特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")中等RIPA裂解液现货供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:中等RIPA裂解液现货供应
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
英文名:RIPA Lysis Buffer(Medium)
规格:250mL
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强,对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果,本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶YZ剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表:
产品名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
有效裂解成分 | 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.5% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.25% deoxycholate |
裂解强度 | 强 | 中 | 温和 |
对膜蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 一般 |
对胞浆蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
对核蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 较好 |
胞浆磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
细胞核转录因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
含蛋白酶YZ剂 | 是 | 是 | 是 |
含磷酸酯酶YZ剂 | 是 | 是 | 是 |
主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,co-IP |
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:对于培养细胞样品:1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的ZZ浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的ZZ浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
备注:
1.为取得ZJ的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒,不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
关于
中等RIPA裂解液现货供应的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·Oligo(dT)纤维素
编号:BTN131231
英文名称:Oligo(dT) Cellulose
规格:25mg
本产品是共价交联的Oligo(dT)纤维素亲和基质,可用于分离纯化带有poly(A)结构的真核生物mRNA,本产品结合能力大于400 A260 U/g。
储存条件:常温运输,4℃保存、有效期两年。
·PMSF溶液(10mg/mL)
编号:BTN100833
英文名称:PMSF Solution
规格:5mL
本产品为溶于异丙醇中的浓度为10mg/mL的PMSF溶液,其工作浓度为17-174μg/mL(0.1-1.0mmol/L)。PMSF在水液体溶液中不稳定,半衰期为110分钟(pH7.0)或35分钟(pH8.0),所以在每一步骤中都必须新鲜加入本产品。本产品作用是YZ丝*酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶)。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:临用前室温融解本产品,混匀,按照合适比例加入到组织细胞裂解液中,一般建议工作浓度为0.1-1.0mmol/L。
注意事项:1.PMSF 剧毒,严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。
2.PMSF在水溶液中不稳定,应在使用前从贮存液中现用现加入裂解液中。
中等RIPA裂解液现货供应关键词:BTN131007,RIPA Lysis Buffer(Medium),中等RIPA裂解液
·藻类RNA柱式提取试剂盒
编号:BTN120503
英文名称:Algae RNA Column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是专门用于各种藻类样品RNA提取的产品。
试剂盒特点:1. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
2. RNA纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA合成等。
3. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0 ×107个细胞)。
4. 非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 50ml |
溶液C | 100ml |
溶液D | 30ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 100ml |
RNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 将1-5mL液体藻类培养物在1.5mL塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心 1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.5mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入0.5mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的1.5mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入0.2mL自备的*仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的5-10mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约1mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为1mL,则加入3mL溶液C和1mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移0.7mL混合液到离心吸附柱中,室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入0.7mL混合液,重复上面的操作,直到混合液全部挂柱。
10. DY次洗涤:将0.7mL通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280比值不高,可以再用0.3mL通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 1.5mL塑料离心管中,加入30-100μL RNA洗脱液。具体加多少根据RNA浓度决定,建议先使用小体积洗脱液,这样浓度过高还可以稀释。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE(pH7.5-8.2之间)中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD比值没有意义。
中等RIPA裂解液现货供应关键词:BTN131007,RIPA Lysis Buffer(Medium),中等RIPA裂解液
NF-247 冻干羊抗人C3C血清
3-吲哚丁酸* Levamisole hydrochloride 60096-23-3
PY02-271 麦芽糖发酵管培养基 250克
1400-61-9 Nystatin 制霉菌素
ARB10547 human皮质酮/肾上腺酮(CORT)含量测试 Human corticosterone,cort ELISA KIT
BTN130580 小鼠抗GFP标签单抗 Anti GFP-Tag Mouse Mab
BL1188 0.5M EDTA(PH8.0)
HC0237 大龙单道整只消毒可调移液器
癸二酸二甲酯 3-Hydroxybenzaldehyde 106-79-6
ARB11342 人亮*酰*基肽酶(LAP)Elisa分析 Human leucine aminopepridase,lap ELISA KIT
*并-18-冠醚-6 BAEE 14098-24-9
BL0144 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型 Rat tail tendon collagen type Ⅰ
ARB12972 小鼠肌球蛋白(MYS)血清中含量检测 Mouse myosin,mys ELISA KIT
ARB14010 绵羊白介素2(IL-2)elisa检测 Sheep interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
明胶琼脂糖凝胶4B VD2
ARB10184 人α2抗纤溶酶(α2-AP)elisa检测操作说明书 Human α2-antiplasmin,α2-ap ELISA KIT
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购中等RIPA裂解液现货供应。
温馨提示:不可用于临床ZL。