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百奥莱博专业生产销*(代"售")绿如蓝核酸染料(UV)北京现货促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:绿如蓝核酸染料(UV)北京现货促销
编号:BTN70303
规格:1.5mL
英文名:DNAgreen(UV)
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I(属于花*类染料)虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高,但由于其化学稳定性差(怕光、怕水、怕热),实验结果的重复性往往不尽人意;此外,SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位,很容易使DNA 条带模糊和扭曲,电泳清晰度和分辨率也不如EB。所以在实际应用中依然不能有效替代EB。本产品是同时具有EB 稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料
产品特点:
1.低毒。其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2. 灵敏。检测灵敏度跟EB相当,能满足常规核酸电泳实验要求。
3. 稳定。对光、水和热的稳定性跟EB相当,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4. 无分子间位移现象。不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5. 使用方法多样。既可以加入熔化的胶中,也可以电泳后染色,还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容,但在SuperBuffer-2和TBE中背景ZD。
7. 观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源,可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9. DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察(需要将胶放在黑色背景下)。由于避免了UV 对DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:虽然本产品的主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,但操作时还是戴上塑料手套。
使用方法之一:电泳中染色DNA(RNA的染色跟DNA完全一样)。
本方法是将DNAGREEN 直接加入溶化的凝胶中使用,只适用于琼脂糖凝胶电泳,不适用于PAGE。
1. 将DNAGREEN 直接加入到融化的琼脂糖凝胶中,每100mL凝胶加3-10μl DNAGREEN,混合均匀后倒胶。琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料(如EB和SYBR Green I,否则会相互干扰)。在100mL 琼脂糖凝胶中加入DNAGREEN的量不要超过10μl,否则背景将很强。注意:一定要保证琼脂糖彻底熔化,尤其是在DY次熔化胶的时候,否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光。
2. 将DNA样品与DNA上样液按比例混合后上样。注意:一定要使用不含SDS等去污剂的上样液,否则SDS 会跟染料结合,极大地降低灵敏度。
3.上样后电泳,电泳参数同常规的电泳。如果使用百奥莱博五分钟核酸电泳液SuperBuffer-2,需要较高电压,详见该产品说明书。
4.电泳结束后在300nm左右的UV下观察。注意:不要使用波长为260nm或360nm的UV,否则检测灵敏度会降低。如果DNA或RNA浓度较高,还可以直接在日光下直接观察(需要将胶放在黑色背景下),避免UV 对DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。
注:显色结果:在紫外下,DNA浓度非常高的时候是白色,浓度低的时候是绿色的,单链核酸有时是红色的。
5. 用配置了520-550nm 滤光片(一般呈黄色或深黄色)的相机拍照。注意:不要使用与EB 兼容的红色滤光片(它能阻挡520-550nm的光)。如果能再加上能滤去UV的滤光片,效果会更好。
6.后续 Southern、转膜或DNA胶回收实验按常规操作进行。
使用方法之二:电泳后染色DNA
本方法是在电泳后对DNA进行染色,适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE。但该方法需要单独的染色处理,染料用量较大,不推荐用于琼脂糖凝胶的染色。
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用去离子水将DNAGREEN 稀释500倍后(100mL 水需要加0.2mL DNAGREEN),将凝胶放入,室温下摇晃染色30分钟(对琼脂糖凝胶)或15分钟(对PAGE)。
3. 用水脱色 10-30分钟,具体时间需根据背景强弱决定,其余同方法一。
注意:电泳后染色液可以反复使用次数。
疑难解答:
Q:本产品可否用于RNA染色?
A:可以,不论RNA是在甲醛变性胶中电泳,还是在普通的SuperBuffer-2、TBE或TAE胶中电泳,RNA染色后在300nm下都跟DNA一样呈绿色。
Q:本产品是否可以加入上样液中进行染色?
A:不行,本产品只能直接加入凝胶中进行染色或电泳后再染色。
Q:为何前端(靠近正极)的DNA 条带很淡或根本看不见?
A:跟EB一样,电泳时DNAGREEN 朝负极方向移动,当前端的DNA(最小片段)进入没有DNAGREEN的区域时,已经结合的染料分子会逐渐从DNA分子上脱落,所以条带会变淡或根本看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色;之二是在每100mL电泳缓冲液中补加3-5μL染料。
Q:本产品在哪种缓冲液中效果?
A:DNAGREEN染料在不同缓冲液中背景荧光强度不同,从弱到强的顺序是:
SuperBuffer-2、TBE、TAE。在背景较强的缓冲液体中,可以适当降低染料的用量,比如100mL胶中加3-5μl。ZJ浓度需要稍做摸索。
Q: 为何电泳后前面部分(靠近正极)的胶呈白色,后面的胶呈黑色?
A: DNAGREEN染料带正电,电泳时往上走,胶的黑色部分是染料上移后留下的无染料胶。
本产品在TAE中背景,可参考上个问题答案更换电泳液以降低背景值。
Q:用SYBR染色的DNA在电泳时为何容易发生条带模糊和扭曲现象?
A:SYBR染料一般与DNA的小沟结合,但在常规电泳条件下该结合并不牢固,染料分子可以在标记的和未标记的DNA分子之间转移,使DNA分子的泳动速度时快(无染料结合时)时慢(有染料结合时),发生条带模糊和扭曲现象。嵌入型染料(如EB和本产品)与DNA 结合牢固,则无此现象。
Q:核酸染料是否都有毒性?
A:核酸染料对动物和人的毒性由多方面决定。
一是染料的膜通透性,EB 被归类为强诱变剂是由于其分子量较小,容易进入细胞内。而EB 二聚体Ethidium Homodimer(EthD)嵌入DNA的能力比EB 强上千倍,但毒性很小,就是由于其分子比EB大,不能透过细胞膜,所以毒性反而更低。SYBR 系列染料虽然低毒,但由于一般都溶于DMSO(因为容易水解,不能使用水溶液做溶剂)中,所以如果溅到皮肤表面,更容易进入皮肤。
二是染料是否容易被人体降解。比如EB在体外就很难降解,一旦进入体内能在人体内残留的时间可能比较长,增加了毒性;而SYBR Green I等染料(也能以嵌入方式与DNA 结合)由于不稳定,比较容易自然降解,所以毒性自然较低。
三是降解产物是否有毒性,比如用很多方法(如强碱法)降解EB 得到的产物有的比EB 毒性更大,而有的染料降解产物毒性却低很多,甚至无毒。
四是染料进入细胞核以后是否能跟DNA 结合,很多实验结果显示即使EB染料也很难嵌入型到染色体中,因为染色体中的DNA 已经紧密地与各种组蛋白结合。
五是细胞修复突变的能力,正常人体都有很强的修复突变的能力,如修复日光中UV 诱导的DNA突变。总之,一种DNA染料的毒性强弱是多种因素综合的结果。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/%E7%94%9F%E5%8C%96%E8%AF%95%E5%89%82%20(91).jpg)
更多有关绿如蓝核酸染料(UV)北京现货促销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·T7核酸内切酶I
编号:BTN130635
英文名称:T7 Endonuclease Ⅰ
规格:250U
T7核酸内切酶I识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。该酶切割错配碱基5´端的DY、第二或第三个磷酸二酯键。其反应原理图如下:
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/BTN130635.jpg)
产品用途:
1.识别错配DNA。
2.分解四方向交叉DNA或分支DNA。
3.检测或切割异源二聚体DNA和切刻DNA。
4.随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。
产品组成:
成分 | 规格 |
T7 核酸内切酶I,10000U/mL | 25μl |
10×反应缓冲液 | 1.25ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在 50μL反应体系,37℃条件下,1小时将90%以上的1μg超螺旋十字型结构的pUC(AT)转化成90%以上的线性结构所需要的酶量。
* pUC(AT)来自 pUC19,在其 EcoRI和PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。
实验步骤举例(使用T7核酸内切酶I消化PCR产物确定基因打靶效率):1.在一个塑料离心管中,按次序加入下列成分:
成分 | 加入量 |
PCR产物 | 200ng |
10×反应缓冲液 | 2μl |
超纯水 | 补水到19μl |
2.取上步溶液,在PCR 仪内进行如下操作:
步骤 | 温度 | 时间 |
初步变性 | 95℃ | 5min |
Annealing | 95-85℃ | -2℃/second |
85-25℃ | -0.1℃/second |
Hold | 4℃ | |
3.添加T7核酸内切酶I至退火后的PCR产物(20μL体系):
成分 | 加入量 |
PCR产物 | 19μl |
T7 核酸内切酶I | 1μl |
4.37℃保温15分钟。
5.添加1.5μL 0.25M EDTA终止反应。
备注:
T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。
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![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/%E7%94%9F%E5%8C%96%E8%AF%95%E5%89%82%20(261).jpg)
ARB12665 大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)酶免分析 Rat basic fibroblast growth factor 6,bfgf-6 ELISA KIT
ARB12603 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA检测服务 Rat luteinizing hormone-releasing hormone,lhrh ELISA KIT
BTN90408 即用型荧光定量PCR试剂盒 Instant Fluorescent qPCR Kit
ARB10223 人β促脂素(β-LPH)elisa检测 Human β-lipotropic hormone,β-lph ELISA KIT
CYB163009 羊抗人IgM-RBITC(μ链特异)
ARB11316 人促黄体激素(LH)elisa检测操作说明书 Human luteotropic hormone,lh ELISA KIT
F010203 小鼠抗人IgG Fab抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG(Fab)
ARB11641 人弹性蛋白(ELN)含量检测 Human elastin,eln ELISA KIT
BTN130657 无机焦磷酸酶,热稳定 Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable
ARB10504 人白细胞介素13(IL-13)含量测试 Human interleukin 13,IL-13 ELISA KIT
BTN100881 SDS溶液(10%,电泳级) SDS Solution,EG
BTN130861 φX174RF Ⅱ DNA φX174RF Ⅱ DNA
ARB11933 大鼠17-酮类固醇(17-KS)elisa检测 Rat 17-ketosteroids,17-ks ELISA KIT
ARB13146 小鼠活化蛋白C(APC)酶免分析 Mouse activated protein c,apc ELISA KIT
磷酸烯醇式丙*(代"酮")酸羧化酶 TAPS 9067-77-0
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![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/%E7%94%9F%E5%8C%96%E8%AF%95%E5%89%82%20(384).jpg)
·1M DTT溶液(RNase-Free)
编号:BTN60405
规格:10mL
·盐*(代"酸")万古霉素溶液
编号:BTN120703
英文名称:Vancomycin Hydrochloride Solution
规格:10mL
本产品为浓度为50mg/mL的盐*(代"酸")万古霉素溶液。盐*(代"酸")万古霉素(万古霉素盐*(代"酸")盐;Lyphocin;Vancor),分子式:C66H76Cl3N9O24,分子量:1485.67,CAS号:1404-93-9。
作用机制:盐*(代"酸")万古霉素为窄谱抗生素,仅对革兰阳性菌有效。其作用机制是YZ细菌细胞壁的合成,它主要和细菌细胞壁结合,而使某些*基酸不能进入细胞壁的糖肽中。多用于在万古霉素-肽络合物中键强度的研究和植物细胞培养试验。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期6个月。
·β-巯基乙醇(蛋白级)
编号:BTN131052
英文名称:β-Mercaptoethanol,Protein Grade
规格:10mL
本产品用于将蛋白质的二硫键剪切成巯醇的温和的还原剂。也称为β- 巯基乙醇或BME。经常加入到酶溶液中来防止由于半胱*酸巯基氧化/ 二硫键形成造成的催化位点失活;经常作为添加的保护剂使用,终浓度为5 及20mM,含不含EDTA 均可。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·Western印迹膜封膜液(尼龙膜)
编号:BTN100878
英文名称:Western Blot Blocking Buffer
规格:250mL
Western Blot实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。无蛋白封闭液可ZD限度减少交叉反应引起的非特异性背景。本产品可快速GX地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
·Southern DNA Marker DL2000(生物素标记)
编号:BTN120654C
英文名称:Southern DNA Marker DL2000(Labeled by Biotin)
规格:20次
Western Blot实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。无蛋白封闭液可ZD限度减少交叉反应引起的非特异性背景。本产品可快速GX地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/%E7%94%9F%E5%8C%96%E8%AF%95%E5%89%82%20(329).jpg)
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温馨提示:不可用于临床ZL。