利福平溶液厂家价格

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北京百奥莱博供应的利福平溶液厂家价格用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多利福平溶液等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：利福平溶液厂家价格
编号：BTN120700
英文名：Rifampicin Solution
品Pai：百奥莱博
规格：10mL
本产品为浓度为100mg/mL的利福平溶液(溶剂为DMSO)。利福平(甲哌利福霉素；3-(4-甲基-1-哌*(代"嗪")基亚胺甲基)利福霉素SV；Rifampin；Rifamycin AMP)，分子式：C43H58N4O12，分子量：822.94，CAS号：13292-46-1。利福平是从利福霉素B得到的一种半合成抗生素，能YZ细菌DNA转录合成RNA，可YZ成熟病毒粒子DNA和蛋白质的合成，是细菌核糖核酸聚合酶的特殊YZ剂，可用于ZL结核病、肠球菌感染等。除作为抗生素应用外，在分子生物学中可用做从细菌中去除质粒的试剂利福平。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期6个月。

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·T7核酸内切酶I
编号：BTN130635
英文名称：T7 Endonuclease Ⅰ
规格：250U
T7核酸内切酶I识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。该酶切割错配碱基5´端的DY、第二或第三个磷酸二酯键。其反应原理图如下：


产品用途：
1．识别错配DNA。
2．分解四方向交叉DNA或分支DNA。
3．检测或切割异源二聚体DNA和切刻DNA。
4．随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。

产品组成：

 

成分	规格
T7 核酸内切酶I，10000U/mL	25μl
10×反应缓冲液	1.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在 50μL反应体系，37℃条件下，1小时将90%以上的1μg超螺旋十字型结构的pUC(AT)转化成90%以上的线性结构所需要的酶量。
* pUC(AT)来自 pUC19，在其 EcoRI和PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。

实验步骤举例(使用T7核酸内切酶I消化PCR产物确定基因打靶效率)：
1．在一个塑料离心管中，按次序加入下列成分：

成分	加入量
PCR产物	200ng
10×反应缓冲液	2μl
超纯水	补水到19μl

2．取上步溶液，在PCR 仪内进行如下操作：

步骤	温度	时间
初步变性	95℃	5min
Annealing	95-85℃	-2℃/second
	85-25℃	-0.1℃/second
Hold	4℃

3．添加T7核酸内切酶I至退火后的PCR产物(20μL体系)：

成分	加入量
PCR产物	19μl
T7 核酸内切酶I	1μl

4．37℃保温15分钟。
5．添加1.5μL 0.25M EDTA终止反应。

备注：
T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时，必须控制酶量和反应时间。反应温度超过42℃时，会增加非特异性核酸酶活性。


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·一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂
编号：BTN60706
英文名称：One-tube DNA agarose gel recovery reagent
规格：30次
本产品可以直接从溶化的琼脂糖凝胶中沉淀回收单双链DNA的产品，也堪称最快速的胶回收试剂,操作时间只有玻璃奶式和柱式胶回收方法的1/3左右。本产品也可以用于单双链RNA胶回收。

产品特点：
1.超快，整个过程不到15分钟(对一个样品而言)，由溶胶(3分钟)，放置(2分钟)，沉淀(5分钟)和两次洗涤(各1-2分钟)几步组成。
2. 纯度高，回收产物可以直接用于连接、酶切、PCR、测序等各种反应，不影响后续酶反应。
3. 回收率高，一般大于50%。
4.适用范围广，可用于回收普通琼脂糖凝胶能够分离的DNA片段(一般在100bp-50 Kb 之间)，而柱式同类产品几乎都不能回收50 Kb的超大片段。
5.一管式操作，不需要任何样品转移步骤，使大片段DNA 保持完整，同时减少了污染的可能。
6. 既可用于回收单双链DNA，又可用于回收单双链RNA。
7.扩容性好，可以在一个离心管中(包括15mL或50mL离心管)进行大规模回收，没有ZD吸附量的限制；而柱式胶回收试剂都受ZD吸附量的限制。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	9ml
溶液B	3ml
溶液C	30ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。
  溶液A呈淡黄色，溶液B呈红色，如果颜色发生变化，则表示pH已经改变，请弃之不用。溶液C为无色液体，会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀，用前无需溶化，避开沉淀直接取上清液使用)。

使用方法：
1.从琼脂凝胶上切下目的DNA片段，放入1.5mL离心管中。尽可能多地去掉不含DNA的胶。如果方便称重以便估计需要的溶胶液(空的1.5mL离心管EP 约0.9 克，一片普通胶片的重量在0.05-0.1 克左右)。
2. 按0.1 克胶加300μL溶液A的比例加入溶液A，65℃保温3分钟使胶融化。其间可用摇晃几次以促进凝胶融化。如果放量使用，溶化胶的时间可能需要延长。
3. 待胶完全溶化后，按0.1 克胶加100μL溶液B的比例加入溶液B，充分混匀。如果回收20 Kb以上的DNA片段，混匀时需要温和震荡；对20 Kb以下的DNA片段，可以剧烈震荡。
4.室温静置至少2分钟，此时管内将出现大量红色颗粒状沉淀。此步十分关键，不能省略而直接离心。
5. 13000 g室温离心5分钟后，小心吸弃上清，管底将有黄豆大小的红色沉淀。
6. 加入0.8mL溶液C，充分震荡混匀。注意：溶液C瓶底有晶体状沉淀，用前无需溶解，但取用溶液C时需要避开沉淀。
7. 13000 g室温离心2分钟，小心吸弃上清，管底将有芝麻大小的白色沉淀。
8. 再用0.2mL溶液C重复第6-7 步一次，管底还有芝麻大小的白色沉淀。
9.小心吸弃上清后即得纯化的DNA沉淀，加入少量TE或水，充分吹打溶解。ZH还会有少量白色不溶沉淀，属于正常现象。

疑难解答：
Q：电泳为何不能检测到回收的DNA？
A：最可能原因是各步加入溶液后没有充分震荡混匀，其次是沉淀在各步吸弃上清时候不小心吸走而丢失，三是溶液A和溶液B的pH发生改变。
Q：电泳时为何有残留荧光物在加样孔中？
A：可能是琼脂糖凝胶中的杂质吸附的DNA，吸取DNA样品时短暂离心，只取上清液。这些不溶杂质一般不影响后续反应。使用高纯度的琼脂糖可以减少杂杂质的污染。我们一般使用OXOID的琼脂糖，得到的DNA可以用于常见的分子生物学后续反应。


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