可靠。
2. 化学成分明确,不含任何不明动物来源的成份,保证了细胞培养中原辅料的使用安全性。
3. 采用国内优质培养基原料,核心成分采用国外知名品Pai原料,从源头保证培养基品质。
4. 可维持各类细胞高密度培养,细胞繁殖速度快,既适用于实验研究也可大规模培养。
5. 公司为根据不同客户的使用需求,可定制培养基,全方位满足各类实际要求和使用需求。
Koser氏枸橼酸盐肉汤产品参数:
英文名称:Koser Citrate Medium
产品规格:100g
产品编号:HP1057
产品保存:RT
产品用途:用于大肠埃希氏菌检测
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Koser氏枸橼酸盐肉汤进行T细胞培养的相关操作步骤:
1.准备新鲜的外周血单个核细胞(PBMC);或根据标准的外周血单个核细胞解冻程序,在37°C的水浴,快速解冻(<1分钟)冷冻小瓶的外周血单个核细胞
2.用生理盐水洗涤细胞,根据需要也可加入2~5%的热灭活的的人自体血浆。
3.计数细胞可以使用电子(即Coulter计数器,VI-细胞)或手动的方法(即血球计数仪)。
4.离心细胞,清除洗涤缓冲液。
5.培养初期,用含细胞因子(如IL-2)的培养基重悬PBMC;CD3+ T细胞密度保持在大约0.5-1×106/ mL。转移细胞到相应的细胞培养容器(培养袋、培养瓶)。随后可应用各种操作激活T细胞,包括添加刺激的抗体或抗原抗原呈递细胞。无论培养T细胞的规模大小,细胞均可被隔离,激活和扩大。
6.在37℃,5%CO2的潮湿培养箱。在潮湿的气氛中,在37°C,5%CO2孵育培养容器。在对数生长期细胞,需要维持细胞所需的浓度。为了保持细胞指数生长期,当细胞密度超过1×106/ mL时,需要分离传代,维持细胞密度在0.5-1×106/ mL(例如,2×106个细胞/ mL以上,按1:4比例0.5×106细胞/ mL)。在静态平板培养中为了获得的气体交换,建议培养基深度不超过1到1.2厘米。
Koser氏枸橼酸盐肉汤进行CIK细胞培养的相关操作步骤:
1.采集健康人外周血,肝素抗凝,以Ficoll Hypaque淋巴细胞分离液分离获得单个核细胞(MNC)。
2.用免疫细胞无血清培养基漂洗3次,调节细胞密度为1×106cells/mL。
3.贴壁培养2h,收集悬浮细胞用免疫细胞无血清培养基调节细胞密度为1×106cells/mL。
4.加入rhIFNγ(终浓度为2000U/ml),放置37℃,5% CO2孵育箱中培养24h。
5.加入rhIL2(终浓度为1000U/ml)和CD3McAb(终浓度为100ng/mL),放置37℃,5% CO2孵育箱中继续培养。
6.以后每隔2-3d半量换液,用含有rhIL2(终浓度为1000U/ml)的免疫细胞无血清培养基换液。
7.一般来说在细胞培养至第15d左右时,即诱导成为CIK细胞。
温馨提示:以上过程作为常规免疫细胞培养的一般准则,如需在生物反应器或培养袋高密度培养,应优化条件来确定的操作步骤。
Koser氏枸橼酸盐肉汤等公司相关培养基:
菌种保存培养基
大肠杆菌显色培养基
绿脓菌素测定培养基/PDP King Medium A
哥伦比亚血琼脂基础
Honda氏产毒肉汤基础 Honda Toxin-Producing Broth Base
乳酸杆菌选择性琼脂 Lactobacillus Selective Agar
ONPG培养基
RPMI 1640
葡萄糖铵培养基 Ammonium Dextrose Medium
锰盐营养琼脂 Mn2+Nutrient Agar
3%氯化钠碱性蛋白胨水 3%NaCl Alkaline Peptone Water
抗生素检定培养基3号 Antibiotic Agar No.3
脑心浸出液肉汤 Brain Heaet Infusion Broth
沙氏琼脂培养基 Sabouraud's Agar
李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础 Listeria Enrichment Broth Base
营养琼脂
改良CCD琼脂基础(mCCD)
营养肉汤 (不含糖) (Dextrose-Free)Nutrient Broth
沙保罗液体培养基 Liquid Sabouraud Medium