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百奥莱博专业生产销*(代"售")绿如蓝核酸染料(可见光型)折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:绿如蓝核酸染料(可见光型)折扣价
品Pai:百奥莱博
英文名:DNAgreen(Visible Light)
产地:国产|进口
编号:BTN121002
规格:10mL
本品是国内可见光核酸染料,用于电泳时替代EB,在可见光下观察DNA或RNA的电泳。
产品特点:
1. 无毒。对人体和环境没有任何毒害,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2. 实时染色。可以在电泳过程中实时观察DNA和RNA的泳动,不需要任何额外的仪器设备或光源。注:本产品在紫外条件下不发光。
3. 由于避免了UV 对DNA的伤害,胶回收片段的克隆效率比UV下回收的片段高2-10倍,非常适用于PCR或酶切回收。
4. 稳定。对光、水和热的稳定性很好,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
5. 灵敏。检测灵敏度跟EB相当,能满足常规核酸电泳实验要求。
6. 使用方法多样。既可以电泳中染色,也可以电泳后染色;既可用于琼脂糖胶,还可用于PAGE。
7.跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如超快核酸电泳液、TBE、TAE)兼容,但在超快核酸电泳液中背景ZD。
储存条件:常温运输和保存(长期保存放4℃),保存期限一年。
使用方法之一:电泳中染色(琼脂糖电泳时使用)
1.在 100mL 融化的琼脂糖凝胶加入100μl 本产品,充分混合均匀后倒胶,凝固后凝胶将呈淡紫色。本产品不能跟其他任何核酸染料同时使用(如EB和SYBR Green I),否则会相互干扰,不会出现任何条带。使用时请严格按照此比例加入染料,否则将出现糊带现象。
2. 将凝固的琼脂糖凝胶放在 5分钟超快核酸电泳液、TEB或TAE中。为节约染料,不推荐将染料加到电泳缓冲液中。
3. 将DNA样品与6×A型DNAload 按5:1的比例混合后上样,由于本染料比EB 灵敏度稍低,所以DNA的上样量和DNA Marker的上样量比使用EB染料时多1倍。
注意:不推荐使用常规的含*酚蓝和二甲*蓝的上样液,因为这些染料的颜色跟DNA和RNA的颜色都将呈蓝色,将严重干扰条带的观察和解读。本产品提供的6×A型DNAload 只含相当于50bp大小的红色染料,不会干扰蓝色DNA和RNA 条带的观察。
4.电泳,电泳参数同常规的电泳。跑在前面的是红色的电泳示踪染料(来于上样液),其泳动速度相当于50bp的DNA。
5. 直接在光线明亮的位置直接观察电泳的进行,DNA和RNA 将呈现蓝色条带。如果有观察X光片用的灯箱,可以将电泳中的电泳槽或电泳后的凝胶平放在铺有塑料布的灯箱发光面的上面观察效果更佳。典型电泳结果如下:

6. 如果要回收DNA,则关闭电泳后直接切下所需条带,其余回收过程同常规方法。
使用方法之二:电泳后染色(PAGE胶染色必须使用电泳后染色法,琼脂糖电泳也可以选择本方法。不论是PAGE胶还是琼脂糖胶,本方法所需染料的用量比电泳中染色大2-10倍)
7. 按照常规方法进行 PAGE电泳或琼脂糖电泳。
8. 用电泳液将本产品稀释100-500倍(100mL 水需要加0.2-1mL 本产品),将胶放入,室温下摇晃染色1-10分钟即可看见蓝紫色的DNA和RNA条带。具体染色多长时间取决于DNA和RNA的浓度。
9.染色液可以避光放4℃保存,能反复使用数次。
疑难解答:
Q:为何电泳的前沿出现下图这种只出现一条带的情况呢?

A: 这是由于样品中有大量RNA小片段污染(基因组DNA提取时没有RNase处理的话常常会有大量RNA污染),这些小片段裹走了凝胶中的染料,使其后面的凝胶区域没有染料,因此后面的大片段没法染色。建议电泳后再染色观察大片段。
Q: 本产品可否用于RNA染色?
A:可以,也呈蓝紫色条带。
Q:本产品是否可以加入上样液中进行染色?
A:不行,本产品只能直接加入琼脂糖凝胶中进行染色或PAGE电泳后再染色。
Q:为何电泳时间长的话前端的DNA和RNA 条带很淡或根本看不见?
A:跟EB一样,电泳时本产品朝负极方向移动,当前端的DNA(最小片段)进入没有染料的区域时,已经跟DNA或RNA 结合的染料分子会逐渐脱落,所以条带会变淡或看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色。
Q:本产品在哪种缓冲液中效果?
A:本产品跟各种电泳缓冲液兼容,但背景最浅的是中超快核酸电泳液。
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ARB10741 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA检测服务 Human plasmin/fibrinolysin,pl/fbn ELISA KIT
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·低熔点琼脂糖
编号:BTN130835
英文名称:Low Melting Agarose
规格:5g
低熔点琼脂糖是指在糖链上引入羟乙基、甲氧基等基团后的琼脂糖,其能在30℃左右成胶,约65℃熔化,熔化温度低于大多数双链DNA熔点。利用低熔点琼脂糖的这种性质可以从凝胶中回收天然形式的DNA。本产品具有更高的筛过特性,更高的分辨率,更透明,是理想的DNA和RNA电泳产品。因其在37℃以下保持流动,亦适用于凝胶内进行的酶促反应、组织培养、细胞克隆以及病毒空斑实验。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。
·25mM*化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)
编号:BTN130307
英文名称:MnCl2,PCR Grade
规格:5mL
本产品为专门用于易错PCR的MnCl2水溶液,浓度为25mM,可用于调节MnCl2的ZJ浓度。由于Mg2+在PCR过程中可以稳定非互补的碱基对,Mn2+能够降低聚合酶对模板的特异性,因而调整两种离子的浓度,可获得不同突变频率的多样性文库。
*化锰分子量为125.8,CAS号为7773-01-5,水合*化锰外观为玫瑰色单斜晶体;无水*化锰外观为桃红色结晶。密度为2.977g/cm3。熔点是650℃。在高于熔点温度下升华。沸点1190℃。易溶于水,溶于醇,不溶于醚。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
·B载体
编号:BTN51104
英文名称:Magic Vector B
规格:2μg
本产品是专门用于GX快速克隆平末端DNA片段的专用载体,它是由Sma I酶切ClionG载体后经过纯化得到的即用型线性载体。跟ClionG载体一样,本产品带有自杀基因,Sma I位点位于该基因之中,只有当外源平末端DNA 插入片段插入Sma I位点,连接后的DNA转化的细胞才能生长,所以ZH得到的转化子几乎都是含有平末端DNA 插入片段的重组子。
产品特点:
1. 即用性,可以直接用于连接反应,免去繁琐的酶切,电泳检测,纯化,去磷酸化,再纯化等步骤。
2. 具有Clion-G载体的所有优点,包括零背景,适用于所有E.Coli菌株,多拷贝的colEI型复制起始位点。
3.GX率,由于自杀基因的使用有效地减除了载体自身环化对平末端DNA 克隆的影响,自身环化得到的转化子在有选择液存在时只占总转化子的1%-5%。
4. 应用广泛,可用于克隆酶切产生的平末端DNA,Pfu酶扩增的PCR片段,cDNA片段,3´和5´RACE片段,Taq酶扩增的PCR片段(部分为平末端)。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
自备试剂:
1.外源DNA片段。如果含又DNA片段的反应液中不含其他载体DNA(如酶切反应液,PCR反应液),可以不需要凝胶回收,灭活酶后即可直接将反应液用于连接反应。PCR引物5´端一般为OH基团,在PCR后用T4 激酶磷酸化,否则连接效率极低。
2.感受态宿主菌。DH5α,DH10B或HB101等常用E.coli菌株。
3.连接反应试剂。请购买现成试剂盒。
4. 选择培养基。在倒LB 平板之前随产品赠送的选择液和Amp(如果附赠的选择液含Amp,则不必须额外加Amp)按比例加入到LB 之中,使选择液终浓度为1×,Amp 终浓度为50μg/mL(如果附赠的选择液含Amp,稀释到1X后Amp的终浓度即为50μg/mL),混匀后倒盘。
使用方法:
1.连接反应
a. 取新的经过灭菌处理的0.5mL Eppendorf 管,编号。
b. 将100 ng载体DNA转移到无菌离心管中,加两倍摩尔量的外源DNA片段,折合成重量(ng)=(外源DNA片段bp 数X 100 ng×2)/5330bp(载体DNA 长度)
c. 加蒸馏水至体积为8μl,于45℃保温5分钟,使重新退火的粘端解链。将混和物冷却至0℃。平末端DNA片段的克隆可以省去45℃保温5分钟这一步。
d. 加入10×T4 DNA ligase buffer 1μl,T4 DNA ligase 0.5μl,混匀后用微量离心机将液体全部甩到管底,于16℃保温1-24小时。
e. 同时做只有外源DNA片段没有质粒载体的组对照反应。没有必要做只有质粒载体而无外源DNA的对照组,因为自身环化的载体不能生长,能够生长的转化子基本上是两个载体分子相互连接形成的新载体。但在有两倍于外源DNA片段存在的情况下,两个载体分子连接的机率很小。
2. E.coli感受态细胞的转化
a. 各取每组连接反应液2μl按标准方法转化E. coli感受态细胞。
b. 每组连接反应转化原液取100μl用无菌玻棒均匀涂布于筛选培养基上,37℃下培养半小时以上,直至液体被完全吸收。
MCS位点:

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温馨提示:不可用于临床ZL。