动物细胞裂解液B(变性)供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")动物细胞裂解液B(变性)供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：动物细胞裂解液B(变性)供应
产地：国产|进口
规格：100mL
编号：BTN80807B
英文名：Animal Cell Lysis Solution(B)
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶YZ成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。

产品特点：
1.快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能ZD程度地保留蛋白天然结构和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高，主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验，还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

注意事项：
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶YZ剂复合物，可以更有效地YZ蛋白酶活性，防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究，在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶YZ剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

使用方法：

一：处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液，用冰浴预冷的PBS 洗两遍，去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
 注意：裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1～2×106细胞)需要0.1～0.2mL本产品；25 cm2培养瓶(3～6×106细胞)需要0.3~0.6mL；75 cm2培养瓶(1～2×107细胞)需要1～2mL。对于特别大或特别小的细胞，需要用户摸索ZJ用量。
4. 冰上放置10-30分钟(ZJ时间跟细胞系相关)，其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端，并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，新鲜使用。
7. 用前先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

二：处理悬浮细胞
1. 400×g，4℃离心10分钟收集悬浮细胞，弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍，步骤同DY步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品，充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞，期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀，留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，新鲜使用。
7. 使用前先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

三：处理组织块
1. 称量组织块，用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆，用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中，1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品，吹打混匀，放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次，共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，新鲜使用。
6. 使用前先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

想要了解更多关于动物细胞裂解液B(变性)供应的价格、品Pai、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
精*酸酶(牛肝) Sebacic acid 9000-96-8
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002011 肝素*抗凝马血
D-谷*酰胺 L-Cystathionine 5959-95-5
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ARB12886 小鼠甲状旁腺素(PTH)检测服务 Mouse paRathormone ,pth ELISA KIT
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L-脯*醇 Corticosterone 23356-96-9
硬脂酸* 1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose 4485-12-5
13573-16-5 雷氏盐(利英纳克盐) Reinecke salt
6578-06-9 Carbenicillin Disodiu*(代"m") Salt 羧苄青霉素
5-胞苷一磷酸二*盐 1,3-Indanedione 6757-06-8 
亲和硅烷 Xylanase
67-97-0 维生素D
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·预染蛋白Marker(14.4～97.4kD)
编号：BTN70704A
英文名称：Prestained Protein Marker(14.4-97.4kD)
规格：10次
本产品为蛋白质电泳标准系列，是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物，在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准，粗略估计其他蛋白质的分子量大小。

产品特点：
1．提供干粉型或溶液型，即开即用，非常方便。
2．预染色，在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动，也可以监测转膜效果。
3．可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4．本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围，单次上样，每个条带的浓度约为0.2μg/μL。

产品组成：

 

成分	A型	B型
预染蛋白标准(低分子量)	20T	-
预染蛋白标准(高分子量)	-	10T
1×SDS-PAGE上样液	0.5ml	0.5ml
说明书	1份	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、干粉型的使用
1．开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末，各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2．低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟，短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后，直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
3．使用时每次取一管，低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟，然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

二、溶液型的使用
1．将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存，每次只用一管，这样避免反复冻融。
2．使用时取一管室温放置直到液体融化。
3．沸水浴中加热3～5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
 电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B)，但由于共价结合了染料分子，各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白，所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量，一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量，则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102)，以避免误差。

本系列产品所含成分及分子量分布

分子量范围		低分子量	高分子量
肌球蛋白重链	200kD		有
*调素结合蛋白	130kD		有
兔磷酸化酶B	97.4kD	有	有
牛血清白蛋白	66.2kD	有	有
兔肌动蛋白	43kD	有	有
牛碳酸酐酶	31kD	有
人生长激素	22kD	有
大豆胰蛋白酶YZ剂A	20.1kD
鸡蛋清溶菌酶	14.4kD	有

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329-98-6 PMSF *甲基黄酰*
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羟高铁血红素 Boc-L-glutamine 15489-90-4
硫*(代"酸")铈铵 Phosphate Buffer solution 7637-03-8
37348-90-4 两性电解质3-10
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